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1、HPLC法测定氨茶碱 血药浓度 二 原理 四 内容 五 注意事项 三 器材与试药 实验一 HPLC法测定氨茶 碱血药浓度 一 目的 一 目的 1 掌握HPLC法测定氨茶碱血药浓度的方 法 2 熟悉治疗药物监测 TDM 及药动学基本 方法 3 了解血液样品采集方法 三 器械与试药 1 器材 高效液相色谱仪 振荡器 离心机 氮吹仪 微量移液器 2 试药 25 乌拉坦溶液 肝素 氨茶碱注 射液 咖啡因 3 实验动物 家兔 一 样品采集 二 样品处理 三 数据处理 四 实验内容 颈静脉插管 采集血液样品 按50mg kg氨茶碱颈静脉给药 于5 10 30 60 90 120 180 240min时抽取
2、静脉血 1mL 离心10min 3000r min 取上层血浆 冷藏待用 1 样品采集 2 样品处理 内标液20uL HPLC测 定 样品 100uL 混合溶媒 3mL 涡旋混合 1min 离心5min 下层有机相 1 8mL 玻璃试管 50 水浴水浴 氮气吹干氮气吹干 残 渣 100 L100 L流动相流动相 1 绘制标准曲线 取空白血浆100 L 6份 分别置带盖玻 璃试管中 加不同体积标准茶碱液 加 内标液 咖啡因200 g mL 20 L 以 下同样品处理方法进行处理 3 数据处理 2 内标法计算样品浓度 3 根据血药浓度测定结果判别 隔室模型 4 用3P97求算药 动学参数 1 整个
3、操作过程的平行性 2 进样器每次使用前用甲醇溶液冲洗5遍 外 壁用滤纸擦干 待用 3 氮气流量不要太大 以液面被微吹动为宜 4 使用微量移液器 注意气液平衡现象 一般以第三次取液为宜 五 注意事项 混合溶媒 3mL 样品100uL 漩涡1min 离心5min 移取下层有机相 1 8mL 玻璃试管 50 水浴水浴 氮气吹干氮气吹干 100 L100 L流动相溶解流动相溶解残渣 HPLC测定 血浆样品处理 内标液 20uL 血浆样品采集 动物麻醉 插管 取空白血浆1mL 按时间点取含药血浆 取含药血浆具体操作 1 取出插管中废液 2 取1mL血浆至离心管 3 向插管中注入1mL生理盐水 4 向插管中注入肝素至插管口处 给药 并在时 间中点计时 谢谢您的观看
