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1、教学内容DNA重组技术的基本工具上课总序号编写人李立芹课时1班级使用时间审核人刘宏学习目标重 点DNA重组技术所需三种基本工具的作用难点基因工程载体所需要具备的条件教学方法 合作探究法 讲练结合课堂类型复习课河北省迁安一中高二生物 1.1.2基因工程的基本工具学案 新人教版基因工程概念例1以下有关基因工程的叙述，正确的是 （ ）A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强变式 1基因工程是一种新兴生物技术，实施该工程的最终目的是()A定向提取生物体DNA分子 B定向对DNA分子进行人工“剪切”C在
2、生物体外对DNA分子进行改造 D定向改造生物遗传性状二、限制酶和DNA连接酶例2. 下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是()A将单个核苷酸加到某DNA片段的不同末端，形成磷酸二酯键B将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C连接两条DNA链上碱基之间的氢键D只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能将双链DNA片段的平末端连接起来变式2 依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是 A切断a处的酶为限制核酸性内切酶 B连接a处的酶为DNA连接酶C切断b处的酶为解旋酶 D切断b处的为限制性内切酶【思考讨论】在基因工程中，切割目的基因和载体的限制酶必须用同一种吗？什
3、么时候必须用同一种？什么时候不能用同一种？【针对练习】1、2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：(1)过程中必须用_ _对Ti质粒和绿色荧光蛋白基因进行切割。(2)过程将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_。(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的_。获得的转
4、基因克隆猪，可以解决的医学难题是可以避免_ _。2、乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH 、Hind 、Sma 直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_(填字母代号)。A启动子BtetR C复制原点 DampR(3)过程可采用的操作方法是_(填字母代号)。A农杆菌转化 B大肠杆菌转化 C显微注射 D细胞融合(4)为检测人乳铁蛋白是
5、否成功表达，可采用_(填字母代号)技术。A核酸分子杂交 B基因序列分析 C抗原一抗体杂交 DPCR3、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点是GATC。根据图示，判断下列操作正确的是()A质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割B质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割C目的基因和质粒均用限制酶切割 D目的基因和质粒均用限制酶 切割4、基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一，已知有4种限制酶，其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端，2号和3号酶切产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列
6、如下图所示：请设计一个酶切方案，构建最佳基因表达载体(重组质粒)：_ 三、基因的运输工具-载体例4下列哪项通常不被用作基因工程的载体 （ ）A细菌质粒 B噬菌体 C动植物病毒 D细菌核区的DNA变式6不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A能复制 B有多个限制酶切点C具有标记基因 D它是环状DNA7、下列关于质粒的叙述，正确的是（）A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B、质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子C、质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D、细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的8、用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是(
7、)A常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒BDNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达学案答案：DDBD1同种限制酶 显微注射技术 标记基因 免疫排斥反应2、Hind和BamH 氨苄青霉素 ACC3、A 4、目的基因用2号和4号限制酶切割，质粒用号和2号DDBB课时作业答案1：15DCDCD 610CCBAC 1112BC13、(1)限制性核酸内切酶DNA连接酶(2)(3)人的遗传物质(基因)与羊的都为DNA，其物质组成和空间结构相同14、(1)基因工程(2)遗传DNA独立密码子(3)限制
8、性核酸内切酶、DNA连接酶(4)可以被分解吸收，不用拆线(5)基因重组基因突变染色体变异基因重组(6)D课时作业答案2 DDACCB7、蛋白质的合成 脱氧核苷酸 A-T C-G转录 Mrna tRNA 核糖体 雌雄8、(1)逆转录酶解旋酶(2)同一种限制酶黏性末端DNA连接酶(3)载体具有标记基因和一至多个限制酶切割位点、能够在宿主细胞中复制并稳定保存(4)受体大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞学案答案：DDBD1同种限制酶 显微注射技术 标记基因 免疫排斥反应2、Hind和BamH 氨苄青霉素 ACC3、A 4、目的基因用2号和4号限制酶切割，质粒用号和2号DDBB课时作业答案1：15D
9、CDCD 610CCBAC 1112BC13、(1)限制性核酸内切酶DNA连接酶(2)(3)人的遗传物质(基因)与羊的都为DNA，其物质组成和空间结构相同14、(1)基因工程(2)遗传DNA独立密码子(3)限制性核酸内切酶、DNA连接酶(4)可以被分解吸收，不用拆线(5)基因重组基因突变染色体变异基因重组(6)D课时作业答案2 DDACCB7、蛋白质的合成 脱氧核苷酸 A-T C-G转录 Mrna tRNA 核糖体 雌雄8、(1)逆转录酶解旋酶(2)同一种限制酶黏性末端DNA连接酶(3)载体具有标记基因和一至多个限制酶切割位点、能够在宿主细胞中复制并稳定保存(4)受体大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞4
