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1、临床检验基础临床检验基础 l临床检验教研室 l l l l l l 一 医学检验发展史一 医学检验发展史 基础 基础 医学检验奠基人 1673年列文霍克 A Leeuwenhoek 发明显 微镜 他用自制显微镜发现了红细胞 细菌及原 虫等 概述概述 l一 医学检验发展史 l临床医学检验 实验诊断学 l 临床检验基础 l 临床生化检验 l 临床免疫检验 l 临床微生物检验 l 临床血液检验 l 临床输血检验 l 临床分子诊断学检验 临 床 医 学 检 验 概述概述 l二 医学检验现状和特点 医学检验是一门具有多学科理论交叉 应用性强 发展迅速的应用技术学科 是医学各科中发展最快的专业之一 概述概
2、述 l 一 现状 l1 临床检验已进入仪器化时代 电子技术和计算机在医学检验中得到 了广泛应用 基础医学的重大进展 促进 了实验诊断迅猛发展 标本用量少 减少标本的转运环节 更快速 更灵活 易操作 信息量大 易 质控 报告及时 但是许多手工操作仍然是基础 是金指 标 可校准仪器 是质量控制重要方法 l二 临床检验现状和特点 概述概述 l 2 工作任务的转变 一 现状 1 临床检验已进入仪器化时代 由简单的为临床提供检验结果 发展 检验技术 参与临床咨询 临床诊断 治疗 及预防工作 3 运用循证医学理论 为临床提供合 理的检验项目 4 检验医师与临床医师共同制定诊断 和疗效判断标准 概述概述 l
3、1 检验操作的自动化 l2 检验方法的标准化 l3 检验技术的现代化 流式细胞术 生 物芯片 分子杂交 PCR l4 检验试剂的商品化 l5 计量单位的国际化 l6 质量管理的全程化 检测前 中 后 l 二 医学检验的特点 概述概述 l7 生物安全的严格化 标本有潜在危险 l 严格遵循 实验室生物安全通用要求 临床实验室废物处理原则 l8 检验人员的合格化 l 二 医学检验的特点 l 能做 能质控 能维护 能分析 期待检验医师能遵照和参与国家 国际 标准化检验的实践活动 精通先进检验操作 方法 并能与临床医生进行交流 概述概述 l三 医学检验的基本任务 l 运用物理学 化学 生物学 免疫 学
4、自动化检验等技术 对人体的血液 体液 排泄物 分泌物和脱落细胞等标本 进行实验室检查 以获得病原学 病理学 和脏器功能状况等资料 为疾病诊断 治 疗 病情观察 预后判断提供依据 并结 合病史 体格检查和其他各种辅助诊断资 料 进行综合分析 以达到诊断明确 治 疗及时和制定预防措施的目的 概述概述 l l 临床检验基础 是临床上最常用 最 基本的检测方法 即运用现代分析技术 显微镜 物理学 化学 生物学 免疫学 遗传学等技术 对人体血液 体液 分 泌物 排泄物及脱落细胞等进行检验 以获得疾病病因 病理变化 器官功能状 态等资料 协助诊断疾病的学科 l 是集微观形态学和宏观理化检验于一 体综合性学
5、科 概述概述 l四 临床检验基础的临床应用 l1 为疾病诊断和鉴别诊断提供客观依 据 l2 为疾病疗效观察和预后判断提供动 态变化依据 l3 为预防疾病提供检测依据 l4 为健康咨询提供依据 l5 为科学研究提供基本数据 基本检 验方法和操作技能 概述概述 五 学习的基本要求 学习目的 1 掌握本学科基本技能 用准确 经济 简便 快速的检测方法 获取检 测结果 达到协助诊断疾病和预防疾病的 目的 2 为探索准确 经济 简便 快 速的检测方法 培养创新能力打下坚实的 基础 概述概述 五 学习的基本要求 1 掌握临检的基本理论 2 掌握各种操作技能 3 掌握方法学评价 4 熟悉各项实验的参考区间
6、6 加强职业道德培养 必须养成严谨 细心 有条不紊 一丝不苟 认真负责 实事求是的工作 作风 树立优良的职业道德 5 熟悉实验项目的临床意义 概述概述 五 学习的要求 7 勤学苦练基本技能和具有过硬的形 态学本领 才能胜任工作 成为一个优秀的检 验工作者 8 上课要同时带理论教材和实验教材 9 实验课前要求预习实验指导 不无 故缺课 实验考试不及格不准参加理论考试 本课程总课时学128时 其中理论64学时 实验64学时 第一章第一章 血液标本采集血液标本采集 和血涂片制备和血涂片制备 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 l一 血标本类型 l 一 全血 l 血细胞 血浆 l 静脉全血 动
