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1、1肠易激综合征小肠黏膜细胞的病理表现【摘要 】 目的 探讨肠易激综合征（IBS）患者小肠黏膜肠嗜铬细胞（EC） 、肥大细胞（MC）的数量和分布以及 EC 合成与储存 5-HT 的功能改变。方法 将符合罗马标准的 38 例 IBS 患者分为：便秘型 IBS 18 例（A 组） ，腹泻型 IBS 20 例（B 组） ，另选 20 例因各种原因接受结肠镜和小肠镜检查均未见明显病变的健康者作为对照组（C 组） 。通过小肠镜及结肠镜分别取小肠不同部位黏膜，应用免疫组织化学方法检测 EC 和 MC，并用电子显微镜观察 EC 的功能。结果 （1 ）A 组和 B 组每高倍镜视野下 EC 数量十二指肠降段黏膜分
2、别为 9.43.9、10.23.7，近端空肠黏膜为 6.72.6、6.22.4 ，回肠末端黏膜为 2.71.4、3.21.9 ，与 C 组各个部位 EC 数量10.53.4、 6.63.4、3.11.7 相比差异均无统计学意义（P0.05） 。 （2）A 组和 B 组十二指肠降段黏膜 EC 功能比末端回肠活跃，与 C 组相似。 （3 ）A 组和 B 组每高倍镜视野下末端回肠黏膜 MC 数量 38.79.4、35.85.5 与 C 组 29.84.4 相比明显升高（P0.05） 。A 组和 B 组十二指肠降段黏膜 MC 数量分别为19.64.7、 18.56.3，近端空肠黏膜 MC 数量为18.
3、85.8、 19.74.8，与 C 组 MC 数量 19.23.3、20.06.9 相比差异无统计学意义（P0.05） 。结论 IBS 患者小肠黏膜 EC 无明2显改变，而末端回肠黏膜 MC 增多。IBS-C 和 IBS-D 小肠黏膜 EC和 MC 的病理变化相似。 【关键词】 肠易激综合征 肥大细胞 5-羟色胺显微镜检查 肠黏膜 嗜铬细胞 小肠肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是最常见的功能性胃肠疾病1 。胃肠道黏膜的肠嗜铬细胞（enterochromaffin cell，EC ）所分泌的 5-羟色胺（serotonin，5-HT） ，在调节胃肠道运动和
4、感觉功能中起重要作用2 。胃肠道黏膜的肥大细胞（ mast cell,MC）释放多种生物活性介质，包括生物胺、酶和白三烯等，影响胃肠道的神经和平滑肌功能3 。目前国内、外有关 IBS 患者肠道黏膜 EC 和 MC 数量、分布以及 EC 合成、储存 5-HT 功能的研究结论尚不一致，且报道较少，为此笔者进行了这方面的研究，以探讨 IBS 的病理机制。1 资料与方法1.1 一般资料 2006 年 7 月2007 年 2 月从内蒙古民族大学附属医院普外科门诊患者中选取符合罗马标准4并且年龄18岁的 IBS 患者 38 例分为便秘型 IBS（constipation predominant IBS,I
5、BS-C）患者组（A 组）18 例，男 9 例，女 9 例，年龄3（41.515.1）岁；腹泻型 IBS（diarrhea predominant IBS,IBS-D）患者组（B 组）20 例，男 12 例，女 8 例，年龄（48.716.6）岁。同一时期从西安交通大学第二附属医院内镜室选取因各种原因接受结肠镜和小肠镜检查均未见明显病变的健康者 20 例，男 9 例，女 11 例，年龄（39.919.5）岁，作为正常对照组（ C 组） 。结肠镜（日本潘太克斯公司，型号 EC 3830F） ；小肠镜（日本富士能公司，型号 EP 450/p） ；兔抗人 5-HT 抗体（北京中衫金桥公司，编号 ZA
6、-0231,稀释度 1100） ；鼠抗人胰蛋白酶抗体（福州迈新公司，编号 MAB-0125，稀释度 1100） ；SP 9000 免疫组化染色试剂盒（北京中衫金桥公司） ；透射式电子显微镜（日本日立公司，型号H-600） 。1.2 方法1.2.1 小肠黏膜组织的获取 A 组、B 组和 C 组患者均在检查前至少 1 周停止一切可能影响胃肠运动的药物和治疗。先接受肠镜检查，在回肠末端取 6 块黏膜。休息 12 天后再行小肠镜检查（通过口腔插入小肠镜） ，在十二指肠降段和近段空肠各取 6 块黏膜。6 块黏膜中 3 块立即放入 40 g/L 甲醛，以备免疫组织化学检查。另 3 块放入 40 ml/L
