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1、 临床微生物学概论 第一部分 复旦大学附属华山医院抗生素研究所 坷 奇 范 晚 既 樊 斑 埔 底 踩 镁 殉 忍 咋 称 祥 狄 都 箩 笆 乐 蛛 忌 希 摄 尸 锈 哀 妹 典 会 亡 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 2 n标本采集 n细菌的分离培养和鉴定 n抗菌药物敏感性试验 主要内容 壬 淄 煤 蔡 栖 傍 睛 硬 索 滥 袜 账 莫 蝎 平 跺 靴 鄂 良 怕 食 瞥 栓 躺 鸣 泵 毫 耳 糜 酌 蛮 怨 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 2 2 3 正常菌群 n在正常人体体表与外界相通的腔道 口腔 鼻咽腔 肠道 泌尿
2、生殖道存在的多种微生物 n在机体免疫功能正常时对人体有益无害 属人类正常微生 物群或环境中通常不致病的微生物 因以细菌和真菌为主 故称 正常菌群 n正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素 n反映出在正常情况下 宿主 正常菌群和外界环境相互适 应 保持平衡状态 潞 尘 育 团 咖 驮 寸 紊 磕 哨 弘 孪 叶 吏 籍 鱼 患 腿 啄 畔 忿 撞 熔 彦 显 皑 技 班 胸 赁 岂 掣 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 3 3 4 叮 喉 绷 笼 循 蕾 谢 痈 酷 寸 淀 傀 互 惹 拄 绽 棋 必 荆 躺 储 翰 忧 乙 坛 后 屠 戳 晒 狞 停 冰 临 床
3、微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 4 4 5 病原微生物 n病原微生物 pathogen 引起人类感染性疾病的微生 物称为病原微生物或致病微生物 l细菌 如痢疾志贺菌 肠杆菌科细菌 金黄色葡萄球菌 肠球 菌属等 l病毒 如单纯疱疹病毒 巨细胞病毒 乙型肝炎病毒等 l真菌 如念珠菌属 曲霉属 毛霉属以及新型隐球菌等 l其他 如支原体 衣原体 螺旋体 辅 暴 杭 勇 邹 涩 瞥 大 珐 髓 去 欠 揉 知 腻 拴 准 阻 块 喝 槛 应 她 鲜 缔 陷 胶 集 秒 轮 诫 夜 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 5 5 6 临床常见的病原微生物 n
4、革兰阳性菌 l葡萄球菌 溶血性链球菌 肠球菌 n革兰阴性菌 l需氧球菌 脑膜炎和淋病奈瑟球菌 卡他莫拉菌 l需氧杆菌 不动杆菌 假单胞菌 产碱杆菌 嗜 血杆菌 l需氧和兼性厌氧 肠杆菌科细菌如大肠杆菌 肺杆 伤寒 志贺菌 l厌氧细菌 脆弱拟杆菌 痤疮丙酸杆菌等 籽 蹈 缚 萌 泻 裸 对 泡 有 竹 榨 武 钻 劫 尖 承 曹 帛 岩 诡 睹 效 汹 傍 诡 祟 选 践 先 号 尊 船 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 6 6 7 苛 养 菌 n定义 是一类生长需要特殊营养物质的细菌 与许多感 染性疾病有关 其分离培养较为困难 n营养要求高 l肺炎链球菌 培养基内
5、要加入血或血清 l流感嗜血杆菌 X V因子 n比较娇嫩 对干燥 对寒冷的抵抗力均较弱 n培养条件 5 10 CO2 35 培养 24 48h n呼吸道其他快生长细菌的覆盖使分离率非常低 氟 梢 媚 厦 画 俗 光 阅 衅 轿 肮 师 棘 可 猴 压 衡 羽 治 硫 本 陪 兼 台 捏 瀑 袍 橱 蛔 该 奥 呈 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 7 7 8 厌 氧 菌 n是一群专性厌氧 必须在无氧环境下才能生长繁殖的细菌 n根据能否形成芽胞 可将厌氧菌分成两大类 l厌氧芽胞梭菌属 l无芽胞厌氧菌 n厌氧芽胞梭菌属 破伤风梭菌 产气荚膜杆菌 肉毒梭菌 艰难梭菌 n无
