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1、流式细胞术 1 细胞染色 制备单细胞悬液上机获取数据数据分析 2 PMT PMT PMT PMT4 Dichroic Filters Bandpass Filters 流式细胞检测原理 Laser 1 2 3 4 Flowcell 3 流式数据表现形式 FS 细胞大小SS 胞内颗粒性 4 流式血液肿瘤数据分析步骤 1 寻找异常细胞2 定义异常细胞 异常细胞是什么细胞 异常细胞的量有多少 3 结论 5 如何寻找异常细胞 6 正常细胞群的分布 CD45 白细胞共同抗原 表达于所有白细胞 7 异常细胞群 8 异常细胞群 9 异常细胞的量如何计算 10 流式如何定义细胞 以白血病细胞表达的抗原标志作为
2、依据 11 粒细胞成熟过程 12 不同阶段粒细胞CD分子的表达情况 13 单核细胞的成熟过程 14 不同阶段单核细胞CD分子的表达情况 15 红系的成熟过程 16 B淋巴细胞成熟过程 17 T淋巴细胞的成熟过程 18 其他血液系统肿瘤的特异性标志毛细胞性白血病 CD19 CD103 CD11c CD22双阳性高表达CLL CD19 CD5 CMML CD14 CD68 CD13 CD33 高SSCMM CD19 CD38 19 流式报告单的结论如何得出 20 21 病例分析 22 病例一 异常细胞 23 髓系 淋系 24 25 流式细胞术检测结果表明骨髓细胞中髓系母细胞 CD34 或 和CD1
3、17 约占骨髓细胞总数32 同时伴有单核细胞系列分化倾向的细胞约占骨髓细胞总数约70 结果符合急性髓性白血病伴单核细胞系列分化 AML M5 因为原始单核细胞 幼稚单核细胞大于等于80 为M5a x小于80 为M5b 在分界线上 所以不区分a b 治疗方法类似 淋巴细胞 4 2T细胞占淋巴细胞44 9 CD4 CD8 0 66 未见明显异常 NK细胞占淋巴细胞3 9 未见明显异常 成熟B细胞占淋巴细胞40 7 为多克隆B细胞 未见明显异常 粒细胞 22 7相对比例未见明显减少 免疫表型提示粒细胞发育成熟标记物表达紊乱 单核细胞 37 7相对比例明显增多 其中约70 为成熟单核细胞 免疫表型为C
4、D14 CD64 CD11b CD13 CD33 HLA DR 和CD4 CD45Dim 33 0相对比例明显增多 为髓性原始 幼稚细胞 免疫表型为CD34 CD117 CD13 CD33 和HLA DR 非白细胞 0 2未见明显异常 26 病例二 27 28 淋巴细胞 41 5T细胞占淋巴细胞70 9 CD4 CD8 1 42 未见明显异常 NK细胞占淋巴细胞4 7 未见明显异常 成熟B细胞占淋巴细胞17 6 为多克隆B细胞 未见明显异常 粒细胞 10 9其相对比例明显减低 免疫表型未见明显异常 单核细胞 4 9未见明显异常 CD45Dim 36 1主要为原始 幼稚B淋巴细胞 其免疫表型为CD34 CD117 CD19 HLA DR 和CD10 非白细胞 6 1主要为细胞碎片 流式细胞术检测表明结果原始 幼稚B淋巴细胞约占骨髓细胞白细胞总数30 其免疫表型为CD34 CD117 CD19 HLA DR 和CD10 提示为前B淋巴细胞 结果符合急性B淋巴细胞白血病 B ALL 29 谢谢 30
