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1、尿液理化检验 化 学 检 验 1 目目 录录 四四尿尿液液酮体检酮体检验验 三三尿糖检验尿糖检验 二二尿液蛋白质尿液蛋白质检检验验 一一尿液酸碱度测定尿液酸碱度测定 七七尿液亚硝酸盐检验尿液亚硝酸盐检验 六六尿尿液液血红蛋白检验血红蛋白检验 五五尿尿液液胆色素检胆色素检验验 2 一 尿液酸碱度检查一 尿液酸碱度检查 反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平 衡能力的重要指标之一 通常简称为尿 液酸度 尿液pH值决定因素 主要由肾脏肾小管泌H 泌NH3 铵 盐的形成 HCO3 的重吸收有关 3 检测方法 1 指示剂 indicator 法 2 pH试带法 3 滴定法 4 电极法 4 质量控制质量控制 1
2、 标本必须新鲜 2 试带法 试带应能满足的生理和病理尿 pH变化范围 未被酸 碱污染 未吸潮变 质 参考值参考值 在正常饮食条件下 晨尿多偏弱酸性 多数尿标本pH5 5 6 5 平均pH6 0 随机尿pH4 5 8 0 5 临床意义临床意义 1 生理性变化 1 食物影响 高蛋白食物 尿pH 蔬菜 水果等 尿pH pH 6 2 进餐后碱潮 尿pH 3 生理活动及药物等的影响 4 尿液放置过久尿pH 6 2 病理性变化 pHpH降低 降低 见于酸中毒 苯丙酮酸尿症 黑尿酸症 糖尿病酮症酸中毒 低钾血症 肾小管排K 泌 H 痛风 甲醇中毒或服用酸性药如氯化铵 VC pHpH升高 升高 见于碱中毒 醛
3、固酮增多症 高钾血症 肾小管排K 泌H 泌尿系感染细菌分解尿素 产NH3 应用碱性药物或碳酸酐酶抑制剂 远端肾小管性酸中毒远端肾小管性酸中毒时肾小管形成H 排出H 及 H Na 交换能力下降 体内明显酸中毒 尿pH偏碱性 通过酸 碱负荷试验 精确测定尿pH 有助于肾小 管性酸中毒的诊断及分型 调整用药调整用药 泌尿系感染治疗时宜保持酸性尿 尿酸盐 结石治疗时宜保持碱性尿 7 8 二 尿液蛋白质检查二 尿液蛋白质检查 健康人肾小球滤过液中的少量低分子量蛋白 质 绝大部分经肾小管重吸收 尿中的蛋白 质含量甚微 尿蛋白定性试验阴性 当尿液中蛋白质 100mg L或150mg 24h 时为蛋白尿 大多
4、数是分子量4 0 7 0万的 清蛋白 其余是来自肾及尿路的组织蛋白 T HT H蛋白 蛋白 健康人尿中蛋白质以清蛋白为主 还有少量健康人尿中蛋白质以清蛋白为主 还有少量 分泌型分泌型IgAIgA 1 1 微球蛋白 微球蛋白 2 2 微球蛋白等微球蛋白等 9 程度表现定量 mg 24h 定性 无混浊20 80 轻度微混浊 混浊 10000 3 4 10 一 尿蛋白组成 一 尿蛋白组成 小相对分子质量蛋白 9万 含量极微 包 括由肾髓袢升支及远曲小管上皮细胞分泌的T H糖蛋白及分泌型IgA等 非选择性 蛋白尿 中相对分子质量蛋白 4 9万 清蛋白 占 尿蛋白总量50 左右 11 二二 蛋白尿生成原
