《【最新】【开题报告】刘恩》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【最新】【开题报告】刘恩（9页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、本 科 毕 业 论 文 开 题 报 告 书不同产地牡丹皮的多种成分含量测定研究二级学院 中药学院专 业中药学（中药分析与鉴定方向）班 级 2009 级(1)班学生姓名 刘 恩学 号 0906503156指导教师 时 军 2012 年 12 月 5 日拟定的毕业论文题目 不同产地牡丹皮的多种成分含量测定研究一、选题依据（包括目的、意义、国内外现状和发展趋势，主要参考文献）目的：牡丹皮为芍药科植物牡丹的干燥根皮。始载于神农本草经，列为中品，已有两千余年的药用牡丹皮作为一种常见中药，为中华人民共和国药典1990 年版收载。具有抗菌消炎、抗过敏、抑制肿瘤、抗癌及解热 镇痛等作用 1。牡丹根及根皮中含有
2、丹皮酚(Paeono1)、丹皮酚苷(Paeonoside)、丹皮酚原苷(Paeonoside)、芍药苷 (Paeoninorin)总多糖等多种化学成分 2,3。为了全面比较和控制牡丹皮的质量，本实验的目的是建立测定研究不同产地、不同规格牡丹皮药材中丹皮酚、芍药苷，总多糖和总黄酮的含量。意义：丹皮为毛茛科芍药属植物牡丹(Paeonis suffruticosa Andr.)的干燥根皮。 始载于神农本草经, 列为中品, 后为各代医家广泛应用, 积累了丰富的用药经验.牡丹皮资源分布广泛,在重庆、安徽、河南等不同地区均有种植生产，其中以安徽、四川产量最大, 安徽铜陵凤凰山所产者, 习称“凤丹”, 四川
3、重庆市垫江县种植的习称“ 垫丹” 、“川丹”，不同产地的牡丹皮含主要药效含量差异也是很大的。因此开展不同产地牡丹皮的多种成分测定研究是非常必要，也是非常紧迫的。研究资料显示，丹皮酚等酚酸类成分和芍药苷等糖苷类成分是其主要有效成分 4.5。丹皮酚具有抗动脉硬化、抗心率失常、保护缺血组织、促进微循环、增强免疫力、抗癌、抑菌等作用 5.6；芍药苷具有保护脑神经细胞和心肌、抗局灶性脑缺血、提高造血机能、肿瘤抑制、免疫调节等生物活性 6-8。近年来研究人员从牡丹皮中分离得到黄酮类化合物，发现类黄酮具有调节血脂、消除氧自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗疲劳、抗衰老、抗癌、抗菌消炎和预防骨质疏松等 9生理和
4、药理活性。此外，又从牡丹从牡丹皮中分离出丹皮多糖, 并筛选出了降血糖的有效成分PSM2b ，牡丹皮多糖具有明显的降血糖作用，对糖尿病及并发症有一定改善作用 10。在牡丹皮及其复方制剂的质量标准中多用丹皮酚为定量控制指标。但考虑到芍药苷是牡丹皮中活性成分，而且糖类成分也发挥着重大的药效作用，所以同时测定不同产地牡丹皮中芍药苷和丹皮酚，总黄酮和总多糖的含量，为提高其质量标准、全面评价内在质量提供科学依据，具有非常重要的社会、经济意义。国内外研究现状及发展趋势：近年来，国内外对牡丹皮的药用研究在化学成分、临床应用、药理作用等方面都取得了一定进展。据文献资料报道可知，牡丹皮的化学成分有酚及酚苷类，单萜
5、及苷类化合物，三萜、甾醇及其苷类、其他成分。其中，酚及酚苷类是含量较高的一类化合物，主要是以丹皮酚为母核所衍生的一系列苷类化合物 11，丹皮酚是牡丹皮主要活性成分，为其主要提取物。单萜及其苷类化合物是主要化合物，目前已分离到将近 20 个该类化合物。该类化合物主要是芍药苷元及其类似物与葡萄糖缩合而成的单萜苷类，葡萄糖上还可以连接苯甲酰基和没食子酰基。该类化合物性质不稳定，容易形成互变异构体，如牡丹缩酮就以互变异构体（3:1 ）形式存在 12。三萜、甾醇类成分不多，目前只报道了 7 个化合物。其他成分包括槲皮素 13、6- 羟基香豆素 14、没食子酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸、反式咖啡酸硬脂酸酯及腺
