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1、菊花的组织培养 通过必修课的学习 我们已经了解到大 多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的 那么 有没有不用种子来培育植物的方法呢 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 专题专题3 3 植物组织培养技术植物组织培养技术 课题一 菊花的组织培养 一 基础知识一 基础知识 1 1 植物的组织培养的过程 植物的组织培养的过程 1 1 植物组织培养的原理 植物细胞具有全能性 定义 定义 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的 潜能潜能 原理 原理 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套 遗传物质 都有发育成为完整个体
2、所必需的全部基因遗传物质 都有发育成为完整个体所必需的全部基因 全能性的比较全能性的比较 受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞 植物体细胞 动物体细胞 离体的植物器 官 组织 细 胞 脱分化 愈 伤 组 织 再分化 根 芽 植 物 体 2 2 植物组织培养过程 细胞的分化细胞的分化 外植体 外植体 从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 相关概念相关概念 脱分化脱分化再分化再分化 愈伤组织愈伤组织 细胞排列疏松而无规则细胞排列疏松而无规则 是高度液泡化的 是高度液泡化的 成无定形状态的薄壁细胞成无定形状态的薄壁细胞 人参的愈伤组织人参的愈伤
3、组织 2 2 影响植物组织培养的因素 影响植物组织培养的因素 1 1 植物材料的选择 植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄 保存时间的长短会同一植物材料的年龄 保存时间的长短会 影响实验结果影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝上部新萌生的侧枝 2 2 不同的离体组织和细胞对营养 环境等条 不同的离体组织和细胞对营养 环境等条 件的要求相对特殊 需配置不同的培养基件的要求相对特殊 需配置不同的培养基 MSMS培养基主
4、要成分包括 培养基主要成分包括 A A 大量元素 大量元素 N N P P S S K K CaCa MgMg等等 B B 微量元素 微量元素 B B MnMn CuCu ZnZn FeFe MoMo I I CoCo等等 C C 有机物 植物激素 有机物 植物激素 常用的植物激素 生长素 细胞分裂素和常用的植物激素 生长素 细胞分裂素和 赤霉素赤霉素 生长素类 生长素类 2 2 4 4 二氯苯氧乙酸 二氯苯氧乙酸 2 2 4 4 DD 吲哚乙酸 吲哚乙酸 IAAIAA 萘乙酸 萘乙酸 NAANAA 吲哚丁酸 吲哚丁酸 IBAIBA 细胞分裂素类 细胞分裂素类 激动素 激动素 KTKT 6 6
5、 苄基嘌呤 苄基嘌呤 6 6 BABA 玉米素 玉米素 ZTZT 赤霉素类 赤霉素类 赤霉酸 赤霉酸 GA3GA3 3 3 植物激素的影响 植物激素的影响 生长素和细胞分裂素作用生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在 的情况下 细胞分裂素的作用呈现加强的趋势的情况下 细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 使用顺序使用顺序实验结果实验结果 先使用生长素 后使用先使用生长素 后使用 细胞分裂素细胞分裂素 有利于细胞分裂 但不有利于细胞分裂 但不 利分化利分化
6、先使用细胞分裂素后使先使用细胞分裂素后使 用生长素用生长素 细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高 生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素 有利于根的分化有利于根的分化 生长素生长素细胞分裂素 细胞分裂素 生长素生长素 细胞分裂细胞分裂 素素 生长素生长素 再分化再分化 植物细胞培养植物细胞培养 不需要光不需要光 需要光需要光 离体离体 3 3 植物组织培养必要条件 植物组织培养必要条件 一定的营养物质 激素和其他一定的营养物质 激素和其他 外界条件外界条件 整个过程必须在无菌条 件下进行 1 1 培育无病毒植株 培育无病毒植株 2 2 培养紫草愈伤组织培养紫草愈
7、伤组织 提取紫草素 治疗烫伤提取紫草素 治疗烫伤 和割伤的药物以及染料和化妆品的原料 和割伤的药物以及染料和化妆品的原料 4 4 基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 4 4 植物组织培养的应用 植物组织培养的应用 3 3 诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力 的胚状结构 包裹上人造种皮 制成人工种子的胚状结构 包裹上人造种皮 制成人工种子 可以解决 可以解决有些作物品种繁殖能力差 结子困有些作物品种繁殖能力差 结子困 难或发芽率低等问题难或发芽率低等问题 人工种子人工种子 二 实验操作二 实验操作 一 制备 一 制
8、备MSMS固体培养基固体培养基 MSMS培养基包括培养基包括2020多种营养成分 实验室一般多种营养成分 实验室一般 使用使用4 4 C C保存配制好的培养基母液来制备 保存配制好的培养基母液来制备 2 2 配置培养基 配置培养基 分装到锥形瓶中 每瓶分装分装到锥形瓶中 每瓶分装50ml50ml或或100ml100ml 配制培养液配制培养液 调调PHPH 培养基的分装培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养由于菊花的茎段的组织培养比较容易比较容易 因此 因此 不必添加植物激素不必添加植物激素 3 3 灭菌 灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸高压蒸 汽