7、脉全血 毛细血管全血 l 二 血 浆 l 全血 血细胞 l 三 血 清 l 全血 血细胞 纤维蛋白原及其他 凝血因子 l 四 分离或浓缩的血细胞 二 血标本采集的方法 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 皮肤采血 静脉采血法 动脉采血 采 集 部 位 普通静脉采血 真空采血法 凡用血量较少 0 1ml的检验项目 均 可用此法采血 如 手工操作做 RBC WBC Hb PLT 等 婴幼儿血液分析仪做血常规 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 二 血标本采集的方法 一 皮肤采血 毛细血管采血 二 血标本采集的方法 一 皮肤采血 毛细血管采血 1 采血部位 1 手指 WHO推荐以左手
8、中指或无 名指尖内侧为侧为 宜 婴婴幼儿 半岁岁以上用手指 半岁岁以 下用拇指或足底部内 外侧缘侧缘 烧伤烧伤 病人 视视具体情况选择选择 皮肤 完整部位采血或静脉血 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 一 皮肤采血 1 采血部位 1 手指 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 2 耳垂 痛感较轻较轻 操作方便 适于 反复采血 缺陷 血循环较环较 差 受气温影响较较大 血细细胞汁数和血红红蛋白浓浓度等结结果 静 脉血 且冬季波动动幅度较较大 已是淘汰 一 皮肤采血 2 采血器材 1 采血针皮肤采血法 1 微量吸管 10ul 20ul刻度 2 采血针针 用三棱针针或专专用 采血针针
9、 用前须须高压压或煮沸消毒 为避免交叉感 染应严格实行一人一支吸管和一根针 目前最好的是激光无痛采血仪 3 消毒用具 3 采血方法 略 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 一 皮肤采血 4 注意事项项 1 采血部位应无水肿 冻疮 炎症 紫绀 溃疡 2 注意消毒及用具一次性使用 3 以血液自行流出为佳 可轻挤压 切忌用力挤压 以免组织液混入 4 采血顺序为 PLT RBC Hb WBC DC等 5 若做出血时间测定 需另刺一针 不能拭去第一 滴血 凝血时间另外测定 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 l激光皮肤采血法 l 1 器材 激光
10、采血器 一次性激 光防护罩 微量吸管 消毒用品 l 2 方法 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 l激光皮肤采血法 l 3 注意事项 l 禁止在有易燃易爆气体环境中操作 以免引起爆炸事故 l 禁止用肉眼观看激光窗口或将激光窗 口对准身体其他部位 l 防护罩要紧贴采血部位 以免影响标 本采集效果 l 激光采血器的透镜部分应经常清洁 二 静脉采血法 1 普通静脉采血 凡需血量较较多 0 2ml 的检验项检验项 目 用此采血法 如 多项项血细细胞分析 压积压积 血沉等 采血部位 肘前静脉为为主 亦可用手 背部 手腕部和外踝部静脉 幼儿用颈颈外 静脉采血 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的
11、采集 二 静脉采血法 1 普通静脉采血 注意事项 严格无菌操作 止血带压迫时间不超 过1min 抽血时避免气泡 以检查项目要求选择是否空腹采血 出血性疾病要用硅化或塑料注射器和 试管 应拔下注射针头后 将血沿试管壁注 入试管 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 2 真空采血法 又称负压采血法 真空采血装置有套筒 式 头皮静脉式 封闭式采血无需容器之间转移 减少了 溶血现象 同时样本转运方便 避免医患间 的交叉感染 根据需要不同 不同检验项目 在真空 管上标有不同颜色 第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 盖子颜颜色 添加抗凝剂剂 注意事项项 用 途 红红色 无 凝块块形成约约需3
