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1、3周龄断奶仔猪胰酶和二糖酶发育规律的研究摘要：以3周龄断奶仔猪为试验材料，研究了断奶对仔猪胰酶和小肠粘膜二糖酶活性的影响。试验表明，3周龄断奶可以显著降低仔猪胰脏中胰淀粉酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和胰脂肪酶的活性，且在断奶后2周继续维持断奶时水平。断奶降低了小肠内容物中胰淀粉酶和胰脂肪酶的活性，但空肠和回肠胰蛋白酶、胰糜蛋白酶的活性在断奶后并未有下降。断奶降低了小肠粘膜中乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶的活性，断奶后2周空肠和回肠粘膜中蔗糖酶、麦芽糖酶的活性恢复至断奶前水平。关键词：断奶仔猪；胰酶；二糖酶仔猪断奶后，胰脏分泌各种消化酶的水平有所下降，小肠中胰酶的水平也比断奶前有大幅度的降低，成为限制仔猪
2、消化各种营养物质的因素1，2，3。饲用酶制剂的生产为补充仔猪断奶后消化酶的不足提供了条件。但外源性酶制剂的添加需要对动物消化酶的不足具有针对性。本试验采用3周龄断奶仔猪为试验动物，研究了3周龄仔猪断奶后消化系统胰酶和二糖酶的发育。1 材料与方法1.1 试验动物体况相似、胎次接近的4窝长白母猪中挑选20头公仔猪，随机分为4个重复。仔猪21日龄断奶。按照美国NRC（1998）营养标准配制断奶仔猪的日粮。1.2 样品制备（1）屠宰试验：21日龄断奶时、28日龄、35日龄每组每个重复随机取1只仔猪进行屠宰试验。各组猪屠宰后，首先将胰脏脂肪组织和结缔组织剥离，放入液氮中速冻。将小肠分为十二指肠、空肠和回
3、肠，放入液氮中速冻。（2）样品前处理：胰液上清夜的制备。取出冷冻胰脏，按W/V为1：5加入4去离子水，在冰浴中匀浆30秒。12000g/分钟、4条件下离心15分钟，取出上清液等分若干在-20下保存。小肠内容物上清液的制备。刮取各段小肠内容物，按W/V为1：2加入4去离子水，其他步骤同胰液上清夜的制备。刮取各段小肠粘膜，按W/V为1：4加入4去离子水，其他步骤同胰液上清夜的制备。1.3 样品分析胰脏、小肠内容物中-淀粉酶活性采用Bernfeld的方法改进完成4。胰蛋白酶活性采用Nistan的方法改进完成5。胰糜蛋白酶活性测定采用Nistan的方法改进完成5。脂肪酶活性的测定采用NaOH滴定法6。
4、小肠粘膜中乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性的测定采用Siddons的方法完成7。蛋白质含量的测定采用紫外吸收法进行测定6。1.4数据处理与统计分析数据采用SPSS10.0进行分析，采用Duncan法进行各指标的差异显著和多重比较。2 结果与分析2.1 3周龄断奶对仔猪胰脏中消化酶活性的影响3周龄断奶对仔猪胰脏中胰淀粉酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和胰脂肪酶的活性影响见表1。仔猪断奶后，胰脏中胰淀粉酶的活性在断奶后急剧下降。胰脏中胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和胰脂肪酶的活性在断奶后1周也有明显的下降，但幅度要小于胰淀粉酶下降的幅度。胰脏中4种消化酶的水平在仔猪断奶后2周都没有明显的恢复。表1 3周龄断奶对仔猪胰脏
5、中消化酶活性的影响effect of weaning on the digestive enzyme activities of the pancreas of 3 weeks周龄weeksU/g protein胰淀粉酶pancreatic amylase胰蛋白酶pancreatic trypsin胰糜蛋白酶pancreatic chymotrypsin胰脂肪酶pancreatic lipase3266372907a156.014.1a6.980.81a5263252a43042371b117.55.6b5.420.29b239880b53754687b95.38.9b4.880.47b217
