实验四 灭活疫苗的制备及其应用PPT课件.ppt

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1、1 如何有效预防疾病的发生 疫苗 2 什么是疫苗 疫苗是将病原微生物 如细菌 立克次氏体 病毒 等 及其代谢产物 经过人工减毒 灭活或利用转基因 等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂 疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性 当 动物体接触到这种不具伤害力的病原菌后 免疫系统便 会产生一定的保护物质 如免疫激素 活性生理物质 特殊抗体等 当动物再次接触到这种病原菌时 动物体 的免疫系统便会依循其原有的记忆 制造更多的保护物 质来阻止病原菌的伤害 3 疫苗的种类有哪些 一 人工主动免疫 1 灭活疫苗 病原细菌 病毒 立克次体等 经人工培养 再用物理 或化学方法将其杀灭制成疫苗疫苗 此种疫苗失

2、去繁殖 能力 但保留免疫原性 2 减毒活疫苗 用人工定向变异方法或从自然界筛选出毒力减弱或基本 无毒的活微生物制成减毒活疫苗 接种后在体内有生长 繁殖能力 可激发机体对病原的持久免疫力 3 类毒素 细胞外毒素经甲醛处理后失去毒性 仍保留免疫原性 为类毒素 4 5 二 人工被动免疫 1 抗毒素 2 人免疫球蛋白制剂 3 细胞因子制剂 4 单克隆抗体制剂 人工主动免疫和人工被动免疫均能使机体增加抗病能力 但后者的持续时间短 主要用治疗和紧急预防 6 三 新型疫苗 1 亚单位疫苗 通过蛋白质水解方法 提取细菌 病毒的特殊蛋白质结构 筛选出的具有免疫 活性的片段制成的疫苗 称为亚单位疫苗 2 结合疫苗

3、 指采用化学方法将多糖共价结合在蛋白载体上所制备成的多糖 蛋白结合疫苗 用于提高细菌疫苗多糖抗原的免疫原性 如b型流感嗜血杆菌结合疫苗 3 合成肽疫苗 合成肽疫苗是一种仅含免疫决定簇组分的小肽 即用人工方法按天然蛋白质的氨 基酸顺序合成保护性短肽 与载体连接后加佐剂所制成的疫苗 是最为理想的安 全新型疫苗 4 基因工程疫苗 使用DNA重组生物技术 把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌 酵母 菌或哺乳动物细胞中 使之充分表达 经纯化后而制得的疫苗 7 8 疫苗有哪些接种方式 注射 口服 浸泡 喷雾 草鱼注射疫苗现场 1 2 3 9 10 实验四 灭活疫苗的制备及其应用 一 实验目的 1 了解

4、疫苗的种类和免疫途径 2 掌握组织浆疫苗的制备方法 11 二 实验内容 1 鱼病检测 为后续实验做准备 2 组织浆疫苗的制备 3 灭活疫苗的安全性评价 了解 12 三 主要仪器及试材 解剖用具 包括解剖盘 解剖刀 解剖针 大小手术剪 大小镊子 培 养皿 载玻片 盖玻片 纱布等 离心机 注射器等 实验鱼 13 四 实验方法与步骤 一 组织浆疫苗的制备 1 活苗的制备 取有典型症状的鱼 先用酒精或碘制剂消毒鱼体表 解剖后取肝 脾 肾组 织 并称重 然后让在研钵中磨成糊状 加入5倍生理盐水 用双层纱布过滤 去除沉淀 即 成原毒组织浆 活苗 2 灭活 取上述活苗 于60 65 水浴锅中孵育2h 3 防

5、腐保存 对已灭活的疫苗加入福尔马林 使成1 的浓度 4 保存 14 四 实验方法与步骤 二 安全性实验 1 灭活效果的评价 1 细菌性灭活疫苗 涂布于琼脂平板上 放入28 温箱24 h 生长缓慢的细菌培养48h 2 病毒性灭活疫苗 接种至合适细胞系 观察细胞病变 2 鱼体安全性实验 取灭活的疫苗 加入同体积的生理盐水 注射10cm规格的鲫30尾 每尾0 2ml 正常 饲养 5d内无死亡 可用于后续的免疫保护评价 15 五 实验注意事项 操作用的全部工具消毒后方可使用 制备组织浆疫苗 与所取病鱼材料直接有关 因此必须选择典型的传染性病鱼 16 六 实验报告 1 某养殖场在疾病高发期紧急启用灭活疫苗的免疫程序 结果导致大量免疫个体的死亡 假 如你是渔病学专家 请分析其中的原因 50分 2 假如你是鱼类免疫学家 能否设计合适的鱼类疫苗免疫途径 提高现有的免疫效率 简要 阐述其依据 50分 选做 3 假如你是湖北省某鱼用疫苗公司的技术总监 请问能否将分 离于湖北的嗜水气单胞菌灭活菌苗销售至广东 江苏等地的养殖场 简要阐述其理由 50分 选做 17

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