6、芽胞厌氧菌 拟杆菌属 梭杆菌属 丙酸杆菌属 消化链 球菌属等 忌 揭 效 懒 瘴 落 帖 沃 兰 张 憾 誊 塞 婆 酣 亦 斧 矿 辣 荷 露 失 赌 妇 演 帚 零 定 题 择 蘑 瞅 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 8 8 9 标本的采集 n抗菌药使用前 n正确的部位 n正确的时间 n足够的数量 n无菌的容器 n特殊要求应在化验单上注明 汝 馁 企 抖 毕 豫 寝 露 透 欺 弹 剐 湛 躲 喝 账 惦 屡 于 晰 落 所 犀 摩 光 垂 滤 退 毗 矢 趟 众 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 9 9 10 主要的临床标本种
7、类 标本类型 n呼吸道标本 l深部咳出痰 支气管灌洗液 l咽拭子 鼻气管吸出液 气管吸出液 n尿液 n血液 n脑脊液 n伤口 脓液 n其它体液 l胸水 心包液 引流液 腹水 滑囊液 仆 雨 抚 井 觅 肚 媒 填 蝎 抡 监 走 猖 殷 中 孩 艇 烤 镐 野 禁 务 痪 椎 伙 霖 着 惑 贸 檀 竿 俘 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 10 10 11 标本的处理 n涂片光镜检查 l诊断病原最基本和快速的方法 脑脊液 l直接形态学检查 l革兰染色或特殊染色 n分离培养和鉴定 n动物接种 n免疫学检查 经 是 涨 泉 航 嘎 袁 梨 佰 谦 尺 崩 舷 校 综
8、 镇 伍 陌 手 简 箍 洁 幅 置 淆 坟 莹 葬 忱 缮 亲 促 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 11 11 12 痰标本 主要病原菌 肺炎链球菌 克雷伯菌属 流感嗜血杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿 假单胞菌 非病原菌 酵母菌 草绿色链球菌 凝固酶阴性葡萄球菌 病人需用水清洁口腔 深咳肺部痰 不要唾液 1 进行革兰染色以评价标本是否适于接 种 向临床医生尽快报告重要的革兰染色 结果 2 3 好 很少扁平 上皮细胞 奥普托欣纸片 CO2中孵育 48小时 4 接种巧克力平皿 血 平皿和麦康凯平皿 5 拒绝 大量 扁平 上皮细胞 肺炎克雷伯菌 对重要病原菌进行 鉴定
9、60 9 1295 303 敏感株耐药株 迁 蝗 饺 详 好 川 轻 至 走 咋 磋 恨 锐 莲 酞 楔 忱 郁 凿 愁 照 舆 引 抵 屋 羽 藐 邦 休 型 邹 舶 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 37 37 张嵘教授课件内容 皮 追 熄 梁 色 粗 易 雄 婉 涧 更 墙 姬 埠 淤 迅 缅 错 最 厢 港 概 侍 址 殉 铜 健 肿 骡 珍 隘 荆 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 38 38 39 抗菌药物敏感性试验 惑 钞 漫 神 尺 易 纬 神 搭 零 意 晕 斡 净 乍 失 罕 搓 快 勿 企 册 杜 泄 博 浅 锑
10、 蹲 重 盔 陕 闸 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 39 39 40 抗菌药物和药敏试验 n抗菌药物是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化 学合成药物 前者是真菌 放线菌 细菌等的代 谢产物 后者是经化学改造的半合成抗生素和化 学合成药物 n测定抗菌药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀 菌作用的方法称为药物敏感性试验 Antimicrobial Susceptibility Testing AST 简称药敏试验 祖 阶 绸 镁 藏 洱 啥 矫 酞 桂 峦 咀 耙 嘘 鲤 赋 证 嗣 卜 冻 然 淡 牟 真 孩 赣 胆 叛 羚 浦 扁 哟 临 床 微 生 物 学 概
11、论 临 床 微 生 物 学 概 论 40 40 41 抗菌药物敏感性试验的意义 n无法推测敏感或耐药 n病人个体化治疗指南 n提供经验治疗的依据 n建立当地或国家处方政策 n监测流行病学趋势 n监测细菌耐药性 n测试新抗菌药物的抗菌活性 n检测新耐药机制的方法 钧 摆 披 嘉 栅 钩 降 差 千 那 舌 搀 冒 站 寿 恩 盔 握 毒 附 体 泉 蚜 反 随 作 锻 氢 赢 茨 炳 锌 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 41 41 42 抗菌药物敏感性试验分类 n定量方法 MIC mg L l琼脂稀释法 l肉汤稀释法 lE test n定性方法 SIR l纸片扩散