9、灭菌汽灭菌 1 1 选材 选材 菊花茎段 取生长旺盛的嫩枝菊花茎段 取生长旺盛的嫩枝 二 外植体消毒 二 外植体消毒 2 2 消毒 消毒 流水冲洗流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉 用软刷轻轻刷菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉 用软刷轻轻刷 洗 刷洗后在流水下冲洗洗 刷洗后在流水下冲洗20min20min左右左右 酒精处理酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入体积分数用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入体积分数 为为7070 的酒精 的酒精中摇动中摇动2 2 3 3次 持续次 持续6 6 7s7s 立即将外 立即将外 植体取出 在无菌水中清洗植体取出 在无菌水中清洗 消毒液
10、处理消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入质取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入质 量分数为量分数为0 10 1 的氯化汞溶液 的氯化汞溶液中中1 1 2min2min 取出后在 取出后在 无菌水中至少清洗无菌水中至少清洗3 3次 漂净次 漂净消毒液消毒液 三 接种 三 接种 用用7070 的酒精喷雾使空气消毒 的酒精喷雾使空气消毒 酒精或新洁酒精或新洁 尔灭搽洗工作台并用紫外线照射尔灭搽洗工作台并用紫外线照射2020分钟分钟 1 1 接种室消毒 接种室消毒 2 2 无菌操作要求 无菌操作要求 操作要在操作要在酒精灯火焰旁酒精灯火焰旁完成 每次使用器械后完成 每次使用
11、器械后 都需要用 都需要用火焰灼烧灭菌火焰灼烧灭菌 接种后立即盖好瓶 接种后立即盖好瓶 盖 盖 3 3 材料的切取和接种 材料的切取和接种 四 培养 四 培养 1 1 愈伤组织的培养 愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过从接种外植体到出现愈伤组织需经过2 2周时间 周时间 2 2 周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白 色的瘤状愈伤组织 色的瘤状愈伤组织 首次培养愈伤组织时 恒温首次培养愈伤组织时 恒温 箱的门应该关闭不必见光 因为在无光条件下愈箱的门应该关闭不必见光 因为在无光条件下愈 伤组织长的更快 伤组织长的更快 2 2周后 培养
12、基成分接近耗尽 周后 培养基成分接近耗尽 必须更换培养基 进行继代培养必须更换培养基 进行继代培养 五 移栽 五 移栽 移栽生根的菊花试管苗之前 应先打开培养瓶的封移栽生根的菊花试管苗之前 应先打开培养瓶的封 口膜 让试管苗在培养间生长几日口膜 让试管苗在培养间生长几日 1 1 打开封口膜 打开封口膜 2 2 清洗转移 清洗转移 用流水清洗根部的培养基 用流水清洗根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭将幼苗移植到消过毒的蛭 石或珍珠岩等环境下石或珍珠岩等环境下生活一段时间生活一段时间 珍珠岩 固体基质型 含水量高 蓄水性强 透性珍珠岩 固体基质型 含水量高 蓄水性强 透性 好 适合栽培好 适合栽
13、培 3 3 移栽 移栽幼苗长壮后 移栽到土壤中幼苗长壮后 移栽到土壤中 六 栽培 六 栽培 幼苗移栽后 每天观察并记录幼苗的生长情况 适幼苗移栽后 每天观察并记录幼苗的生长情况 适 时浇水 施肥 直至开花时浇水 施肥 直至开花 1 下列关于愈伤组织的说法中不正确的是 A 愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂 B 用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用 C 培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料 D 人们可以从愈伤组织中提取所需物质 B 2 植物组织培养过程中的脱分化是指 A 植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C 植物的器官 组织或细胞 通过离体培养产
14、生愈 伤组织的过程 D 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 C 3 胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养 能发育成新 的植株 下列有关的叙述中 不正确的是 A 说明高度分化的植物细胞具有全能性 B 植物细胞的全能性得以表达要离开母体 C 新植株的形成是细胞分裂和分化的结果 D 高度分化的动物细胞也具有全能性 D 4 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化 目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快 速繁殖脱毒的种苗 以保证该品种的品质和产量 水平 这种通过分生组织离体培养获得种苗的过 程不涉及细胞的 A 有丝分裂B 分化 C 减数分裂D 全能性 C 5 在离体的植物器官 组织或细胞脱分化形成愈 伤组织的过程中 下列哪一项条件是不需要的 A 消毒灭菌 B 适宜的温度 C 充足的光照 D 适宜的养料和激素 C 6 植物细胞表现出全能性的必要条件是 A 导入其他植物细胞的基因 B 将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中 C 用适当浓度的秋水仙素处理 D 脱离母体后 给予适宜的营养和适宜的温度等 外界条件 D 此课件下载可自行编辑修改 供参考 部分内容来源于网络 如有侵权请与我联系删除