5、因及机制蛋白尿生成原因及机制 1 1 肾小球性蛋白尿 肾小球性蛋白尿 以清蛋白为主 约占70 2 微球蛋白轻度升高 1 选择性蛋白尿 损伤较轻 主要是滤过膜屏 障 尤其是电荷屏障受损 主要成分是清蛋 白 大分子蛋白极少 尿免疫球蛋白 清蛋白 的比值0 5 提示预后较差 12 2 2 肾小管性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 概念 炎症或中毒引起肾小管对低分子量蛋 白质的重吸收功能减低 而导致正常肾小球 滤过的低分子量蛋白质大量出现在尿液中 尿中蛋白以 2 微球蛋白 溶菌酶增多为主 清蛋白正常或轻度增多 13 3 3 混合性蛋白尿混合性蛋白尿 肾脏病变累及肾小球和肾 小管 由此产生的蛋白尿称为混合性蛋白尿
6、 4 4 溢出性蛋白尿溢出性蛋白尿 血浆中一些低 中分子量 蛋白质 免疫球蛋白轻链 血红蛋白 肌红蛋 白 明显增加 可见于大面积心肌梗死等 5 5 组织性蛋白尿组织性蛋白尿 由于炎症或药物等刺激 泌尿系统分泌的蛋白质 如粘蛋白 T H糖蛋 白 分泌型IgA等 组织细胞渗漏的酶及炎 症局部血液渗漏和脱落细胞中的蛋白质等排出 增多 14 6 6 生理性蛋白尿 生理性蛋白尿 1 1 功能性蛋白尿 功能性蛋白尿 生理状态时 肾血 管痉挛或充血等暂时性功能性改变 使肾小球毛细血管壁的通透性增高 导致暂时性 轻度的蛋白尿 定性一般不超过 多见于青少年 2 2 体位性蛋白尿体位性蛋白尿 7 7 偶然性蛋白尿
7、 偶然性蛋白尿 15 16 尿液蛋白质的定性检验尿液蛋白质的定性检验 1 1 加热乙酸法 加热乙酸法 加热可使蛋白质变性凝固 加加热可使蛋白质变性凝固 加 酸使蛋白质接近等电点 促使蛋白沉淀 酸使蛋白质接近等电点 促使蛋白沉淀 2 2 磺基水杨酸法 磺基水杨酸法 在略低于蛋白质等电点的在略低于蛋白质等电点的 pHpH条件下 蛋白质带有正电荷的氨基与带负条件下 蛋白质带有正电荷的氨基与带负 电荷的磺基水杨酸根相结合 形成不溶性蛋电荷的磺基水杨酸根相结合 形成不溶性蛋 白沉淀 白沉淀 3 3 干化学试带法 干化学试带法 蛋白质与溴甲酚蓝 四溴酚蛋白质与溴甲酚蓝 四溴酚 蓝二酯结合 蛋白质离子吸引带
8、相反电荷指蓝二酯结合 蛋白质离子吸引带相反电荷指 示剂 形成复合物发生颜色改变 示剂 形成复合物发生颜色改变 只与清蛋只与清蛋 白反应 不与球蛋白反应 白反应 不与球蛋白反应 17 方法学评价 优点优点缺点缺点 干化学干化学 试带法试带法 减少目测误差 主要 测定清蛋白 简便快 速 人群普查 尿液过酸 pH 或过 碱 pH 8 时 超过试纸 缓冲能力 可出现假阴性 或假阳性 磺基水磺基水 杨酸法杨酸法 操作简便 敏感 白 蛋白 球蛋白 本周 蛋白均可发生反应 青霉素钾盐 有机碘 造影剂 高浓度尿酸 草酸盐及粘蛋白等 可呈假阳性反应 但 加热煮沸后消失 加热乙加热乙 酸法酸法 操作简便 敏感 白