12、法 n自动化仪器 涌 锨 孪 屎 业 条 阐 碑 揍 渗 缺 枉 溅 盛 凤 恒 曰 敢 脐 统 炽 代 吾 腮 袋 拷 爵 题 启 睬 衍 菠 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 42 42 稀释法的定义 n以一定浓度的抗菌药与含有被试菌株的培养基进 行一系列对倍数稀释 经培养后肉眼观察未见细 菌生长管内所含的最低药物浓度为该药对该试验 菌的最低抑菌浓度 minimal inhibitory concentration MIC n稀释法的最大优点是可以精确测得药物最低抑菌 浓度 但需耗费较多材料 人力和时间 铡 蛛 脱 浅 浊 仰 畴 缔 龄 缘 聋 饯 蒲 者
13、汤 臼 骚 伴 田 肛 砍 进 膘 砷 颓 肢 恬 驱 束 沟 气 螺 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 43 43 稀释法的分类 n稀释法药敏试验因介质不同可分为液体稀释法和琼脂稀释法 n因容器不同分为试管稀释法和微量稀释法 或称常量法和微量 l前者使用无菌的13mm 100 mm试管 每一浓度抗菌药的量 至少为1ml l后者使用8 12的U型底小孔的微量稀释板 小孔内装有0 1ml 肉汤 n琼脂稀释法又因在平皿中进行而称为平皿稀释法 n微量稀释法的优点为试剂材料较节省 而且微量板中可预先配制 好抗菌药和培养基 冷藏后一定时期内使用 较为方便 n与试管稀释法相比
14、 琼脂稀释法配合多点接种器使用 可同时进 行大量菌株的药敏试验 实验结果重复性好 缺点是不能进行最 低杀菌浓度 minimal bactericidal concentration MBC 的测定 财 骸 吓 遮 目 逊 汕 族 颖 湛 靖 剃 垄 措 赛 彼 歪 逸 袍 桌 侣 瞧 奥 礁 仗 脚 桩 喉 饰 抨 寒 霸 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 44 44 与稀释法药敏试验有关的指标有哪些 nMIC l最低抑菌浓度 nMBC l最低杀菌浓度 nMIC50 l抑制50 受试菌株的MIC值 nMIC90 l抑制90 受试菌株的MIC值 nMBC50 l杀死
15、50 受试菌株的MBC值 nMBC90 l杀死90 受试菌株的MBC值 药物浓度菌株数累积菌株数MIC50MIC90 0 12511 0 2523 0 514 104 226 2 428 8210 8 慌 您 坡 购 纷 尧 示 潍 黍 耶 绍 伦 昆 芝 吵 晨 兢 篡 雅 俗 功 啡 脊 堵 倘 辞 获 愚 狰 判 坎 服 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 45 45 琼脂稀释法 n琼脂选择法是将药物混匀于琼脂培养基 中 配制含不同浓度药物平板 使用多 点接种器接种细菌 n经孵育后观察细菌生长情况 以抑制细 菌生长的琼脂平板所含药物浓度为最低 抑菌浓度 min
16、imal inhibitory concentration MIC n试验菌的结果报告可用MIC ug ml 或用敏感 S 中介 I 和耐药 R 报告 8 16 囊 售 府 夯 痘 载 隶 函 于 睫 尺 毕 邓 琐 也 伐 页 蚤 纫 抵 额 埂 站 隔 誓 乳 矣 燥 冒 描 亮 例 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 46 46 多点接种仪 瞅 谭 迪 泼 麻 煤 溃 棚 鬼 何 迫 防 户 皇 迸 错 拦 渊 驱 伟 懈 绩 避 捞 绒 跑 躇 类 伺 咋 脯 姬 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 47 47 试管稀释法 枢 野 赐 垢 博 士 传 贿 暑 哑 椅 烫 曳 看 贬 这 辗 撩 胃 疆 篮 啤 哗 浦 春 榔 圾 副 制 俭 常 改 临 床 微 生 物 学 概 论 临 床 微 生 物 学 概 论 48 48 试管稀释法 0 060 125 0 250 51 24 8 1632 MIC 1ug ml 尔 框 索 悠 冕 渍 凿 疯 曙 磋 辉 馈 惫 滥 仗 才 渤 丫 蒜 颖 傀 再 折 悍 冈 阜 账 迟
