PS 的制备方法PS 20%、40%、50%、60%,90%(中国/美国)PS 的制备方法主要有:1、大豆、动物内脏及大脑提取法;2、PLD 催化合成法;3、化学合成法前两种方法已经应用与工业化生产,化学合成法目前已经取得了重大的进展,但还没有应用于工业化生产三种准备方法的优缺点:优点 缺点提取法 动物内脏和大脑提取的 ps 生物活性最好;大豆资源丰富,利用大饼提取PS 具有成本优势1,由于植物和动物中 PS 含量低,提取产物杂质较多,制备高品质的产品对纯化技术要求高;2,由于疯牛病和转基因问题对产品的安全性提出了挑战PLD 催化法 可以大规模应用于生产,也可以制备高品质的产品转基因问题带来的产品安全性问题合成法 可以通过合成路线的设计制备出单一的产品但现在技术不是很成熟一、 提取法1. 牛脑提取法(CN1583766A、CN1562081 )丙 酮 搅 拌 萃 取干 牛 脑 粉碎 颗 粒丙 酮 层过 滤搅 拌 萃 取正 己 烷滤 渣过 滤浓 缩 干 燥PS粗 品 正 己 烷进 行 纯 化 处 理 的 成 品2. 大豆提取法(CN102964379A)酒 精 搅 拌 萃 取过 滤 滤 渣 干 燥滤 液 浓 缩 干 燥上 柱 ( 硅 胶 )ps粗 品pc粗 品pc ps氯 仿 /甲 醇上 柱 ( 硅 胶 )洗 脱氯 仿 /甲 醇 洗 脱浓 缩 干 燥 浓 缩 干 燥二、 酶催化法OOOPOR1OR2OONHONH2OOHPLD 副 反 应主 反 应 OOOPOR1OR2OOOOOOPOR1OR2OOONH3CO酶 催 化 反 应 式酶催化工艺流程甘 油 管 菌 种 接 种 至 斜 面斜 面 培 养 基 斜 面 培 养甘 油 管 制 备 接 种 至 种 子 液种 子 液 培 养 基液 体 培 养基 中 培 养接 种 至 发酵 培 养 基发 酵 培 养 基含 磷 脂 酶 ( PLD)的 发 酵 液 发 酵超 声 破 碎过 滤PLD催 化 反 应丝 氨 酸PCPS成 品分 层 、 浓 缩PS粗 品粗 品 纯 化发 酵 液 加 工纯 的 PLD1. 磷脂酶的制备菌种通过各种培养基培养直至发酵,其目的就是得到磷脂酶(PLD) ,PLD是后面合成反应的催化剂,目前对 PLD 的利用有两种,如下:1) 利用发酵液通过细胞破碎后让胞内酶释放出来,过滤除掉菌体和一些培 养基等,PLD 在滤液中,利用滤液做催化反应,当然此方法的的滤液中含有许多杂质(微生物代谢产物不只是 PLD) 。
2) (200810053813.1 )对发酵液进行相应的处理,如盐析、除盐、离子交换、凝胶层析等得到较为纯净的 PLD,应用于酶合成催化反应2. 催化反应1) 两相体系:正己烷(甲苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯等)---水体系(JP 2001-186898)PC70%,得 50%PS 反应收率 85.2%,转化率 60.8%,反应成本较高,同时转化率较低2) 水均质化(JP2002051794 、DE102004002053)水的用量是原料的60%~95%,需要有特殊的均质化设备,已达到理想的均质化水平,保证产品的转化率3) 水反应体系(CN200810017261.9 ):PC 用 3~10 倍的水搅拌分散(因为PC 就是很好的表面活性剂) ,再加入含有丝氨酸、钙盐和缓冲溶液配制成的无机体系,在 PLD 催化下反应产品收率高,纯度高,其主要的副产物为磷脂酸 4) 均一有机溶剂反应体系(CN102676600):Ƴ —戊内脂和 2-甲基四氢呋喃混合溶剂:ps 的产率可以达到 90%以上5) 临界介质中反应说明:个人认为其中的 1、3、4 更可行,其三者中 1、4 更适合工业化,3 放大后对设备要求更高。
3. 纯化1) 溶剂萃取法:根据产物和杂质在不同溶剂中的溶解度不同,选用合适的溶剂进行萃取,如正己烷、石油醚、乙醚、氯仿等2) 薄层色谱分离法:硅胶薄板,洗脱液氯仿—甲醇3) 柱色谱:硅胶和氧化铝,洗脱液氯仿—甲醇4) 高效液相色谱:说明:适合大规模工业生产的只有 1.三、 化学合成法 OOOHH2OH2CHCNHCbzOBnO OOOOH2CNHCbzOBnOPOOR psHOHOOHOHAcetoneOHOOHONaIO4aBH4BnrNaH盐 酸 棕 榈 酸OC15H31OC15H31OBn OC15H31OC15H31OH。