9、 蛋白 球蛋白 本周 蛋白均可发生反应 经典方法 加酸过少 远离蛋白质 等电点 盐浓度过低 可致假阴性 18 尿液蛋白质的定量检验尿液蛋白质的定量检验 比浊法 磺基水杨酸 三氯乙酸 钨酸 氯化苄甲乙氧胺 氯化苯甲烃胺 双缩脲法 经典方 法 通过加酸于尿液中使蛋 白质沉淀而形成一定的 浊度 碱性环境下 蛋白质 与季胺盐结合形成不 溶性沉淀 染料结合 法 直接法 考马斯亮蓝G 250 邻苯三酚红 染料和蛋白质 结合时 其最 大吸收峰发生 漂移 沉淀 法 丽春红S 苯胺蓝 蛋白质与结合的染料在 TCA的作用下共沉淀 然 后碱性环境使沉淀复溶 测定吸光度 19 尿尿 液液 蛋蛋 白白 质质 电电 泳泳
10、 尿液标本 葡聚糖 聚乙烯吡咯烷酮 羧甲基纤维素 聚乙二 醇 乙酸纤维膜电泳 琼脂或 琼脂糖电泳 SDS PAGE 电泳 胶体金 胶体银 考马斯亮蓝G 250 染色 光密度计扫描 结果分 析 20 21 临床意义临床意义 1 生理性蛋白尿 功能性蛋白尿 直立性蛋白尿 摄入性蛋白尿 偶然性蛋白尿 老年性蛋白尿 妊娠性蛋白尿 22 2 病理性蛋白尿 肾前性蛋白尿 如溢出性蛋白尿 肾性蛋白尿 肾后性蛋白尿 如组织性蛋白尿 23 三 尿糖的检验三 尿糖的检验 当血糖浓度超过8 88mmol L时或糖 定性试验测出尿糖称糖尿 一般是指 葡萄糖尿 此界限称为肾糖阈 健康 人尿葡萄糖 0 8 mol L 形
11、成原因 1 每分钟流经肾小球葡萄糖过多 2 肾小管上皮细胞回收葡萄糖能力下 降 24 一 尿糖产生原因 一 血糖增高性糖 一 血糖增高性糖 尿尿 25 糖糖 尿尿 病 病 胰岛素分泌量相对不足或绝对不 足 对葡萄糖的利用率减低 血糖增高 从 尿中排出 典型临床表现 三多一少 尿糖与血糖检测关系 尿糖与血糖检测关系 1 轻型患者 空腹血糖正常或轻度增高 尿糖 呈阴性 进餐后2h 血糖增高 尿糖阳性 2 并发肾小球动脉硬化症 因肾血流量减低 肾小球滤过率减低 肾糖阈增高 尿糖仍可 阴性 3 同时检查血糖 尿糖 餐后2h尿糖 糖耐 量试验 4 胰岛素依赖的患者 尿糖检测结果与血糖的 对应性较差 宜用
12、血糖监测患者的治疗 26 二 血糖正常性糖尿称肾性 二 血糖正常性糖尿称肾性 糖尿糖尿 由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力 减低 肾糖阈减低所致的糖尿 家族性肾性糖尿 新生儿糖尿 后天获得性肾性糖尿 27 三 其他糖尿 三 其他糖尿 1 乳糖尿 妊娠或哺乳期妇女 2 半乳糖尿 先天性半乳糖血症 是一种常染 色体隐性遗传性疾病 缺乏转移酶 不能把食 物中的半乳糖转化为葡萄糖所致 3 果糖尿 fructosuria 原发性果糖尿 缺乏果糖激酶 果糖不耐受症 28 注意事项 1 尿液标本新鲜 2 反应灵敏度受时间及温度影响 3 试带密闭保存 有效期为半年 5 尿液被过氧化物或次氯酸盐污染 呈假阳性
13、 对其他 还原物质或还原性药物不起反应 一 葡萄糖氧化酶试带法 葡萄糖 H2O 葡萄糖氧化酶 葡萄糖醛酸 H2O2 H2O2 色原剂 过氧化物酶 有色物质 常用的色源剂有邻联甲苯胺 碘化钾 二 尿液糖定性检查 29 二 糖还原试验 二 糖还原试验 BenedictBenedict法 法 葡萄糖含有醛基在热碱性环境中可将Cu2 还原为低价的氧化亚铜 Cu2O 1 新鲜尿液 2 试剂与尿液比例应为10 1 3 尿中如含大量尿酸盐 煮沸后浑浊略带绿 色 但沉淀不显黄色 必须在冷却后观察沉 淀物 4 非糖还原物质 如链霉素 青霉素 水杨 酸 抗坏血酸在尿中浓度过高时可呈阳性反 应 5 大量蛋白质可形成