12、0min 化学 血清学 血库库 紫色 EDTA 须颠须颠 倒混匀6 8次 全血细细胞计计数 CBC 淡蓝蓝色 枸橼橼酸钠钠 须颠须颠 倒混匀 血液与抗 凝血检查检查 PT APTT 凝剂剂比例为为9 1 因子测测定 绿绿色 肝素钠钠 肝素锂锂 根据实验实验 需要 选择选择 不同 化学 肝素铵铵 类类型的肝素 灰色 氟化钠钠 草酸钾钾 不能用于其他化学检查检查 葡萄糖 糖耐量 乙醇 浓浓度 黄色 多茴香脑脑磺酸钠钠 须颠须颠 倒混匀8次 血培养 SPS 深蓝蓝色 无抗凝剂剂或肝素 化学清洁洁的试试管 毒理学 微量金属 钠钠 EDTA 金黄色 分离胶 凝块块激 须颠须颠 倒混匀5次 使血液 化学
13、不适于血库库 活剂剂 与激活剂剂充分接触 凝块块完 全形成后离心 淡绿绿色 分离胶 肝素锂锂 钾测钾测 定 桔黄色 凝血酶 须颠须颠 倒混匀8次 化学 黑色 枸橼橼酸钠钠 血液与抗凝剂剂比例为为4 1 血沉 棕色 肝素钠钠 铅浓铅浓 度80 草酸酸盐盐可被分解为为碳酸盐盐而失效 三 血液标本的抗凝 三 双草酸盐盐 草酸钾钾 草酸铵铵 用途 草酸钾盐钾盐 或钠盐钠盐 可使红细红细 胞 体积皱缩积皱缩 约约11 草酸铵铵可使红细红细 胞胀胀大 二者适当混合不影响红细红细 胞形 态态和体积积如 红细红细 胞比积积 血细细胞计计数 网织红计织红计 数等 抗凝以后 小时结时结 果 可靠 缺点 草酸盐盐可
14、引起血小板聚集 并 可影响白细细胞形态态故不适用于血小板计计 数和白细细胞分类计类计 数 三 血液标本的抗凝 四 肝素 肝素广泛存在于肺 肝 脾等几乎所 有组织组织 的血管肥大细细胞和嗜碱性粒细细胞 的颗颗粒中 三 血液标本的抗凝 四 肝素 机理 1 与抗凝血酶 AT 一起 在低浓浓 度能抑制因子IXa 和PF3之间间的作用 阻止凝血酶形成 2 加强抗凝血酶 AT 灭灭活丝丝氨 酸蛋白酶 从而阻止凝血酶形成 3 抑制凝血酶的自我催化抑制因子 的作用 4 高浓浓度时时可阴断凝血酶与纤维纤维 蛋白 的反应应 三 血液标本的抗凝 四 肝素 配制 肝素粉 每mg含100 125单单位 配成1g L水溶
15、液取0 5ml置小瓶中 放37 50 烘干 可抗凝血5ml 三 血液标本的抗凝 三 血液标本的抗凝 四 肝素 用途 肝素具有抗凝能力强 不影响 血细细胞引起溶血等优优点 为为一种较较好的抗 凝剂剂 红细红细 胞计计数 血红红蛋白测测定 红细红细 胞比积积及多种生化分析 也是抗血栓药药物 之一 缺点 过过量肝素会引起白细细胞凝集和 血小板减少 故不能用于白细细胞计计数 血 小板计计数 肝素抗凝血瑞氏染色后背景呈 是深兰兰色 影响镜检镜检 故也不适于作DC 三 血液标本的抗凝 五 乙二胺四乙酸 EDTA 盐盐 机理 与血中钙钙离子结结合成螯合物 阻止血液凝固 配制 ICSH建议议其使用浓浓度为为每
16、毫 升血1 5 2 2mg 实验实验 室常将其配成 15g L 取0 5ml100 烘干 可抗凝血 5ml 三 血液标本的抗凝 用途 适用于多项项血液学检查检查 血细细胞计计数 特别别是血小板计计数 红细红细 胞比积测积测 定 室温下48h内红细红细 胞比积积不改变变 五 乙二胺四乙酸 EDTA 盐盐 三 血液标本的抗凝 五 乙二胺四乙酸 EDTA 盐盐 缺点 1 影响血小板聚集和白细细胞吞噬功能 不适于出血凝血检查检查 及血小板功能检检 验验 2 能影响某些酶的活性和抑制红红斑狼 疮疮因子 故不适于制作组组化染色和检查检查 红红斑狼疮细疮细 胞的血涂片 三 血液标本的抗凝 六 脱纤维纤维 蛋白法 物理抗凝 方法 将血液注入有玻璃珠的盛器中 不停转动转动 使纤维纤维 蛋白缠绕缠绕 凝固于玻璃 珠上 从而阻止血凝固 或用棉签挠签挠 用途 适用于免疫学检查检查 和红红斑狼 疮细疮细 胞检查检查 l四 血标本的运送 保存与处理 l 血标本处理的基本原则 l 把每一分标本当作无法重新获得的 唯一标本 加以小心运送 保护 保存 检测和报告 l 要视每一分标本都有传染性 对高 危标本要注明标识 l