6、9188b1）同列数据具有不同字母表示差异显著（Duncan法，P0.05）；字母相同或未标字母均表示无差异显著。2.2 3周龄断奶对仔猪小肠内容物中消化酶活性的影响3周龄断奶对仔猪小肠内容物中胰淀粉酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和胰脂肪酶的活性影响见表2。仔猪断奶后，空肠和回肠内容物中胰淀粉酶的活性急剧下降，且在断奶后2周继续维持在断奶时水平。十二指肠内容物胰蛋白酶和胰糜蛋白酶的发育与胰脏胰蛋白酶的发育规律相似，十二指肠胰蛋白酶活性在断奶后活性有所下降，但断奶并未降低空肠和回肠内容物胰蛋白酶活性，相反，这两种胰蛋白酶活性在断奶后1周维持断奶前水平，断奶后2周则较断奶前有显著提高（P0.05），约提
7、高至断奶前的2倍。断奶显著降低了小肠各段内容物中胰脂肪酶的活性，约降至断奶前水平的1/2。仔猪在断奶后2周，各段小肠内容物胰脂肪酶的活性继续维持在断奶后1周的水平。表2 3周龄断奶对仔猪小肠内容物中消化酶活性的影响部位division周龄weeksU/g protein胰淀粉酶pancreatic amylase胰蛋白酶pancreatic trypsin胰糜蛋白酶pancreatic chymotrypsin胰脂肪酶pancreatic lipase十二指肠duodenum3258612.480.07a2.330.23a80198a4269791.570.10ab1.080.05b44070
8、b5171361.510.19b1.070.07b53678b空肠jejunum339931a1.450.09a1.050.0574166a414818b1.910.32a0.880.0539839b511632b3.980.28b0.940.0443084b回肠ileum334731a2.120.17a1.100.08a70327a412710b3.350.26ab1.040.07a40632b518815b5.890.79b1.440.11b45041b（1）同列数据具有不同字母表示差异显著（Duncan法，P0.05）；字母相同或未标字母均表示无差异显著。2.3 3周龄断奶对仔猪小肠粘膜
9、中二糖酶活性的影响3周龄断奶对仔猪小肠粘膜中乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶的活性影响见表3。仔猪断奶后1周，各段小肠粘膜乳糖酶活性急剧下降，（P0.05）。乳糖酶在小肠各段粘膜的活性分布情况为：十二指肠空肠回肠。断奶可以显著降低仔猪断奶后1周十二指肠、空肠粘膜蔗糖酶的活性（P0.05）。断奶后2周，仔猪十二指肠和回肠粘膜蔗糖酶活性继续维持断奶时水平，空肠粘膜蔗糖酶活性则恢复至断奶前水平。断奶可以显著降低十二指肠、空肠、回肠小肠粘膜麦芽糖酶活性（P0.05）。断奶后2周，除十二指肠外，小肠其它各段粘膜麦芽糖酶活性均已恢复至断奶前水平，且回肠粘膜麦芽糖酶活性较断奶前有所提高（P回肠空肠，断奶后小肠各段酶
10、活的高低顺序则为：回肠空肠十二指肠。表3 3周龄断奶对仔猪小肠粘膜二糖酶活性的影响（U/g蛋白质）effect of weaning on the activities of the small intestine contents of 3 weeks部位division周龄weeksU/g protein乳糖酶pancreatic amylase蔗糖酶pancreatic trypsin麦芽糖酶pancreatic chymotrypsin十二指肠duodenum369.755.66a53.55.1a89.85.6a47.251.47b17.01.1b28.05.5b54.850.51b13.01.5b28.33.2b空肠jejunum341.135.57a45.53.7a62.47.7a43.730.32b17.80.7b22.30.9b54.480.60b31.63.2ab51.65.2a回肠ileum314.631.16a32.33.468.54.6a42.700.41b22.72.930.76.4b51.570.13b25.92.791.011.6c1） 同列数据具有不同字母表示差异显著（Duncan法，P空肠回肠。仔猪断奶后2周
