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1、红细胞免疫功能及其测定方法红细胞免疫功能及其测定方法 n1 在肿瘤的发生发展过程中免疫功能起着重要的作用 过去的在肿瘤的发生发展过程中免疫功能起着重要的作用 过去的 观点认为免疫功能主要和白细胞有关 而红细胞在其中所起观点认为免疫功能主要和白细胞有关 而红细胞在其中所起 的作用一直未受重视 的作用一直未受重视 19811981年年siegelsiegel提出了红细胞免疫系统的提出了红细胞免疫系统的 新概念 开辟了机体免疫功能研究的新纪元 红细胞作为人新概念 开辟了机体免疫功能研究的新纪元 红细胞作为人 体血液有形成份的主要组成部分与肿瘤细胞的接触机会比其体血液有形成份的主要组成部分与肿瘤细胞的
2、接触机会比其 他细胞要大他细胞要大10001000倍 红细胞可以通过促吞噬作用 清除循环倍 红细胞可以通过促吞噬作用 清除循环 免疫复合物免疫复合物 CIC CIC 效应细胞样作用及对淋巴细胞和细胞因 效应细胞样作用及对淋巴细胞和细胞因 子的调控作用来达到抑制肿瘤的生长和转移的作用 在正常子的调控作用来达到抑制肿瘤的生长和转移的作用 在正常 情况下 红细胞免疫和白细胞免疫情况下 红细胞免疫和白细胞免疫 如如T T细胞 细胞 B B细胞 细胞 NKNK细细 胞 巨噬细胞胞 巨噬细胞 在机体内相互联系 密切配合 协同作战 识在机体内相互联系 密切配合 协同作战 识 别和清除肿瘤细胞 共同维持机体内
3、环境的平衡和生物功能别和清除肿瘤细胞 共同维持机体内环境的平衡和生物功能 的稳定 的稳定 n2 1 1 红细胞与其它免疫反应细胞的比较红细胞与其它免疫反应细胞的比较 n n 红细胞与其它血细胞均来源于骨髓造血干细胞 红细胞与其它血细胞均来源于骨髓造血干细胞 以往认为虽然它们来源相同 但功能各异 前者以往认为虽然它们来源相同 但功能各异 前者 主要是运输气体 而后者则参与免疫和防御机制主要是运输气体 而后者则参与免疫和防御机制 目前研究表明 红细胞不仅具有呼吸功能 且 目前研究表明 红细胞不仅具有呼吸功能 且 同白细胞一样具有免疫功能 同白细胞一样具有免疫功能 n3 2 2 红细胞的免疫功能红细
4、胞的免疫功能 2 1 2 1 增强吞噬作用增强吞噬作用 纳尔逊纳尔逊 Nelson Nelson 用肺炎球菌和梅毒螺旋体等进行体外实验用肺炎球菌和梅毒螺旋体等进行体外实验 发现被相应抗体致敏的肺炎球菌或梅毒螺旋体 只有 发现被相应抗体致敏的肺炎球菌或梅毒螺旋体 只有 在含补体 红细胞及白细胞的混合物中 在含补体 红细胞及白细胞的混合物中 8080 9595 能 能 迅速被吞噬而从液相中消失 若缺少红细胞 则在较长迅速被吞噬而从液相中消失 若缺少红细胞 则在较长 时间内仅有少数被吞噬 时间内仅有少数被吞噬 19561956年年NelsonNelson又将抗体调理过又将抗体调理过 的肺炎球菌注入猴
5、体内 获得的结果与体外实验相同 的肺炎球菌注入猴体内 获得的结果与体外实验相同 100100 的肺炎球菌粘附于红细胞 的肺炎球菌粘附于红细胞 n4 n n 粘附的复合物较悬浮于血浆中游离的复合物更易被吞噬 粘附的复合物较悬浮于血浆中游离的复合物更易被吞噬 某些病毒在体内也能粘附于红细胞 从而被吞噬消灭 免某些病毒在体内也能粘附于红细胞 从而被吞噬消灭 免 疫粘附可以增强吞噬作用疫粘附可以增强吞噬作用4 4 5 5倍 红细胞还能阻止癌细胞倍 红细胞还能阻止癌细胞 在循环中播散 因在外周血中癌细胞遇到红细胞比遇到白在循环中播散 因在外周血中癌细胞遇到红细胞比遇到白 细胞的机会多细胞的机会多5005
