硫酸化茯苓多糖的合成、表征以及活性研究

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1、硫酸化茯苓多糖的合成 硫酸化茯苓多糖的合成 表征和活性研究表征和活性研究 n答辩人 赵炯 n指导教师 王永江 2011年6月 毕业论文答辩毕业论文答辩 2010 06 红外表征 3 背景1 硫酸化茯苓多糖的合成 2 分子量的测定 4 生物活性研究 5 总结和展望6 毕业论文答辩毕业论文答辩 目录 1 背景 2011 06 毕业论文答辩毕业论文答辩 茯苓 硫酸化茯苓多糖的合成 2 硫酸化茯苓多糖的合成 3g3g茯苓多糖和茯苓多糖和250ml250ml二二 甲亚砜混合搅拌过夜甲亚砜混合搅拌过夜 加加45ml45ml吡吡啶啶啶啶室室 温温搅拌搅拌2 2小时小时 冰浴加入冰浴加入18 5ml18 5m

2、l 氯磺酸磺化氯磺酸磺化 自来水透析自来水透析5 5天 蒸天 蒸 馏水透析馏水透析4 4天天 碱透析碱透析 过夜过夜 调调PHPH为为 7 7 8585度反度反 应应4 4小时小时 旋转蒸发 在冷冻旋转蒸发 在冷冻 干燥干燥 3 硫酸化茯苓多糖的红外表征 两图谱相比 在810 62cm 1和1228 97cm 1处出现两个新峰 它们分别归属为C S O和S O基团的吸收峰 由此表 明成功合成出硫酸化茯苓多糖 4 硫酸化茯苓多糖的分子量的测定 2011 06 毕业论文答辩毕业论文答辩 u Polydispersity uMw Mn1 326 u Molar mass moments uMn1 0

3、30 104 uMw1 366 104 4 硫酸化茯苓多糖的分子量的测定 2011 06 毕业论文答辩毕业论文答辩 5 硫酸化茯苓多糖的生物活性研究 清除羟羟基自由基的原理 利用Feton反应产生羟基自由基 采 用水杨酸显色法测定茯苓多糖硫酸酯对羟 基自由基的清除效果 E A对照 A样品 A对照 羟羟基自由基清除率的测测定 表4 硫酸化茯苓多糖对羟对羟 基自由基的清除作用结结果 浓浓度 mg mL A 本底吸收 A对对照 清除率 1 0 661 0 051 0 751 0 187 2 0 530 0 075 0 751 0 394 4 0 435 0 090 0 751 0 541 6 0 3

4、57 0 097 0 751 0 654 8 0 315 0 101 0 751 0 715 羟羟基自由基清除率的测测定 羟羟基自由基清除率的测测定 羟羟基自由基清除率和浓浓度的关系 Y 0 0012X4 0 0237X3 0 1682X2 0 5630X 0 2296 R 0 9999 其中 Y代表清除率 X代表硫酸酯酯多糖的浓浓度 多糖的硫酸化衍生物对羟对羟 基自由基有清除能力 清除效果 与多糖浓浓度成正比 数据显显示 茯苓多糖硫酸酯酯具有较较好的清 除羟羟基自由基的活性 50 清除量为为3 9mg mL 当浓浓度达 到8 mg mL时时 曲线趋线趋 于平缓缓 超氧自由基清除的原理 采用邻

5、邻苯三酚自氧化法 在碱性条件下 邻邻苯三酚能 够够自氧化产产生 O2 加入一定量的硫酸化的茯苓多糖溶液 可对对 O2 产产生不同的清除作用 进进而导导致光吸收值值的变变化 超氧自由基计计算公式为为 E A对对照 A样样品 A对对照 100 超氧自由基清除率的测定 表5 硫酸化茯苓多糖对对超氧自由基的清除作用结结果 浓浓度 mg ml A 本底吸收 A对对照 清除率 1 0 498 0 017 0 535 0 101 2 0 461 0 035 0 535 0 203 4 0 430 0 072 0 535 0 331 6 0 389 0 085 0 535 0 431 8 0 353 0 09

6、7 0 535 0 521 10 0 341 0 107 0 535 0 562 12 0 340 0 112 0 535 0 573 14 0 338 0 114 0 535 0 582 超氧自由基清除率 超氧自由基清除率的测定 超氧自由基和浓浓度的关系 Y 1 6 10 7 X4 7 7 10 5 X3 0 0054X2 0 1014X 0 0108 R 0 9995 其中 Y代表清除率 X代表硫酸酯酯多糖的浓浓度 数据显显示 茯苓多糖硫酸酯酯具有清除超氧自由 基的能力 50 清除量为为7 8mg ml 当浓浓 度达到10mg ml时时 曲线趋线趋 于平缓缓 6 总结 2010 06 毕业

7、论文答辩毕业论文答辩 1 用氯磺酸进行硫酸化 产物在890 26cm 1的 D 葡聚糖特征 吸收峰减弱 而在810 62cm 1和1228 97cm 1处出现两个新峰 它们分别 归属为C S O和S O基团的吸收峰 由此表明成功合成出硫酸化的茯苓多糖 2 硫酸化的茯苓多糖的质均分子量为13660道尔顿 与未硫酸化 的茯苓多糖相比明显下降 3 硫酸化的茯苓多糖对羟基自由基有明显的清除率 且浓度越大 羟基自由及的清除率越高 50 清除率为3 9mg ml 4 硫酸化的茯苓多糖对超氧自由基也有一定的清除率 也随着浓 度的增加有明显的增加 50 清除率为7 8mg ml 7 展望 毒理学以及其安全性问题必须通过严格的动物 试验及一定的临床试验 确定产品的细胞毒性及 其安全性 方可广泛地应用于生产 生活中 取代度必须探明 多少的取代度才是适合的 可以做到既不影响人的身体健康 又能适应不同 的生理活性要求 为此必须继续研究 总结出一 套比较系统的制备方法 这样就可以根据实际的 需要采取相应的制备工艺 谢 谢 2011 06 毕业论文答辩毕业论文答辩

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