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1、第三章第三章 血型与输血 血型与输血 2 2 1 三 三 RhRh血型系统血型系统 vvRhRh阳性 阳性 含含D D抗原抗原的红细胞的红细胞 vvRhRh阴性 阴性 不含不含D D抗原抗原的红细胞的红细胞 vv汉族人中汉族人中RhRh阴性率阴性率 1 1 2 一 一 RhRh血型系统抗体血型系统抗体 vv1 Rh1 Rh抗体的产生抗体的产生 RhRh抗体绝大多数是通过抗体绝大多数是通过RhRh血型不合输血或妊娠产生的免疫血型不合输血或妊娠产生的免疫 性抗体 性抗体 这些抗体均为这些抗体均为IgGIgG vv2 Rh2 Rh抗体的种类抗体的种类 主要有主要有5 5种 即抗种 即抗D D 抗 抗
2、E E 抗 抗C C 抗 抗c c 抗 抗e e 最 最 常见的是抗常见的是抗D D 凡被检红细胞和抗 凡被检红细胞和抗D D血清凝集者血清凝集者 为为RhRh阳性 不凝集为阳性 不凝集为RhRh阴性阴性 vv3 Rh3 Rh抗体的特性抗体的特性 为免疫性抗体为免疫性抗体IgGIgG 3 二 二 RhRh血型鉴定方法及评价血型鉴定方法及评价 vv1 1 酶介质法酶介质法 分为直接酶介质法 间接酶介质分为直接酶介质法 间接酶介质 法法 vv2 2 抗球蛋白试验 抗球蛋白试验 Coombs testCoombs test 分为直接抗球蛋白试验 分为直接抗球蛋白试验 DATDAT 和间接抗球蛋白试验
3、 和间接抗球蛋白试验 IATIAT vv3 3 凝聚胺试验 凝聚胺试验 polybrene testpolybrene test vv4 4 人源盐水介质抗人源盐水介质抗D D试验试验 临床应用广泛临床应用广泛 vv 5 5 低离子强度 盐 溶液试验低离子强度 盐 溶液试验 4 在酶处理下 IgG抗体可凝集RBC u1 酶介质法 5 1 酶介质法 离心离心 看结果看结果 阳阳 性性 阴阴 性性 37 37 3737 水浴水浴3030分钟分钟 6 2 抗球蛋白 Coombs 试验 vvDATDAT 直抗 直抗 直接检测红细胞表面有无不完直接检测红细胞表面有无不完 全抗体吸附的试验 全抗体吸附的试
4、验 vvIATIAT 间抗 通过体外致敏红细胞 再检测 间抗 通过体外致敏红细胞 再检测 红细胞上有无不完全抗体吸附的试验 红细胞上有无不完全抗体吸附的试验 7 在盐水介质中在盐水介质中 IgMIgM抗抗 体凝集体凝集 RBCRBC示示 意图意图 8 在盐水介质中 在盐水介质中 IgGIgG抗体抗体不凝集不凝集RBCRBC 9 抗球蛋白 2 抗球蛋白试验 10 3 凝聚胺技术 原理原理 凝聚胺 凝聚胺 PolybrenePolybrene 一种高 一种高 价阳离子季胺盐多聚物 溶解后能产生价阳离子季胺盐多聚物 溶解后能产生 很多正电荷 可以中和红细胞表面的负很多正电荷 可以中和红细胞表面的负
5、电荷 使红细胞之间距离减少 能引起电荷 使红细胞之间距离减少 能引起 正常红细胞正常红细胞可逆性的非特异性可逆性的非特异性凝集 如凝集 如 果是果是抗体致敏抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集 的红细胞被聚凝胺凝集 则凝集则凝集不可逆不可逆 11 在凝聚胺处理下 IgG抗体可凝集RBC 12 4 4 人源盐水介质试验人源盐水介质试验 vv原理 加入蛋白变性剂 使原理 加入蛋白变性剂 使IgGIgG抗抗D D抗体转变抗体转变 为类似大分子的为类似大分子的 IgM IgM 在盐水中发生肉眼 在盐水中发生肉眼 可见的凝集反应 可见的凝集反应 临床应用广范临床应用广范 13 5 LISS 5 LISS 低离子
6、强度溶液低离子强度溶液 的原理的原理 抗原 非离子静电作用力 抗体 静电作用力 离子 抗原 抗体 当溶液中离子增多时 抗原抗体之间的静电作用力减弱 当溶液中缺少离子时 抗原抗体之间的静电作用力较强 14 三 三 RhRh血型鉴定的临床意义血型鉴定的临床意义 vv1 1 输血前的检查输血前的检查 vv2 2 新生儿溶血病诊断新生儿溶血病诊断 vv3 3 协助治疗协助治疗 15 医院坚持验血后输血医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等失血孕妇苦等6 6 小时逝去小时逝去 vv稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血 稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血 家属要求先输血救命并愿意承担一切后果 家属要求先输血救