6、00 10001000倍 当癌细胞表面结合有抗体与倍 当癌细胞表面结合有抗体与 补体时 则可通过红细胞表面的补体时 则可通过红细胞表面的C3bC3b受体 使癌细胞粘附受体 使癌细胞粘附 于红细胞 故容易被吞噬细胞捕捉与吞噬 从而防止癌细于红细胞 故容易被吞噬细胞捕捉与吞噬 从而防止癌细 胞的转移与扩散 胞的转移与扩散 n n 红细胞还有吞噬细胞样的功能 因为在其细胞膜表面具有红细胞还有吞噬细胞样的功能 因为在其细胞膜表面具有 过氧化物酶 该酶是典型的溶酶体酶 它可起着巨噬细胞过氧化物酶 该酶是典型的溶酶体酶 它可起着巨噬细胞 样的杀伤作用 样的杀伤作用 n5 2 2 2 2 红细胞的免疫粘附作
7、用红细胞的免疫粘附作用 n n 免疫粘附免疫粘附是指抗原是指抗原 抗体复合物与补体抗体复合物与补体C3bC3b结合后 可粘附结合后 可粘附 于灵长目或非灵长目的红细胞与血小板上 这一现象统称于灵长目或非灵长目的红细胞与血小板上 这一现象统称 为为 血细胞免疫粘附作用血细胞免疫粘附作用 红细胞的免疫粘附活性是通过 红细胞的免疫粘附活性是通过I I 型补体受体 型补体受体 complement receptor type Icomplement receptor type I CR1 CR1 为基础实为基础实 现的 血循环中免疫复合物现的 血循环中免疫复合物 IC IC 的清除主要由红细胞的清除主
8、要由红细胞CR1CR1 携带至肝脾网状内皮系统交给巨噬细胞消灭 携带至肝脾网状内皮系统交给巨噬细胞消灭 CR1CR1成簇分成簇分 布 人类每个红细胞大约表达布 人类每个红细胞大约表达200200 500500个个CR1CR1分子 主要分子 主要 配体为配体为C3bC3b 该受体为糖蛋白 分子量为 该受体为糖蛋白 分子量为205 205 000000 红细 红细 胞上的胞上的C3bC3b受体占血循环中受体占血循环中C3bC3b受体总数的受体总数的9595 以上 因 以上 因 此 血循环中的抗原此 血循环中的抗原 抗体复合物遇到红细胞比遇到白细抗体复合物遇到红细胞比遇到白细 胞的机会多胞的机会多5
9、00500 1 0001 000倍 倍 n6 2 3 2 3 防御感染防御感染 n n 红细胞与细菌 病毒等微生物免疫粘附后 不仅可以通过红细胞与细菌 病毒等微生物免疫粘附后 不仅可以通过 过氧化物酶对它们产生直接的杀伤作用 而且还可以促进过氧化物酶对它们产生直接的杀伤作用 而且还可以促进 吞噬细胞对它们的吞噬作用 因此 红细胞的免疫功能可吞噬细胞对它们的吞噬作用 因此 红细胞的免疫功能可 以看作是机体抗感染免疫的因素之一 以看作是机体抗感染免疫的因素之一 n n 小结 小结 目前已知红细胞具有以下免疫功能 目前已知红细胞具有以下免疫功能 1 1 识别携带抗识别携带抗 原 原 2 2 清除循环
10、中免疫复合物 清除循环中免疫复合物 3 3 增强增强T T细胞依赖反应 细胞依赖反应 4 4 效应细胞样作用 效应细胞样作用 5 5 促进吞噬作用 而这些免疫功能促进吞噬作用 而这些免疫功能 的生理学基础即为红细胞免疫粘附作用 的生理学基础即为红细胞免疫粘附作用 n7 3 3 红细胞免疫功能异常与疾病红细胞免疫功能异常与疾病 n n 近年研究证实在某些病理状态下 红细胞的免疫粘附活性近年研究证实在某些病理状态下 红细胞的免疫粘附活性 可发生改变 可发生改变 SiegelSiegel等检查了等检查了2323名宫颈癌 胃癌和直肠癌名宫颈癌 胃癌和直肠癌 患者的红细胞免疫粘附功能 发现这些患者的红细
11、胞粘附患者的红细胞免疫粘附功能 发现这些患者的红细胞粘附 抗原抗原 抗体抗体 补体复合物的能力较正常人显著降低 这一资补体复合物的能力较正常人显著降低 这一资 料提示在肿瘤的发展过程中 除可抑制白细胞免疫功能外料提示在肿瘤的发展过程中 除可抑制白细胞免疫功能外 还可抑制红细胞的免疫功能 还可抑制红细胞的免疫功能 n n 系统性红斑性狼疮 系统性红斑性狼疮 SLESLE 类风湿性关节炎等自身免疫 类风湿性关节炎等自身免疫 性疾病 是因为患者体内针对自身组织发生免疫反应所致性疾病 是因为患者体内针对自身组织发生免疫反应所致 一般认为 自身免疫病患者的细胞免疫和 一般认为 自身免疫病患者的细胞免疫和