6、苷等。药理学研究表明,牡丹皮具有抗炎、抗菌、抗血栓和动脉粥样硬化、免疫调节、保肝、降血糖、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常等作用。能够用于治疗皮肤病、原发性高血压、血小板减少性紫癜、抗过敏性鼻炎等疾病 15。而临床上常用于治疗热病吐血、衄血、血热斑疹，闭经痛经，跌打损伤，急性阑尾炎、高血压病、神经性皮炎、过敏性鼻炎等症。牡丹皮是一个药理活性广泛、高效、低毒的药物，具有很好的开发前景。其抗动脉粥样硬化、降血压、降血糖、镇静、抗惊厥、保肝等作用已被试验研究所证实。国家“七五”重点科技攻关项目 “常用中药材品种整理和质量研究”已对牡丹皮进行了包括本草考证等八项内容在内的专题总结。随着研究的不断深入,中药牡丹
7、皮的应用日益受到重视,除用于抗过敏、抗心血管系统疾病等治疗外,近年来又被用于牙膏、护肤品等日用化工和食品防腐剂、卫生保健品等领域 16。牡丹皮为具有区域性特色的优势中药材资源, 在今后的研究中,在中医理论的指导下, 对牡丹皮从现代药物化学、药理学、毒理学等多方面进行更深入的研究, 明确牡丹皮中的主要有效成分和有效部位,对其进行生物活性评估, 并开发成可供临床应用的天然药物新制剂, 必将产生良好的市场前景和社会效益。主要参考文献：1 国家药典编纂委员会编.中华人民共和国药典 2010 版一部M.中国医药科技出版社,160-1612 Sun GP, Wang H, Xu SP. An ti- tu
8、mor effects of paeonol in a ephepatoma bearing mouse model via induction of tumor cell apoptosis and stimulation of IL- 2 and TNF- alpha reductions JEur J Pharmacl,2008, 584(2): 246-2523 Du Q, Feng GZ, Shen L. Paeonol attenuates airway in flammation and hyper responsiveness in a marine model of oval
9、 bum in - induced asthma J .Can J Physiol Pharmacol,2010,88(10):1010 -10164 石琳，范盘生. 丹皮酚对实验性动脉硬化及血小板聚集的抑制作用J. 中国药理学报，1998，9（6）：555-5585 戴敏，刘青云，顾承刚，等. 丹皮酚对脂质过氧化反应及低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用J. 中国中药杂志， 2000，25（10）：625-6276 孙蓉，衣银萍，吕丽莉，等. 芍药苷对大鼠全脑缺血模型的影响J. 中国中药杂志， 2007，32（23）：2521-25227 杨军，何丽娜，何素冰，等. 芍药甙对大鼠皮层神经细胞钙超载
10、损伤的保护作用J. 中国药理学与毒理学杂志，2001，16（3）：164-1688 郭平，王继峰，王升启. 芍药苷对放射线致血虚证小鼠骨髓 Epo 和 G-CSF 基因的影响J. 山东中医药大学学报，2005 ，29（3）：236-2399 王觐,薛长勇,刘英华,等.棕榈叶中黄酮类化合物的提取工艺研究 .时珍国医国药,2008,19(3):65910 洪浩,王钦茂,赵帜平,等.丹皮多糖-2b 对 2 型糖尿病大鼠的抗糖尿病作用J.药学学报,2003,38(4):255-259. 11MasayukiY,EmikoU,AtsuhiroK,etalGalloyl-oxypaeoni-florin,
11、suffruticosides A, B, C, and D,five New antioxidativeglycosides,and suffruticoside E, a paeonol glycoside, from Chinese moutan cortex.Chem Pharm Bull,1992 ,40(8):2248-2250.12王祝举, 唐力，英赫炎. 牡丹皮的化学成分和药理作用 .国外医药( 植物药分册),2006,21(4):155-l5913 Lin H C.Two novel compounds form Paeonia suffruticosa.J Nat Prod