7、的戊二醛固定液，以备电镜观察。1.2.2 免疫组化染色及观察 将选取的上述黏膜标本用常规方法进4行石蜡包埋和 SP 法免疫组化染色，EC 和 MC 分别用兔抗人 5-HT抗体和鼠抗人胰蛋白酶抗体作为一抗。二抗试剂盒采用 SP 9000 免疫组化染色试剂盒。随后在高倍光镜下观察,每张切片随机选 6 个不重叠的高倍视野（400 倍） ，计算 EC 和 MC 的总数。EC 和 MC 的计数以平均每高倍视野的 EC 和 MC 的个数表示。1.2.3 透射电镜下 EC 的形态学观察 将小肠黏膜标本从固定液中取出，10 g/L 四氧化锇固定 2 h，乙醇梯度脱水，700 ml/L 乙醇醋酸双氧铀块染色 2
8、 h 或过夜，环氧树脂 Epon 812 浸透、包埋，聚合后进行超薄切片,醋酸铀、柠檬酸铅染色后，透射式电子显微镜下观察、拍照。观察 EC 个体大小及形态，细胞内分泌颗粒的数量和形态变化。1.3 统计学方法 采用 SPSS 13.0 软件包进行数据分析，计量资料以均数标准差（xs）表示。A 组、B 组和 C 组之间 EC 和 MC的数量比较采用方差分析。P0.05） 。A 组、B 组和 C 组十二指肠降段黏膜的 EC 数量比5近端空肠黏膜显著增多（P0.05 ） ，近端空肠黏膜的 EC 数量又比末端回肠黏膜显著增多（P0.01 ） ，小肠黏膜 EC 的分布均表现为从十二指肠降段至末端回肠逐渐减
9、少。2.2 EC 在电子显微镜下的观察结果 电镜下 EC 大多分布在黏膜基底部、肠腺隐窝部位。在超微结构下其分泌颗粒有独特特征，分泌颗粒常位于细胞的基底部。A 组、B 组小肠黏膜 EC 的功能与 C组相比没有明显差异，3 组十二指肠降段黏膜 EC 的功能和末端回肠黏膜明显不同。十二指肠降段黏膜的 EC 个体较大，细胞内分泌颗粒较多且分泌颗粒形态多样（圆形、椭圆形、肾形、梨形均有） ，提示十二指肠降段黏膜 EC 的功能较活跃。而末端回肠黏膜的 EC 个体较小，细胞内分泌颗粒较少，分泌颗粒形态以圆形或椭圆形多见，提示末端回肠黏膜 EC 的功能不活跃。而近端空肠黏膜 EC 的功能界于上述两个部位之间
10、。2.3 MC 光镜下观察结果 光学显微镜下 MC 分布在固有层，细胞质呈棕褐色，呈卵圆形或椭圆形，散在于黏膜与腺体之间。A 组和B 组末端回肠黏膜 MC 数量为 38.79.4，35.85.5 ，与 C 组的 MC数量 29.84.4 相比较明显升高（ P0.05） 。A 组和 B 组每高倍镜视野下十二指肠降段黏膜 MC 数量分别为 19.64.7、 18.56.3，近端空肠黏膜为 18.85.8、19.74.8，在这两个部位与 C 组的 MC 数量19.23.3、 20.06.9 相比较差异无统计学意义（ P0.05） 。A6组、B 组和 C 组末端回肠黏膜 MC 数量比十二指肠降段和近端
11、空肠黏膜明显增多（P0.05） 。3 讨论由于在 IBS 患者的小肠黏膜取材比较困难，以往有关 IBS 时肠道EC 和 MC 的研究取材多在结肠和直肠黏膜处进行，个别的在末端回肠黏膜取材。本研究在国内较早观察了 IBS 时小肠黏膜 EC 和 MC的变化以及 IBS 患者胃肠道黏膜的病理改变。有研究表明 IBS 患者回肠末端黏膜 EC 数量没有变化5 ，Wheatcroft 等6的研究表明 IBS 小肠黏膜 EC 数量比正常对照组明显增加。本研究结果表明 IBS 患者小肠黏膜 EC 数量、分布和功能与正常对照组相比较没有明显变化。目前尚不清楚两种亚型IBS-C 和 IBS-D 患者的大便性状和排
12、便习惯不同，其发病机制是否相似2，3 。本研究结果提示两组患者小肠黏膜 EC 的组织学表现没有明显差异。末端回肠是 IBS 患者腹痛、腹胀、大便习惯改变和内脏高敏感的起源部位7 。有研究表明 IBS 时患者回肠末端黏膜、空肠黏膜的 MC 增多8 ，9 。而笔者的研究结果显示 IBS 时患者末端回肠黏膜 MC 数量和正常对照组相比显著增多，十二指肠降段和近端空肠黏膜 MC 的数量则与正常对照组相似。可能的原因是末7端回肠部位 MC 增多，导致释放的多种生物活性介质增多，影响IBS 患者肠道神经和平滑肌功能而引发临床症状。同时本研究结果也提示 IBS-C 和 IBS-D 患者之间小肠黏膜 MC 的
13、病理变化没有明显差异。【参考文献】1 徐维田，徐志鹏，许桦林，等. 肠易激综合征患者的心理健康状况分析.第四军医大学学报,2006 ，27（19）:1812-1814.2 Dunlop SP,Jenkins D,Neal KR,et al.Relative importance of enterochromaffin cell hyperplasia,anxiety,and depression in postinfectious IBS.Gastroenterology,2003,125（6）:1651-1659.3 陈文科，邹益友，李富军,等. 肠易激综合征精神心理因素、肠黏膜肥大细胞及
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