7、命并愿意承担一切后果 但医院坚持严格按照法律规定输血 经过但医院坚持严格按照法律规定输血 经过6 6个个 多小时的焦虑等待 这位山东济阳的孕妇终多小时的焦虑等待 这位山东济阳的孕妇终 于于9 9日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去 日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去 齐鲁晚报 齐鲁晚报 20082008年年1010月月1010日 日 16 vv 血液中心冷冻库提供的血液中心冷冻库提供的4 4个单位 个单位 800ml800ml RHRH阴性阴性OO型血浆 每个单位按照常规最快也型血浆 每个单位按照常规最快也 要要3 3个小时才能解冻 且不能满足需要 只能个小时才能解冻 且不能满足需要 只能 临时从稀
8、有血型志愿者中采集临时从稀有血型志愿者中采集7 7个单位 个单位 1400ml1400ml 的血液 这样的血液又需要 的血液 这样的血液又需要3 3个小个小 时的检验 待其筹足之时 抢救的最佳时间时的检验 待其筹足之时 抢救的最佳时间 已经过去已经过去 17 vv尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一 切后果 但医院仍坚持严格按照法律规定等切后果 但医院仍坚持严格按照法律规定等 到血液检验完毕才能输血 经过到血液检验完毕才能输血 经过6 6个多小时等个多小时等 待后 引产大出血的济阳患者董明霞最终于待后 引产大出血的济阳患者董明霞最终于9 9 日下午不幸去
9、世日下午不幸去世 18 vv一个省会所在的大医院 为什么自己不备有一个省会所在的大医院 为什么自己不备有 RHRH阴性阴性OO型等稀有血浆 为什么不建立稀有型等稀有血浆 为什么不建立稀有 血型志愿者队伍 在紧急情况下 为什么不血型志愿者队伍 在紧急情况下 为什么不 及时组织稀有血志愿者紧急采集及时组织稀有血志愿者紧急采集 19 四 红细胞血型系统交叉配血试验四 红细胞血型系统交叉配血试验 20 交叉配血试验的原理交叉配血试验的原理 交叉配血试验中红细胞血型抗原与交叉配血试验中红细胞血型抗原与 相应抗体的凝集反应 可用盐水配血相应抗体的凝集反应 可用盐水配血 试验 酶介质试验试验 酶介质试验 抗
10、球蛋白试验 抗球蛋白试验 凝聚胺试验 低离子强度溶液试验及凝聚胺试验 低离子强度溶液试验及 微柱凝胶试验进行观察 微柱凝胶试验进行观察 21 盐水介质配血方法盐水介质配血方法 患 者 献 血 者 主 侧 次 侧 离心离心 看结果看结果 阳阳 性性 阴阴 性性 22 交叉配血试验 盐水配血法 交叉配血试验 盐水配血法 原理原理 完全抗体分子链较长 在电解质学液中 能克 完全抗体分子链较长 在电解质学液中 能克 服红细胞表面电荷排斥力 与相对应的抗原结合 使服红细胞表面电荷排斥力 与相对应的抗原结合 使 红细胞凝集 从而发现配血不合 有对应抗原抗体存红细胞凝集 从而发现配血不合 有对应抗原抗体存
11、在 在 方法 方法 1 1 自被检者静脉采血 自被检者静脉采血2 32 3ml ml 分离血清 并配制分离血清 并配制5 5 红细红细 胞悬液 胞悬液 2 2 主侧 病人血清 主侧 病人血清 献血员红细胞献血员红细胞 次侧 献血员血清次侧 献血员血清 病人红细胞病人红细胞 混匀 混匀 10001000转转 分 然后观察结果 分 然后观察结果 23 报告方式报告方式 交叉配合试验 交叉配合试验 法 法 受血者受血者 型血清 型血清 型红细胞不凝集 无溶血 型红细胞不凝集 无溶血 受血者受血者 红细胞红细胞 血清不凝集 无溶血血清不凝集 无溶血 结果判断 结果判断 同型配血 主侧 次侧均不凝集 表
