RH血型鉴定

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1、单击此处编辑母版标题样式 单击此处编辑母版副标题样式 1 项目二 血型与输血 任务二 Rh血型鉴定 第四节 Rh血型 概念 一 Rh血型抗原 抗原性强弱次序为D E C c e Rh阳性 含D抗原 Rh阴性 不含D抗原 亚型中 以Du最有临床意义 易被误定为 Rh阴性 二 Rh血型抗体 免疫性抗体 抗D抗体最强 其次是抗c和抗E IgG 免疫产生 小 可通过胎盘 温性抗体 需要抗人球蛋白等介质才 能与相应红细胞凝集 三 Rh血型的遗传和命名 四 Rh血型鉴定 是否含有D抗原 因Rh抗体多为不完全抗体 所以多采用酶介 质 抗人球蛋白等试验方法 一 聚凝胺法 原理 聚凝胺 产生很多阳离子 低离子强

2、度溶液 降低红细胞的Zate电位 红细胞表面含D抗原 与抗D抗体凝集 柠檬酸盐解聚液 消除聚凝胺的正电荷 使 正常红细胞的非特异性凝集解散 而抗原抗 体引起的凝集仍然存在 聚凝胺 低离子强度溶液 柠檬酸盐解聚液 二 酶介质法 原理 酶 木瓜酶 菠萝酶等 可破坏红细胞表 面带负电荷的唾液酸 降低红细胞表面负 电荷 使红细胞之间排斥力减小 红细胞 间距缩小 在不完全抗体的作用下发生凝 集 三 抗人球蛋白法 原理 不完全IgG类抗D抗体 使红细胞致敏 加入 经一定稀释的抗人球蛋白血清后 将致敏红 细胞连接 发生肉眼可见的凝集 实践操作 用PH6 8 7 2的生理盐水配制2 3 的红细胞悬液 洗 涤1

3、次 加入抗D抗体与红细胞悬液各一滴于玻璃试管中 混合并在室温下 18 25 15分钟 离心15秒钟 观察结果 出现凝集为阳性 不出现凝集为阴性 对于阴性结果应再做的D 和弱D型 的测试 注 该抗D抗体为 IgG IgM单克隆鉴定抗体混合型 其 中IgMAnti D可直接凝结D阳性红细胞 除了D4型和弱 D 亚D 的一部分 IgGAnti D通过间接的抗蛋白测试方 法凝结D4和低浓度的弱D 亚D 五 Rh血型的临床意义 一 Rh血型与输血 二 Rh血型与新生儿溶血病 Rh阴性 Rh 抗D 抗D 第二次 复习思考题 1 Rh血型中抗原性最强 临床意义又最大的抗原 是 2 因为Rh抗体多为 抗体 所

4、以常采用 等方法 3 Rh血型不合引起的新生儿溶血病的原因 Rh 的母亲孕育了Rh 胎儿后 胎儿红细胞可通过胎 盘屏障进入母体的血循环中 刺激母体产生 该抗体 进入胎儿体内而发生新生儿溶血病 由于第一胎产生的抗体效价较低 一般对胎儿无 明显影响 但第二胎时抗体效价增高 易引起新生 儿溶血病 复习思考题 4 木瓜酶可破坏红细胞表面带负电荷的 降低红细胞表面负电荷 使红细胞之间 排斥力减低 红细胞间距 在不完 全抗体的作用下发生凝集 5 抗人球蛋白可与红细胞上结合的 结合 将致敏红细胞连接 发生 的凝集 三 ABO血型抗体 一 天然抗体 二 免疫抗体 IgM IgG 天然抗体与免疫抗体的鉴别 特性

5、 天然抗体 免疫抗体 抗原刺激 分子量 与红C反应最适温度 对血型物质的作用 能否通过胎盘 与红C反应的介质 无察觉 有抗原刺激 妊娠 输血 大 小 4 25 37 易被血型物质中和 大多不能被血型物质中和 不能 能 盐水介质 酶 抗人球蛋白等 IgMIgG 四 ABO血型的亚型 亚型 属同一血型抗原 但抗原结构和性能或 抗原位点数不尽相同的情况 A型 A1 A1和A抗原 血清中含有抗B抗体 A2 只有A抗原 血清中含抗B和抗A1抗体 五 ABO血型的遗传 A和B为显性基因 O为隐性基因 举例 A B AO BO AB AO BO OO 任务一 第三节 ABO血型鉴定 一 标本的采集 柠檬酸钠

6、抗凝剂 二 红细胞悬液的配制 1 洗涤 2 配制2 5 的红细胞悬液 5 红细胞悬液 比容红细胞1滴 生理盐水1ml 2 红细胞悬液 比容红细胞1滴 生理盐水2ml 三 标准血清要求 1 特异性 2 效价 3 亲和力 4 不含冷凝集素 5 不含补体 无任何污染 四 标准红细胞悬液的制备 五 ABO血型鉴定方法 正定型 反定型 一 试管法 二 玻片法 用已知抗A 抗B和抗A B分型血清来测定 红细胞上有无相应的A B抗原 用已知A抗原和B抗原红细胞来测定 血清中有无相应的抗A 抗B抗体 三 注意事项 1 严格查对 2 操作方法应按规定先加血清 再加红细胞 悬液 3 试验用器材应清洁干燥 4 玻片