14、铜保护胶体 影响 Cu2O沉淀 也偶见紫色双缩脲反应 于测 定前将尿液酸化 煮沸过滤 以除蛋白 黄 疸尿干扰反应的颜色 30 三 试纸法与班氏还原法尿糖定性结果不 三 试纸法与班氏还原法尿糖定性结果不 一致一致 qq氧化酶试纸法阴性 还原实验法阳性氧化酶试纸法阴性 还原实验法阳性 试纸质量问题 葡萄糖以外的其他还原糖 尿液中含有较高浓度的还原性物质 存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质 qq氧化酶试纸法阳性 还原实验法阴性氧化酶试纸法阳性 还原实验法阴性 尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染 31 l l 尿液糖的其他检查法尿液糖的其他检查法 1 乳糖检验 马尔法蒂法 2 果糖检验 谢利瓦诺夫法
15、3 戊糖检验 比阿尔法 32 三 尿糖检查的临床意三 尿糖检查的临床意 义义 糖糖 尿尿 非葡萄糖尿非葡萄糖尿 葡萄糖尿葡萄糖尿 胰岛外性糖胰岛外性糖 尿尿 生理性糖尿生理性糖尿 摄食性糖尿摄食性糖尿 妊娠性糖尿妊娠性糖尿 神经精神性糖神经精神性糖 尿尿 病理性糖病理性糖 尿尿 真性糖尿真性糖尿 半乳糖尿半乳糖尿 果糖尿果糖尿 戊糖尿戊糖尿 其他糖尿其他糖尿 33 四 尿酮体的检查四 尿酮体的检查 酮体 丙酮 2 乙酰乙酸 20 羟 丁酸 78 是体内脂肪酸氧化所产生的中 间产物 见于长期禁食的病人 妊娠中毒 饮食中缺乏 糖类或脂肪摄入过多 重症糖尿病患者等 34 尿中丙酮和乙酰乙酸定性检查尿
16、中丙酮和乙酰乙酸定性检查 一 Lange法 尿中丙酮和乙酰乙酸在碱 性溶液中与亚硝基铁氰化钠反应成紫色化合 物 二 Rothera改良法 粉剂法 三 试带法 试带浸有硝基铁氰化钠 35 羟丁酸检测 羟丁酸检测 羟丁酸 NAD 乙酰乙酸 NADH 在乳酸脱氢酶抑制剂存在下 加入 羟丁 酸脱氢酶和NAD 测定340nm NADH增 加的速度 羟丁酸 脱氢酶 意义 意义 羟丁酸的肾阈比较高 如尿中 出现较多 羟丁酸 表明酮血症加重 36 新鲜尿标本 乙酰乙酸的灵敏度最高 检测丙酮的敏感 度仅为乙酰乙酸的1 10 20 羟丁酸不反 应 高浓度尿酸盐显黄褐色反应 多巴胺和苯 丙酮酸显橙红色 酚红显鲜红色 造成假阳性 4 粉剂法敏感性不如试带法敏感 5 不同病因引起的酮症 酮体的成分不同 即 使同一病人不同病程也可有差异 糖尿病酮 症酸中毒早期 主要 羟丁酸 症状缓解后 羟丁酸转化为乙酰乙酸 注意事项注意事项 37 临床意义临床意义 1 糖尿病酮症酸中毒 2 氯仿 乙醚 磷中毒可出现酮尿 服用双胍类 降糖灵 降糖药可出现酮 尿 3 非糖尿病患者 因感染性疾病发热 消耗 严重腹泻 呕吐 孕妇妊娠剧吐