12、, 1998,61(3):343-346.14吴少华,马云保,罗晓东,等.丹皮的化学成分研究.中草药 ,2002,33(8): 679.15张健萍,李连垆,赵红江,等.牡丹皮的化学成分、药理作用及临床应用研究概况 J.中华中医药杂志,2006,21(5):295-297 16 唐海燕,杨石,王见宾.丹皮酚制备工艺、剂型改革及临床应用概述 J.江苏中医药, 2004 , 25 (2):58.2、研究内容（具体研究/设计内容，重点解决的问题，预期结果）1.具体研究/设计内容 1.1 不同产地牡丹皮药材各种成分的最优提取方法：提取各种成分的最优工艺是后期测定其含量的核心，结合国内成熟的提取牡丹皮丹皮
13、酚、芍药苷、总多糖和总黄酮的技术，本实验综合各种最优条件进行成分提取的工艺。.不同产地不同规格牡丹皮的采集。.不同产地牡丹皮的各种成分提取条件的选择：提取丹皮酚是易挥发成分，根据文献报道，超声提取是最适方法。本研究决定选择甲醇超声提取。至于研究比较提取时间，根据相关文献报道，30 min即可提取完全。.研究表明，蒸馏水浸提、温水法和沸水提取法提取及纯化的丹皮多糖。本研究主要是含量测定，不考虑沸水对多糖的结构和性质产生的影响。对于沸水提取法，可使最大多糖溶出，所以本研究采用80%乙醇回流提取1h去除杂质，残渣用沸水浸提1h。 .根据文献报道，通过采用单因素和正交试验，得出了从牡丹叶中提取总黄酮的
14、最佳工艺，所以本研究根据前人的基础下采用用25倍量70%乙醇在80条件下加热回流提取2h。1.2 不同产地牡丹皮药材各种成分含量测定：对牡丹皮药材各种成分，它们各自的结构都不一样的，测定的方法和条件也不一样，根据资料提供，在实验中采用最优的方法进行含量测定研究。.大量资料表明，测定牡丹皮中丹皮酚的含量方法主要紫外分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法、胶束电动毛细管色谱法、系数倍率法、一阶导数光谱法、正交函数/分光光度法、增效荧光法、化学发光法、双波长差示光谱法、毛细管电泳法等等。本次实验采用高效液相色谱法，因为其具有高分离能力、高灵敏度、应用广泛的特点。对于含有多组分混合物的中药及其制剂的分
15、析测定更具特色。所以本实验用高效液相色谱法测定丹皮酚和芍药苷。 硫酸- 苯酚法测定的原理是 :硫酸-苯酚试剂与单糖脱水形成的糠醛衍生物缩合成有色物质，在 490 nm 处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。 硫酸-苯酚法测定方法操作简便、显色稳定、重现性好、灵敏度高，可作为牡丹皮多糖及其他多糖的含量测定。所以本研究测定牡丹皮总多糖采用硫酸-苯酚法。 牡丹皮总黄酮含量测定，本实验采用经典的分光光度法。2.重点解决的问题2.1 确定牡丹皮药材各种成分的最优提取的方法，总黄酮和总多糖提取的时间和投料比。2.2 丹皮酚和芍药苷色谱的条件确定和优化，流动相的调整和选择等。2.3 牡丹皮药材各种成分的质
16、量考察。3.预期结果 3.1 完成测定不同产地牡丹皮的丹皮酚、芍药苷、总多糖和总黄酮的含量研究，为提高其质量标准、全面评价不同产地牡丹皮的内在质量提供科学依据，然后提交一套完整的研究资料。3.2 本实验以 HPLC 分析方法、硫酸 -苯酚比色法、 Al(NO3)3 显色法对不同产地牡丹皮不同活性成分进行比较，建立了最优的提取和测量方法。通过比较各产地不同活性成分的含有量差异，为今后科学评价和有效控制牡丹皮的质量提供依据。3、研究/设计方案（包括研究/设计方法、技术路线，理论分析、计算、实验方法和步骤及其可行性，可能出现的技术问题及解决办法）：1. 研究方法 本实验采用 HPLC 法测定丹皮酚、芍药苷，采用硫酸-苯酚比色法测定总多糖成分，总黄酮测定采用 Al(NO3)3 显色法。1.1 本方