7、法勿将干涸的红细胞聚集误认为凝集 5 反定型一般不宜采用玻片法 6 试管法离心后应先观察上清有无溶血 单击此处编辑母版标题样式 单击此处编辑母版副标题样式 22 对于工作人员1 的错误 病人就是 100 的误诊 前身物质 oh 经H基因作用 H抗原 经A基因作用 A抗原 经B基因作用 B抗原 一 试管法 1 正定型 取10mm 60mm试管3支 分别标 明抗A 抗B 抗A B 用滴管加入相应的抗A 抗 B 抗A B标准血清各1滴 再加入被检者5 红细 胞盐水悬液1滴 轻轻混匀 2 反定型 取同样试管3支 分别标明A B O 红细胞 用滴管各加入被检者血清1滴 再分别加入 A B O型5 标准红

8、细胞悬液1滴 轻轻混匀 3 立即以RCF177g 1000r min 离心1分钟 4 取出试管 先观察有无溶血 再轻弹试管 观察有无红细胞凝集 如肉眼不见凝集 应将反应 物倾倒于玻片上 在显微镜下用低倍镜观察 结果 判断可见表7 5 实验操作 ABO血型鉴定 正定型 试管法 A B 标记号 1滴抗B 1滴RBC 悬液 标记号 1滴抗A 1滴RBC 悬液 1000转 min离心1分钟 观察凝集结果 ABO血型正反定型结果判定 标准血清 被检者血型 标准红细胞 被检者红细胞 被检者血清 抗A 抗B 抗A B A细胞 B细胞 O 细胞 A型 B型 O型 AB型 二 玻片法 1 正定型 取清洁玻片或白

9、瓷板 用蜡笔画出方 格或圆圈 依次标明抗A 抗B 抗A B 按标记用滴管加入相应的标准血清各1滴 再加入被检者5 红细胞悬液1滴 转动玻片混匀 2 反定型 另取清洁玻片或白瓷板 用蜡笔画出 方格或圆圈 依次标明A细胞 B细胞 O细胞 用 滴管加入被检者血清各1滴 再按标记加入5 标准 A B O红细胞悬液1滴 转动玻片混匀 3 不断转动玻片或白瓷板 使血清与细胞充分 混合 室温下 20 24 10 15分钟 观察 有无凝集和溶血 如用玻片试验 必要时可用显微 镜在低倍镜下观察 红细胞凝集判断标准图7 2 实验操作 ABO血型鉴定 正定型 玻片法 A B 各加一滴红细胞 抗B 抗A 转动玻片 1

10、5分 钟后观察结果 单击此处编辑母版标题样式 单击此处编辑母版副标题样式 31 实验十六 ABO血型鉴定 RH血型鉴定 实验目的 1 熟练掌握ABO血型鉴定方法 2 熟悉RH血型鉴定的方法及结果判定 实验器材 试剂 器材 毛细血管采血用具 离心机 试管 玻片 试剂 1 生理盐水 2 标准血清 3 抗D抗体 实验安排 两人一组互取标本 配制5 红细胞悬液 1 单号 ABO血型鉴定正定型 玻片法 2 双号 ABO血型鉴定正定型 试管法 3 每人进行Rh血型鉴定 提问 玻片法血型测定的方法及结果判读 实验操作 两人一组毛细血管采血 1 配制5 红细胞悬液 末梢采血1滴 10滴生理盐水 2 ABO血型

11、鉴定 正定型 玻片法 A B 各加一滴红细胞 抗B 抗A 转动玻片 15分 钟后观察结果 实验操作 ABO血型鉴定 正定型 玻片法 A B 各加一滴红细胞 抗B 抗A 转动玻片 15分 钟后观察结果 实验操作 3 ABO血型鉴定 正定型 试管法 A B 标记号 1滴抗B 1滴RBC 悬液 标记号 1滴抗A 1滴RBC 悬液 1000转 min离心1分钟 观察凝集结果 实验操作 4 Rh血型鉴定 1滴红细胞悬液1滴抗D 37 水浴30分钟 Rh阳性 Rh阴性 结果报告 ABO血型的报告方式 ABO血型 型 Rh血型的报告方式 Rh血型 阴性 Rh血型 阳性 注意事项 要有及高的责任心 避免发生血型鉴定错 误 对于工作人员1 的错误 病人就是 100 的误诊 作业 完成实验报告 P248 实验准备与安排 一 1 2 3 P252 实验准备与安排 一 1 2 3 报告今日血型测定结果 格式如下 姓名 ABO血型 Rh血型 检验者签字 日期 预习 交叉配血的操作方法 同型配血的结果判断 异型配血的结果判断