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1、1 2 是一切肉眼看不见或看不清楚的微 小生物的总称 一 微生物 3 微生物 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 是一切肉眼看不见或看不清楚的微 小生物的总称 一 微生物 1 分类 特点 小 简 低 4 病 毒 的 结 构 2 病毒 5 病 毒 6 SARS冠状病毒 禽流感病毒 7 朊病毒 蛋白质病毒 8 病毒的增殖 9 细菌的外形与大小 3 细菌 A 球菌 B 杆菌 C 弧菌 常见的细菌三种典型形态 ABC 10 细菌的结构 11 芽孢 细菌形成的椭圆形的休眠体 12 芽孢的壁很厚 对干旱 低温 高温 等恶劣的环境有很强的抵抗力 芽孢又小又轻 可以随风飘散 当环境适宜 如温度 水分适宜 的
2、时候 芽孢又可以萌发 形成一个细菌 13 异养菌 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不 同 将细菌分为两大营养类型 自养菌 光能自养型 光合细菌 化能自养型 硝化细菌 铁细菌 硫细菌 14 菌 落 单个或少数细菌在固体培养基上大 量繁殖时 就会形成一个肉眼可见的 具有一定形态结构的子细胞群体 叫做 菌落 菌落是鉴定菌种的 重要依据 15 4 放线菌 结构 单细胞原核生物 分支状的菌丝 基内菌丝 气生菌丝 16 2 繁殖 孢 子 丝 孢 子 17 链霉素 土霉素 四环素 氯霉素 红霉素 庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素 其 中2 3是由放线菌产生的 应
3、用 18 5 真菌 19 酵母菌 酵母菌和霉菌 青霉 20 生 殖 腐生生活孢子生殖 21 微生物的实验室 培养条件 1 合适的营养和环境条件 2 确保其他微生物无法混入 一 培养基 1 概念 按照微生物对营养物质的不同需求 配制出 供其生长繁殖的营养基质 22 固体培养基 菌落 23 液体培养基 表面生长均匀混浊生长沉淀生长 24 半固体培养基 25 2 种类 按物理形态分 液体培养基 增菌 工业生产 固体培养基 半固体培养基 应用微生物纯化 分离 鉴定 计数和 菌种保存等方面 按照培养基用途分 选择性培养基 鉴别培养基 按照培养基的成分来分 合成培养基 天然培养基 半合成培养基 26 3
4、成分 思考 各种培养基的具体配方不同 但一般都包括哪些成分 水 无机盐 碳源 氮源 生长因子 满足微生物对pH 特殊营养物质 氧气的要求 C 27 碳源 如CO2和糖类 脂肪酸等有机物 构成微生物的结构物质和分泌物 自养 微生物需无机碳 异氧微生物需有机碳 还能提供能量 氮源 如N2 氨盐 硝酸盐和牛肉膏 蛋白胨等 主要用来合成蛋白质 核酸 及含氮代谢物等 无机氮源可为硝化细 菌提供能量 含有C H O N的化合物既可以作为 碳源 又可以作为氮源 如氨基酸等 28 C 29 二 无菌技术 思考 1 什么是无菌技术 包括哪些方面 2 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微 生物污染外 还
5、有什么目的 P15旁栏思考 3 消毒和灭菌有何不同 4 常用的消毒和灭菌方法有哪些 无菌技术 泛指培养微生物操作中 所有防 止杂菌污染的方法 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染 30 芽孢的壁很厚 对干旱 低温 高温 等恶劣的环境有很强的抵抗力 芽孢又小又轻 可以随风飘散 当环境适宜 如温度 水分适宜 的 时候 芽孢又可以萌发 形成一个细菌 31 3 常用的消毒方法 煮沸消毒法 巴氏消毒法 紫外线或化学药剂消毒法 常用的灭菌方法 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 100kPa 121 15 30min 判断下列各项是否需要消毒或灭菌 如需要 选择合适方法 1 豆浆 2 游泳池 3 超净
6、工作台 4 玻棒 试管 吸管 锥形瓶 5 培养细菌用的培养皿 6 无菌水 7 牛肉膏蛋白胨培养基 8 接种环 接种针 9 实验操作者的双手 牛奶 接种室 接种箱或超净工作台 接种工具 接种环 接种针或其他金属用具 玻璃器皿 吸管 培养皿 32 三 实验操作 大肠杆菌的纯化培养 一 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 二 纯化大肠杆菌 最常用的接种方法有 平板划线法和稀释涂布平板法 冷却至50 33 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行 结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求 想 一想 第2步应如何进行无菌操作 应从操作的各个细节保证 无菌 例如 酒精灯与培养皿的距离要合适
7、 吸管头不要 接触任何其他物体 吸管要在酒精灯火焰周围 等等 34 菌种的保存菌种的保存 1 临时保藏法 对象 温度 缺点 2 甘油管藏法 对象 温度 结果分析与评价 课题延伸 P20 频繁使用的菌种 4 冰箱 容易被污染或 产生变异 长期保存的菌种 20 冷冻箱 35 36 接种环 接种针 37 倒平板 讨论1 2 讨论3 4 38 平板划线法 讨 论 2 3 39 1 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼 烧接种环 在划线操作结束时 仍然需要灼烧接种 环吗 为什么 操作的第一步灼烧接种环 每次划线前灼烧接种环 划线结束后灼烧接种环 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 杀死上次划线
8、结束后 接种环上残留的菌种 使 下一次划线时 接种环上的菌种直接来源于上次划线 的末端 从而通过划线次数的增加 使每次划线时菌 种的数目逐渐减少 以便得到菌落 及时杀死接种环上残留的菌种 避免细菌污染环境和感染操作者 40 2 在灼烧接种环之后 为什么要等其冷却后再进行划线 3 在作第二次以及其后的划线操作时 为什么总是从上一 次划线的末端开始划线 以免接种环温度太高 杀死菌种 划线后 线条末端细菌的数目比线条起始处要少 每次从上一次划线的末端开始 能使细菌的数 目随着划线次数的增加而逐步减少 最终能得到由 单个细菌繁殖而来的菌落 41 涂布器 42 1 培养基灭菌后 需要冷却到50 左右时
9、才能 用来倒平板 你用什么办法来估计培养基的温度 2 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰 提示 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶 感觉 锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时 就可以进行 倒平板了 通过灼烧灭菌 防止瓶口的微生物污染培养基 43 3 平板冷凝后 为什么要将平板倒置 4 在倒平板的过程中 如果不小心将培养基溅在 皿盖与皿底之间的部位 这个平板还能用来培养 微生物吗 为什么 平板冷凝后 皿盖上会凝结水珠 凝固后的培养基 表面的湿度也比较高 将平板倒置 既可以使培养基表面的水分更好地挥 发 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基 造成污染 不要 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 44 选择培养基 不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物 加入四环素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 不加氨基嘌呤 次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基 分离杂交瘤细胞 加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色葡萄球菌 45 46
