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1、另附 1N（当量）NaOH 溶液的配置方法：1L 溶液中所含溶质的 Eq 数（或 1ml 溶液中所含溶质的 mEq 数）表示的浓度，称为当量浓度。N = 溶质的质量（g 或 mg）/ （溶质的当量配置溶液的体积）酸的当量 = 分子量 / 酸分子中被金属置换的氢原子数碱的当量 = 分子量 / 碱分子中氢氧根数盐的当量 = 分子量 / 盐分子中金属原子数的金属总价例：配 1 Eq/L NaOH 水溶液 100ml（即 0.1L）NaOH 分子量 40NaOH 当量为 40 / 1 = 40设需要 NaOH 质量为 X有：1 = X / （400.1）X = 4 g称取 4g NaOH 溶解于 10
2、0ml 双蒸水中，NaOH 浓度即为 1 个当量0.1M PBS：1000ml 蒸馏水中加NaCl 9g Na2HPO4.12H2O 6g NaH2PO4 .2H2O 0.4gPH： 7.2为博士德配方分子克隆上的 PBS 配方：NaCl: 8.00gKCl: 0.20gNa2HPO4*H2O: 1.56gKH2PO4: 0.20g1. 0.01mPBS (PH7.4)Na2HPO412H2O（磷酸氢二钠） 3.473gNaH2PO412H2O（磷酸二氢钠） 0.226gNacl 0.9g三蒸水 1000ml2. 加氯化钠的称 PBS，加氯化钾、氯化钠的称 KPBS。不加氯化钠、氯化钾的称 P
3、B。关于缓冲溶液 PB 的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制 PH5.78.0 的 PB 缓冲溶液。S 就是指氯化钠的含量，一般为 0.85，即是100ml 里面加 0.85 克，这个时候的 PBS 的浓度是 0.1M 的。一般在免疫组化洗涤中采用 0.01M的 PBS，pH7.07.4。我们在实验中直接将 0.1M 的稀释十倍，即可。最好能现配现用。母液4可以保持 12 周，影响不大。0.01M PBS （PH 7.2） （g/ L）NaCl 8.0KCl 0.2KH2PO4 0.2Na2HPO4.12H2O 2.9用 1N 的 NaOH 调节 P
4、H 值至 7.2ddH2O 定容至 1000ml，高压灭菌0.01PBS 液：NaH2PO4.2H2O 0.5gNa2HPO4.12H2O 5.9gNaCl 9g加双蒸水至 1000ml 差不多刚好 pH7.4PBS 的配制称取 NaCl 8.00g KCl 0.20g KH2PO4 0.20g Na2HPO4H2O 1.56g，加入蒸馏水至总体积为 1000ml，溶解后过滤除菌待用。0.01mol/L，pH7.4 的 PBS0.2mol/L Na2HPO4 81ml0.2mol/L NaH2PO4 19ml氯化钠 17g蒸馏水加到 2000ml其实道理是一样。0.1M 的 PB（不加氯化钠）
5、配方：1.储备 A 液，磷酸氢二钠 35.6 克，加重蒸水溶解至 1000ml。储备 B 液，磷酸二氢钠 13.8 克，加重蒸水溶解至 500ml。2.工作液（0.1M） ，PH A 液（ml） B 液（ml） 重蒸水（ml ）7.0 30.5 19.5 507.4 40.5 9.5 508.0 47.35 2.65 50 0.1M 的 PBS 配方：储备 A 液： 1M 的氯化钠溶液（氯化钠 5.844 克，加重蒸水至 100ml ）储备 B 液：0.2M 磷酸氢二钠（Na2HPO4 5.678 克加重蒸水至 200ml 或 Na2HPO412H2O14.32 克加重蒸水至 200ml ；储
6、备 C 液：0.2M 的磷酸二氢纳（NaH2PO4）2.76 克加水至 100ml 或（NaH2PO412H2O ）3.12 克加重蒸水至100ml；工作液：A 液 12.5ml 62.5ml 12.5mlB 液 8.1ml 40.5ml 81mlC 液 1.9ml 9.5ml 19ml加重蒸水至 100ml 500ml 1000ml（在工作液中 磷酸缓冲液浓度为 0.1M,L 氯化钠浓度为 0.125M,PH 为 7.37.4，于 4 度冰箱中克保存三月）我纯化蛋白用的 PBS：1.37 mM 的 NaCl 8g，2.7 mM 的 KCl 0.2g，10 mM 的 Na2HPO412H2O
7、3.58g，2 mM 的KH2PO4 0.27g，然后加 NaOH用 PH 计调 PH 值 8.0。从美国来的配方，我们实验室一直用的这个，很好使的！我们科在临床上做了很多免疫组化，结果很漂亮。是工作浓度，根据自己的要求配浓缩液Na2HPO412H2O（磷酸氢二钠） 13.42gNaH2PO42H2O（磷酸二氢钠） 1.95gNacl 42.5g三蒸水 5000ml关键是 pH，一定要调在 7.4 左右，其实配方都差不多，关键是 pH。可以用 NaOH 和盐酸调。(1)0.2M Na2HPO4: Na2HPO412H2O 71.64g 加蒸馏水至 1000ml;(2)0.2M NaH2PO4:
8、 NaH2PO42H2O 35.6g 加蒸馏水至 1000ml。按 81.0ml(1)+19.0ml(2)比例，再加 17gNaCl 和 1900ml 蒸馏水，即为 0.01MPBS 加入蒸馏水时不要全部加完，最后剩余 100ml 不要加，用 NaOH 或 Hcl 调节 pH 之后，再将蒸馏水补足。“0.01M 到底是指的什么？”指的是 H2PO4 或 HPO4 的浓度。 0.2M 的 H2PO4 或 HPO4 取 100ml，稀释 20 倍成 2000ml。此时的浓度为 0.2/20=0.01M。一般免疫组化用 PBS 都只包含 Na2HPO412H2O（磷酸氢二钠） NaH2PO42H2O
9、（磷酸二氢钠）Nacl 用于细胞培养的 PBS 需含有氯化钾我们实验室的配方：A 液： 0.1mol/L 磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至 100ml。B 液： 0.1mol/L 磷酸氢二钠：c 酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O ，MW177.99）1.78g ，加双蒸水至 100ml。或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O ，MW358.14）3.58g，加双蒸水至 100ml。pH A 液 （ml） B 液（ml） 5.60 9.50 0.255.91 9.00 1.006.24 8.00 2.006.47 7.00 3.006.64
10、 6.00 4.006.81 5.00 5.006.98 4.00 6.007.17 3.00 7.007.38 2.00 8.007.40-1.9-8.17.73 1.00 9.008.04 0.50 9.50PBS缓冲液的配制2011-07-08 21:31:51来源： 浏览次数：13630 网友评论 0 条PBS 是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结： 母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度 PB(pH=7
11、.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol.PBS 是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度 PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比
12、例适当稀释 即可，如：0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。若需要 NaCl 的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。另：其它各种另 PH 值的 0.2M PB（100ml) 配方 ：pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.5 6.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7
