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1、2012江苏省怀仁中学高二生物学案：1.1DNA重组技术的基本工具课标要求简述基因工程的原理和技术能力要求1）通过学习重组技术的基本工具，模拟制作重组DNA模型，初步掌握基因工程的基本方法提高动手能力2）通过对书中插图、照片等的观察，学会科学的观察方法，培养观察能力。3）通过对基本概念、基本原理、科学方法的正确理解和掌握，逐步形成比较、判断、推理、分析、综合等思维能力，具备能运用学到的生物学知识评价和解决某些实际问题的能力。知识网络体系 来源：主要从原核生物中分离 功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，限制性内切酶 并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷（分子手术刀） 酸二酯键
2、断开。切割后的DNA末端： 黏性末端 平末端 功能：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子DNA连接酶 T4 DNA连接酶：既能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，（分子缝合针） 种类 也能“缝合”双链DNA的平末端Ecoli DNA连接酶：只能将双链片段互补的黏性末端连接能在宿主细胞中保存下来并大量复制 条件： 有一个至多个限制酶切割点，基因进入受体细胞的载体 有特殊的遗传标记基因，便于筛选。（分子运输车） 质粒（常用）种类： 噬菌体的衍生物动植物病毒重难热点归纳限制性内切酶的功能黏性末端和平末端DNA连接酶与DNA聚合酶的区别载体必须具备的条件质粒与质体的区别常用的载体经典例题剖析下图
3、表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（ ）ACTTAAG，切点在C和T之间 BCTTAAG，切点在G和A之间CGAATTC，切点在G和A之间 DCTTAAC，切点在C和T之间【解析】 由图不难看出该限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切点是G与A之间。答案C基础试题训练1在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶 C.DNA限制酶、RNA连接酶、质粒 D.DNA限制酶、DNA连接酶、质粒2不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ）A能复制 B.有多个限制酶切点 C
4、具有标记基因 D它是环状DNA3下列四条DNA分子，彼此间间具有粘性末端的一组是 （ ）T A G GC C A TT A C CG G T A ABCD质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是能自主复制 不能自主复制 结构很小 蛋白质 环状RNA 环状DNA能“友好”地“借居”ABCD有关基因工程的叙述中，错误的是 （ ）ADNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B限制性内切酶用于目的基因的获得C目的基因须由载体导入受体细胞D人工合成目的基因不用限制性内切酶实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺
5、序，切点在G和A之间，这是应用了酶的（）A高效性 B.专一性C多样性 D.催化活性受外界条件影响人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是 A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性B. 有利于对目的基因是否导入进行检测C. 增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接8下列属于基因运载体所必须具有的条件是（多选） （ ）A、具有某些标志基因B、具有环状的DNA分子C、能够在宿主细胞内复制D、具有多种限制性内切酶9下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（多选） （ ）A大肠杆菌 B 质粒C动物病毒 D 线粒体 10在重组DNA技术中，不常用到的酶是A、限制性内
6、切酶 B、DNA聚合酶C、DNA连接酶 D、反转录酶11多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为A、平头末端 B、3突出末端 C、5突出末端 D、粘性末端12在基因工程中通常所使用的质粒是A、细菌的染色体DNA B、细菌染色体外的DNAC、病毒染色体DNA D、噬菌体DNA13研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内，以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插入到基因A、B中，而大肠杆菌不带任何抗性基因，则筛选获得“工程菌”的培养基中的抗抗生素首先应该A、仅有链霉素 B、仅有氨苄青霉素C、同时有链霉素和氨苄青霉素 D、无链
7、霉素和氨苄青霉素14镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是A. 解旋酶 B. DNA连接酶 C. 限制性内切酶 D、RNA聚合酶创新应用训练1.番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种。这种转基因番茄已于1993年在美国上市，请回答：（1）促进果实成熟的重要激素是 。（2）在培育转基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀”是 ，基因的“针线”是 ，基因的“运输工具”是。（3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是、 和 。2、限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC，限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶的切点。（1）请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。（2）请画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。（3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？5用心 爱心 专心