12、 或体液免疫或体液免疫 功能处于相对增强状态 通过对此类病人红细胞免疫系统功能处于相对增强状态 通过对此类病人红细胞免疫系统 的研究结果表明 其免疫功能亦明显增强 且与白细胞免的研究结果表明 其免疫功能亦明显增强 且与白细胞免 疫系统的功能改变相平行 这可能与自身免疫病患者血清疫系统的功能改变相平行 这可能与自身免疫病患者血清 中存在着红细胞中存在着红细胞C3bC3b受体活性抑制因子有关 受体活性抑制因子有关 n8 n n 目前认为原发性癫痫和银屑病的发病也与自身免疫有关 目前认为原发性癫痫和银屑病的发病也与自身免疫有关 郭峰等曾观察到这两种疾病患者的红细胞免疫功能的变化郭峰等曾观察到这两种疾
13、病患者的红细胞免疫功能的变化 与与 SLE SLE 等其它自身免疫病患者是一致的 等其它自身免疫病患者是一致的 n n 另外 再生障碍性贫血的患者 其红细胞的免疫粘附作用另外 再生障碍性贫血的患者 其红细胞的免疫粘附作用 降低 可能是由于患者造血功能障碍 所产生的红细胞数降低 可能是由于患者造血功能障碍 所产生的红细胞数 量少而且质量低劣 致使红细胞膜上的量少而且质量低劣 致使红细胞膜上的C3bC3b受体生成不足受体生成不足 慢性布氏菌病患者 其红细胞免疫功能亦降低 致使清 慢性布氏菌病患者 其红细胞免疫功能亦降低 致使清 除感染因子的能力减弱 这种现象可能是引起该病经久不除感染因子的能力减弱
14、 这种现象可能是引起该病经久不 愈的原因之一 愈的原因之一 n9 4 4 红细胞免疫功能的检测及其临床意义红细胞免疫功能的检测及其临床意义 4 1 4 1 红细胞红细胞C3bC3b受体的测定受体的测定 n n 原理 原理 红细胞膜上的红细胞膜上的C3bC3b受体受体 CR1 CR1 可与补体致敏可与补体致敏 的酵母菌粘附形成花环的酵母菌粘附形成花环 RBC C3bR RBC C3bR花环花环 同时 同时 红细胞膜上粘附的红细胞膜上粘附的ICIC中中C3bC3b分子或抗原补体复合分子或抗原补体复合 物中的物中的C3bC3b分子可与未致敏的酵母菌的酵母多糖分子可与未致敏的酵母菌的酵母多糖 粘附形成
15、花环 粘附形成花环 RBC ICRBC IC花环花环 n10 n n 意义 意义 RBC C3bRRBC C3bR花环率和花环率和RBC ICRBC IC花环率可作为红细胞天花环率可作为红细胞天 然免疫粘附功能的指标 然免疫粘附功能的指标 1 1 若两项指标都低下 判为原发性红细胞免疫功能低下 若两项指标都低下 判为原发性红细胞免疫功能低下 为红细胞膜 为红细胞膜C3bC3b受体受到破坏或遗传基因缺陷及其他影受体受到破坏或遗传基因缺陷及其他影 响所致 响所致 2 2 若 若RBC C3bRRBC C3bR花环率降低 而花环率降低 而RBC ICRBC IC花环率增高 则花环率增高 则 为继发性
16、红细胞免疫功能低下 是由于红细胞为继发性红细胞免疫功能低下 是由于红细胞CR1CR1上免疫上免疫 复合物或补体调理的抗原量增加所致 复合物或补体调理的抗原量增加所致 3 3 若这两项指标都上升 判断为红细胞天然免疫功能亢 若这两项指标都上升 判断为红细胞天然免疫功能亢 进与紊乱 进与紊乱 n11 4 2 4 2 红细胞红细胞CR1CR1数量的测定数量的测定 4 2 1 4 2 1 红细胞红细胞CR1CR1密度相关基因多态性测定方法密度相关基因多态性测定方法 DNADNA提取提取 PCRPCR扩增扩增 限制性片段长度多态性酶切分析 限制性片段长度多态性酶切分析 RFLPRFLP分析 分析 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳 n12 4 2 2 4 2 2 红细胞红细胞CR1CR1流式细胞仪测定方法流式细胞仪测定方法 n n 原理 单个红细胞原理 单个红细胞CR1CR1数量比白细胞数量比白细胞CR1CR1低 为低 为 了提高试验的敏感度 采用间接免疫荧光染色了提高试验的敏感度 采用间接免疫荧光染色 法流式细胞仪检测技术 用鼠抗人红细胞法流式细胞仪检测技术 用鼠抗人红细胞CR1CR1单单 抗与一定
