结直肠癌中survivin, PTEN表达及其与细胞增殖、凋亡的关联性

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1、1结直肠癌中 survivin, PTEN 表达及其与细胞增殖、凋亡的关联性作者:赵勇,高建飞,章必成,杜光祖 【关键词】 survivin;,PTEN;,结直肠肿瘤;细胞凋亡;增殖【Abstract】 AIM: To investigate the expressions of survivin and PTEN, and their relationship with cell proliferation and apoptosis in colorectal cancer, and to identify the role of survivin and PTN in colorecta

2、l tumorigenesis. METHODS: Flow cytometry was used to detecte the expressions of survivin and PTEN in 20 normal colonic mucosa, 20 adenomas and 54 colorectal cancers. Apoptotic peak was examined in colorectal cancer. Ki67 was determined with immunohistochemical SP staining. RESULTS: The expression of

3、 survivin in cancer(56.75.2) was higher than that in adenoma (18.43.4, P0.05). In contrast, normal colonic mucosa did not express survivin. The expression of PTEN showed a decrement from normal colonic mucosa(87.63.1), adenoma(66.43.2) to colorectal cancer (36.33.4, P0.05 respectively). Survivin pos

4、itive cancers had significantly lower values in apoptosis index than negative tumor did, while PTEN positive cancers had significantly higher values in apoptosis index than negative tumor did (P0.05 respectively). Ki67 labeling index(LI) in survivin positive cancer was higher than that in negative t

5、umor, while Ki67 LI in PTEN positive cancer was lower than that in negative tumor (P0.05 respectively). A significant inverse correlation was observed between the expressions of survivin and PTEN(rs=-0.846, P0.05). CONCLUSION: Survivin and PTEN may play important roles in human colorectal tumorigene

6、sis through the inhibition of apoptosis and acceleration of proliferation activity.【Keywords】 survivin; PTEN; colorectal neoplasms; apoptosis; proliferation3【摘要】 目的: 探讨 survivin, PTEN 与结直肠癌细胞增殖和凋亡的关系及其在结直肠癌发生、发展中的作用. 方法: 应用流式细胞术测定正常肠黏膜、腺瘤、结直肠癌中 survivin, PTEN 表达及结直肠癌细胞凋亡; 用免疫组织化学法测定结直肠癌细胞 Ki67 表达. 结

7、果: Survivin 在正常肠黏膜中无表达,在腺瘤中表达率为18.43.4,结直肠癌中表达率为 56.75.2,两者相比差异有显著性(P0.05). PTEN 阳性率由正常肠黏膜(87.63.1 ) 、结直肠腺瘤(66.43.2 ) 、结直肠癌组织( 36.33.4)呈逐渐降低趋势(P0.05). 结直肠癌中 survivin, PTEN 的表达均与肿瘤分化程度相关(P0.05). 结直肠癌的凋亡指数,Survivin 高表达者明显低于低表达者(P0.05);PTEN 高表达者明显高于低表达者 (P0.05). Ki67 标记的增殖指数,Survivin 高表达者明显高于低表达者(P 0.0

8、5);PTEN 高表达者明显低于低表达者(P0.05). 结直肠癌组织中 survivin 与 PTEN 的表达呈负相关(rs=-0.846, P30%为高表达.1.2.2 结直肠癌细胞凋亡和 Ki67 表达的检测细胞悬液 0.5 mL 加入试管,1500 r/min 离心 35 min,生理盐水冲洗 3 次,500800 r/min 离心 3 min,去除细胞碎片. 聚甲醛固定,1500 r/min 离心 10 min,弃上清,悬起细胞,加入 1 mL/L TritonX100液反应 3 min,离心,弃上清,加入 RNA 酶 12 mL,37 水浴中振荡 30 min,加入 PI 液 DN

9、A 染色至少 30 min,流式细胞仪检测结直肠癌细胞凋亡率. 另组织切片作 Ki67 检测,操作按说明书进行,细胞质染成棕黄色为阳性,用图像分析系统(HIPHS2000 )计算阳性细胞百分比.统计学处理: 数据用 xs 表示,采用 SPSS 10.0 统计分析软件,63 组间样本比较用方差分析,各组间两两比较采用 SNKq 检验,相关性分析采用 Spearman 等级相关分析, P0.05 为有统计学意义.2 结果2.1Survivin 的表达 Survivin 在正常肠黏膜中无表达;结直肠腺瘤、结直肠癌组织中分别为 18.43.4 和 56.75.2,两者比较差异有统计学意义(P0.05)

10、. 结直肠癌组织中 survivin 表达与癌组织分化程度有关,低分化者 survivin 表达率明显高于中、高分化者(58.23.8 vs 56.23.2, 54.93.6, P0.05),而与结直肠癌患者年龄、性别,淋巴结转移和 Dukes 分期无关(P0.05).2.2PTEN 的表达 PTEN 阳性率在正常肠黏膜、结直肠腺瘤、结直肠癌组织中分别为 87.63.1,66.43.2 和 36.33.4,呈逐渐降低趋势(P0.05). 结直肠癌组织中 PTEN 表达与癌组织分化程度有关,低分化者 PTEN 表达率明显低于中、高分化者 (34.73.5 vs 36.73.7, 38.43.4,

11、 P0.05),而与结直肠癌患者年龄、性别,淋巴结转移和 Dukes 分期无关(P 0.05) .2.3Survivin 和 PTEN 表达与细胞增殖、凋亡的关系结直肠癌组织中随着肿瘤分化程度的降低,Survivin 阳性率逐渐增加,而7PTEN 的阳性率却逐渐降低,通过等级相关性分析发现结直肠癌组织中 survivin 与 PTEN 的表达呈负相关(rs=-0.846, P0.05). 结直肠癌的凋亡指数,Survivin 高表达者明显低于低表达者;PTEN高表达者明显高于低表达者,而 Ki67 标记的增殖指数, Survivin 高表达者明显高于低表达者;PTEN 高表达者明显低于低表达者(表1). 表 1 结直肠癌中 survivin, PTEN 表达与凋亡、增殖的关系3 讨论在由正常肠黏膜腺瘤腺癌的发展过程中,细胞增殖、凋亡紊乱是其重要机制. 从我们检测的 survivin, PTEN 在正常肠黏膜、腺瘤组织、

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