12、示无配血禁忌 可同型配血 主侧 次侧均不凝集 表示无配血禁忌 可 以输血 异型配血时 主侧无凝集 无溶血 次侧凝集 但以输血 异型配血时 主侧无凝集 无溶血 次侧凝集 但 效价效价 1 1 6464 无溶血 可以输给少量 如次侧不凝集时 应 无溶血 可以输给少量 如次侧不凝集时 应 追查原因 追查原因 24 大量交叉配血大量交叉配血 献血员之间应进行交叉配备献血员之间应进行交叉配备 如 献如 献1 1血清血清 献献2 2红细胞红细胞 献献1 1红细胞红细胞 献献2 2血清血清 25 抗球蛋白配血方法抗球蛋白配血方法 患患 者者 献献 血血 者者 主主 侧侧 次次 侧侧 37 37 3737 水
13、浴水浴3030分钟分钟 三洗三洗 26 抗球蛋白方法配血方法抗球蛋白方法配血方法 加加 抗抗 球球 蛋蛋 白白 离心离心 看结果看结果 阳阳 性性 阴阴 性性 27 酶介质配血方法酶介质配血方法 主次侧主次侧 均加酶均加酶 患患 者者 献献 血血 者者 主主 侧侧 次次 侧侧 28 酶介质配血方法 离心离心 看结果看结果 阳阳 性性 阴阴 性性 37 37 3737 水浴水浴3030分钟分钟 29 凝聚胺技术 原理原理 凝聚胺 凝聚胺 PolybrenePolybrene 一种高价离子季 一种高价离子季 胺盐多聚物 溶解后能产生很多正电荷 可以胺盐多聚物 溶解后能产生很多正电荷 可以 中和红细
14、胞表面的负电荷 使红细胞之间距离中和红细胞表面的负电荷 使红细胞之间距离 减少 能引起减少 能引起正常正常红细胞红细胞可逆性可逆性的的非特异性非特异性凝凝 集 如果是集 如果是抗体致敏抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集 的红细胞被聚凝胺凝集 则凝集则凝集不可逆不可逆 30 聚凝胺聚凝胺 Polybrene Polybrene 配血方法配血方法 患患 者者 献献 血血 者者 主主 侧侧 次次 侧侧 室温放置室温放置 1 1 分钟分钟 主次侧均主次侧均 加聚凝胺加聚凝胺 31 聚凝胺聚凝胺 Polybrene Polybrene 配血方法配血方法 离离 心心 聚凝胺引起聚凝胺引起 红细胞非特红细胞非特
15、异性凝集异性凝集 阳阳 性性 阴阴 性性 主次侧均主次侧均 加重悬液加重悬液 看结果看结果 32 基本操作方法基本操作方法 1 1 试管中加入待检血清或血浆 试管中加入待检血清或血浆1 1滴滴 2 2 加入用 加入用LIMLIM溶液配置的溶液配置的2 32 3的红细胞悬液的红细胞悬液2 32 3滴滴 3 3 摇匀 室温放置 摇匀 室温放置1 1分钟 时间长 效果好 分钟 时间长 效果好 4 4 加聚凝胺试剂 加聚凝胺试剂1 1滴 混匀后滴 混匀后3400rpm3400rpm离心离心1515秒秒 5 5 轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集 轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集 若未见红
16、细胞凝集则需重做试验若未见红细胞凝集则需重做试验 6 6 加入 加入1 1滴重悬液 轻摇观察结果滴重悬液 轻摇观察结果 由聚凝胺引起的非特异性凝集应在由聚凝胺引起的非特异性凝集应在1 1分钟内完分钟内完 全散开 若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散全散开 若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散 开开 33 微柱凝胶介质配血法微柱凝胶介质配血法 vv红细胞抗原与相应抗体在红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质微柱凝胶介质中发生凝集中发生凝集 发应发应 34 凝胶试验使用的试剂和器材凝胶试验使用的试剂和器材 35 36 37 交叉配血试验的方法学评价交叉配血试验的方法学评价 方法方法 优点优点 缺点缺点 盐水配血试验盐水配血试验 简单 快速简单 快速 检不出检不出IgGIgG型抗体型抗体 酶介质试验酶介质试验 简便 经济简便 经济 准确性 稳定性差准确性 稳定性差 抗球蛋白试验抗球蛋白试验 最准确最准确 可靠 可靠 复杂 费时 试剂贵复杂 费时 试剂贵 凝聚胺试验凝聚胺试验 快速 准确快速 准确 需特殊试剂及器材需特殊试剂及器材 微柱凝胶试验微柱凝胶试验 灵敏灵敏 成本高成本高 38 交叉配血的
