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1、分解纤维素的微生物的分离 同步练习目标聚焦 1简述纤维素酶的种类和作用 理解纤维素分解菌的筛选原理 3掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术精例点拨【例1】分离土壤中纤维素分解菌用到的方稀释倒平板法 涂布平板法单细胞挑取法 选择培养分离A D D【解析】分离土壤中纤维素分解菌，先进行选择培养，增大纤维素分解菌的浓度，梯度稀释，涂布平板、培养，单细胞挑取以获得纯培养。稀释倒平板法是先进行梯度稀释，然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至50左右的琼脂培养基混合、摇匀后，倾人灭菌的培养皿中，制成可能含菌的琼脂平板，保温一定时间即可出现菌落。涂布平板法是先将溶化的培养基倒人无菌培养皿，制成无菌平
2、板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品液涂布在整个子板表面，经培养后形成单个的菌落。答案：B。 【例2】根据下面的实验原理和材料用具，设计实验选择运载体质粒，探究质粒的抗菌素基因类别。 实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因有抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可能用作运载体。 材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。 方法步骤： 第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注入lmL蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。
3、第二步：将接种环，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿分别接种。 第三步：培养。将接种后的三个培养皿放人37的恒温箱中培养24h。 预期结果及分析：(1)设置1号的目的是的现象是。 (2)若仅2号生存，则说明。(3)若2号不存活，3号存活，则说明。(4)若2号、3号都存活，则说明。【解析】本题既考查实验设计能力，又考查了预期实验结果多层次思维能力，属于分析综合能力的考查。该实验设计了两个实验组(加青霉素和加四环素的培养基)，一个对照组(加蒸馏水的培养基)，遵循了实验设计的单一变量原则和对照原则。对实验结果的预期应分三种情况预测：一是仅2号存活，说明细菌质粒中只有抗青霉素的基因，没有抗四环素的
4、基因；二是2号不存活，3号存活，说明细菌质粒中有抗四环素的基因，没有抗青霉素的基因；三是若2号、3号都存活，说明细菌质粒中，两种抗性基因都有。答案：第二步：在酒精灯火焰上灼烧。(1)对照作用；细菌正常生长。(2)质粒上有抗青霉素基因，没有抗四环素基因。(3)质粒上有抗四环素基因，没有抗青霉素基因。(4)质粒上有抗四环素基因和抗青霉素基因。基础过关1下列纤维素含量最高的生物是西瓜果实 B小麦种子C花生果实 棉花果实。2纤维素酶可以将哪种物质分解?A牛肉片 B鱼片滤纸条 D塑料条3寻找纤维素分解菌应到A富含无机盐的环境中B富含纤维素的环境中湿润的环境中D池塘中 4在酸性贫瘠的土壤中分解纤维素占优势
5、的菌为 ( ) A真菌B细菌 C放线菌D兼性厌氧细菌和真菌 5选择培养的结果是培养液变 ( ) A清澈 B浑浊 C红色 D产生透明圈 6在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是 ( )A乳酸菌B硝化细菌C分解尿素的细菌D分解纤维素的细菌7两种刚果红染色法的结果是均会出现透明圈均不会出现透明圈C方法一出现，方法二不出现D方法一不出现，方法二出现8关于选择培养的正确叙述是A可以增加纤维素分解菌的浓度B可以减少纤维素分解菌的浓度C所用培养基是固体培养基D所用培养基是乎板培养基分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B富集培养这一步可省略，但培养纤维素
6、分解菌少C经稀释培养后，用刚果红染色D对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上10在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌完全除去其他微生物B没有意义，去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度D使纤维素分解菌充分长大11生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型为( ) A自养需氧型 B异养厌氧型C异养需氧型 D自养厌氧型 12反刍动物与其胃内的纤维素分解菌之间属于 ( ) 互利共生 种间竞争寄生关系 D捕食关系 13请分析下面的培养基配方，回答下面的问题：纤维紊分解菌的选择培养基 纤维素粉 5g NaNO3 1g Na2HPO47H20 12g KH2PO4 09g MgSO47H2
7、() 05g KCl 05g酵母菌 05g 水解酪素 05g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。 (1)此培养基配方中为微生物提供碳源和氮源的分别是 、 。 (2)此配方为 培养基。(根据物理状态)此培养基选择出的微生物主要是 。14设计一个实验，从牛的六位中分离出能够纤维素的微生物。实验依据：实验步骤：能力拓展1 下表为纤维素分解菌的鉴别培养基配方，请设计实验测定该培养基用于鉴定纤维素分解菌的最适值。CMCNa酵母膏KH2PO4琼脂土豆汁蒸馏水 56g 18 05g 15g100mL1000mL实验步骤(1) ;(2) ;(3) ;(4) 。(5)放在适宜条件下培养，观察并记录结果
8、。(6)仅凭一次实验能否准确测出培，养基的最适PH?为什么?2 富集培养的微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，是仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、PH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。利用富集培养技术从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物请分析回答：(1)本实验所需培养基为碳源为 。
9、(2)实验原理是 。(3)重复培养的目的是 。(4)的菌落中大部分是降解 微生物。(5)为 组，为 组，设置的目的是 。(6)采用 法，接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是 。答案基础过关 1D 2C 3B 4.A 5.B 6D 78A 9A 10C 11B 12A 13(1)纤维素粉 NaNO3 (2)液体 (3)纤维素分解菌 14(1)反刍动物瘤胃中有大量微生物存在，其中包括纤维素分解菌、淀粉分解菌、脂肪酸产生菌、甲烷产生菌以及纤毛原生动物、真菌和分解尿素的细菌；温度一般不超过39，PH为5868，营养丰富，为一座天然发酵器 (2)提取瘤胃内容物样品稀释涂布培养挑菌能力拓
10、展1(1)配制培养基 (2)将培养基的PH分别控制在3、5、7、9、11 (3)将培养基灭菌 (4)将等量的纤维素分解菌分别接种在上述培养基上 (6)仅凭一次实验，不能准确地测出培养基的最适pH。原因：实验所控制的pH并不是真正连续的，一次实验也可能有误差等。2(1)选择培养基 对羟基苯甲酸用以对羟基苯甲酸为惟一碳源的选择培养基，经富集培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物 (3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例 (4)对羟基苯甲酸 (5)对照 实验说明通过富集培养得到了要分离的目标微生物(6)单细胞挑取 接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物用心 爱心 专心
