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1、植物的组织培养（2012山东）35、（8分）【生物现代生物科技专题】毛角蛋白II型中间丝（KIFII）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。（1）过程中最常用的运载工具是_，所需要的酶是限制酶和_。（2）在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是_。（3）在过程中，用_处理以获得更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_处理。（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_。在胚胎移植前，通过_技术可获得较多胚胎。【答案】（1）质粒； DNA连接酶 （2
2、）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）； 维持培养基（液）的PH稳定 （3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）； 去核 （4）（早期）胚胎培养 胚胎分割【解析】熟练掌握基因工程和胚胎工程的基本知识就能解答本题.（1）运载工具（体）包括质粒、噬菌体衍生物及动植物病毒,其中质粒是主要运载体;所需工具酶是限制酶和DNA连接酶。（2）分散皮肤组织块成单个细胞使用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）。在动物细胞培养过程中， CO2的作用是维持培养液pH的相对稳定。（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素进行超数排卵处理；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要了来自供体核。（4）把重组细胞培
3、养到早期胚胎叫早期胚胎培养技术；在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎。【试题评价】本题考查了基因工程的操作工具、动物细胞培养的过程和条件、超数排卵的方法、核移植技术、胚胎工程中早期胚胎培养和胚胎移植等知识，基础性强，难度不大。（2012广东）2培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是A组织培养 B细胞杂交 C显微注射 D核移植【答案】【解析】草莓植株分生区细胞不含病毒或含病毒的量少，可以利用茎尖（或根尖）经植物组织培养技术培养出脱毒幼苗。【试题点评】本题考查作物脱毒的过程及相关技术，要求学生明确植物组织培养、植物体细胞杂交、显微注射技术和核移植等技术的应用，基础性强，容易得分。（2012江苏）
4、22. 下列事实能体现细胞全能性的是（ ）A. 棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B. 单细胞的 DNA 在体外大量扩增C. 动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D. 小鼠体细胞经诱导培育成小鼠【答案】AD【解析】在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。要能产生完整的个体，才能体现全能性。【试题点评】本题考查细胞全能性这一知识点，要求学生能根据细胞全能性的原理，对一些现象进行分析。属于理解层次。（2011江苏）14关于现代生物技术应用的叙述，错误的是A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可
5、用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育【答案】B（2011上海）15关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度，下列表述正确的是A乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞B乳腺细胞易于乳腺癌细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞C乳腺细胞易于乳腺癌细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞D乳腺癌细胞易于乳腺细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞【答案】A（2011天津）1下列有关酶的叙述正确的是A酶的基本组成单位是氨基酸和脱氧核糖核苷酸 B酶通过为反应物供能和降低活化能来提高化学反应速率C在动物细胞培养中，胰蛋白酶可将组织分散成单个细胞DDNA连接酶可连接DNA双链的氢键，使双链延伸【答案】C（2010福建）32.生
6、物-现代生物科技专题（10分）红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO），其简要生产流程如右图。请回答：（1）图中所指的是 技术。（2）图中所指的物质是 ，所指的物质是 。（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。（4）检测rhEPO的体外活性需要抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。【答案】：（1）PCR
7、(2)mRNA rhEPO (3)培养液 （4）杂交瘤（2010浙江）4.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是(D)A. 培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B. 克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变C. 二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D. 恶性细胞系的细胞可进行传代培养【解析】本题主要考查细胞工程的有关知识，动物细胞培养可以分为原代培养，原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的为有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就
8、是发生了癌变的细胞,遗传物质发生改变,具有不死性,但是仍保留接触抑制现象,所以还是要传代培养,这个也就是人体中癌细胞会转移的原因,所以答案为D.（2009浙江）1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是A都需用培养箱 B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性【答案】C【解析】动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行，动物成体的体细胞离体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性，植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。故C正确。（2009江苏）32(8分)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图
9、县一个新牛小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。(2)气室中充入5C0：气体的主要作用是 。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的 ，以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。 材料用具： 肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。实验过程： 在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。利用
10、甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。 甲 乙 丙 丁步骤一：加人肝脏培养液 步骤二：加入有机物X溶液 ，彤骤=!放詈肝脏小块 上表中还需进行的操作是 。 +培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明 。【答案】(1)1吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 (2)维持培养液适鲎的pH (3)种类和剂量 (4)向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块染色体形态和数量肝脏小块对有机物X具有解毒作用（2008全国）5
11、下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）A电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B 淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同【答案】D【解析】通过植物细胞工程中的植物体细胞杂交技术得到的甲乙两植物的体细胞杂种染色体数目是甲乙体细胞染色体之和；而通过有性杂交得到的甲乙两品种杂交后代的染色体数目是甲乙两品种体细胞染色体之和的一半（或两品种的配子所含染色体之和）。（2008四川）关于人体中神经递质的叙述，错误的是、在突触小泡中能检测到神经递质、神经递质
12、能作用于突触后膜、神经递质在发挥效应后会迅速失去作用、突触前神经元只有在兴奋后才能合成神经递质【答案】D（2008宁夏）38生物选修3现代生物科技专题（15分）回答下列有关动物细胞培养的问题：在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到
13、死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。【答案】相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶衰老甚至死亡 不死性降低 减少由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）中冷冻（或超低温、液氮） 酶 新陈代谢抗原(2008上海)11制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植A B C D【答案】A（2008北京）29（18分）白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：(1)白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在 _隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过_ 的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础是植物细胞具有_
