《抗体类型与特点基础知识ppt课件.pptx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《抗体类型与特点基础知识ppt课件.pptx（29页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、抗体类型及特点 抗体 antybody Ab 具有抗体活性的血清蛋白称为免疫球蛋白 是由机体的 B淋巴细胞在抗原的刺激下分化 分裂而成的一组特殊球蛋白 类型 免疫球蛋白G IgG 免疫球蛋白M IgM 免疫球蛋白A IgA 免疫球蛋白D IgD 免疫球蛋白E IgE 1 抗体 2 2 抗体结构 决定簇互补区 complementarity determining region CDR 骨架区framework region 糖基化 位点CHO 补体结合位点 轻链light chain L 重链heavy chain H 可变区variable region V 恒定区constant regi
2、on C 3 2 抗体结构 抗体与抗原表位结合高变区 HVR 示意 图 G表示相对保守的甘氨酸 4 3 抗体种类 3 1 第一代抗体 多克隆抗体 polyclonal Ab 3 2 第二代抗体 单克隆抗体 monoclonal Ab 3 3 第三代抗体 基因工程抗体抗体 genentic engineering Ab 5 多克隆抗体 polyclonal antibody 当将抗原注射入实验动物体内时 一系列抗 体生成细胞会不同程度的与抗原结合 受抗 原刺激后在血液中产生不同类型的抗体 这 种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗 体 3 1 第一代抗体 6 优点 来源广泛 制备容易 3 1 第
3、一代抗体 缺点 特异性不高 容易发生交叉反应 不宜大量制备 应用 疾病的被动免疫治疗 实验室免疫学实验 7 3 2 第二代抗体 单克隆抗体 monoclonal antibody 是由单一B细胞克隆产生的高度均一 仅针对某一特 定抗原表位的抗体 称为单克隆抗体 通常采用杂交瘤技术来制备 杂交瘤 hybridoma 抗 体技术是在细胞融合技术的基础上 将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖 能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤 8 3 2 第二代抗体 优点 纯度高 特异性强 效价高 少或无血清交叉反应 缺点 作为药物可导致人抗鼠 兔 抗体反应 应用 疾病诊断 被动免疫 生物导向药 9
4、3 3 第三代抗体 基因工程抗体抗体 基因工程抗体 genetic engineering antibody 将制备 单抗的细胞工程技术与生产重组分 子的基因工程技术和蛋白质工程技 术结合起来 对编码抗体的基因按 不同需要进行加工改造和重新组装 转染适当的受体细胞后表达出抗 体分子 这种经基因重组的抗体称 为基因工程抗体 10 3 3 第三代抗体 基因工程抗体抗体 嵌合抗体 chimeric Ab 小分子抗体 mini molecular Ab 双特异性抗体bispecific Ab 抗体偶联物Ab conjugate 抗体融合蛋白Ab fusion protein 基因工程抗体抗体种类 11
5、 3 3 1 基因工程抗体抗体 嵌合抗体 特点 其具有鼠源抗体结合抗原 的特异性和亲和力 同时降低了 鼠源抗体对人体的免疫原性 嵌合抗体 chimeric atibody 是利 用DNA重组技术 将异源单抗的轻 重链 可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达 载体中 转化哺乳动物细胞表达出嵌合抗 体 这样表达的抗体分子中轻重链的V区 是异源的 而C区是人源的 这样整个抗 体分子的近2 3部分都是人源的 12 3 3 2 基因工程抗体抗体 小分子抗体 种类 Fab抗体 Fab fragment Fv片段 Fv fragment 单链抗体single chain Variable fragment S
6、cFv 小分子抗体 分质量较小的具有抗原结合功能的分子片段 13 3 3 2 基因工程抗体抗体 小分子抗体 小分子抗体特点 1 可原核表达 制备简单 成本低 2 分质量小 易于穿透组织屏障 进入病灶部位 3 不与Fc受体结合 更能集中到靶部位 4 体内半衰期短 利于体内毒性物质的清除和降 低放射免疫显像的本底 5 可与多种药物及放射性同位素偶联 6 免疫原性低 14 3 3 2 基因工程抗体抗体 小分子抗体 小分子抗体的制备 酶消化法 细菌表达 常用 酵母表达 哺乳动物细胞表达 昆虫细胞表达 植物细胞表达 15 3 3 2 小分子抗体 Fab抗体 Fab抗体 由一条完整的轻链和重链 Fd 段通
7、过一个链间二硫键连接组成一个异二聚体 特点 保持了天然抗体Fv片段 结构稳定 出现最早 研究彻底 多用于抗体偶联物 16 3 3 2 小分子抗体 Fab抗体 Fab 抗体分子的制备 免疫球蛋白 基因载体的构建 L链表达载体 H链表达载体 共转染细胞 P VH CH1 P VL CL 抗体分泌细胞 Fab 抗体分子 CH1 VH VL S S CL 抗体纯化 17 3 3 2 小分子抗体 ScFv抗体 ScFv抗体 由抗体轻 重链可变区基因拼接后表达形成的重组蛋白 分子量只有完整分子1 6 特点 是具有完整抗原结合部位的最小片段 能微生物发酵生产 对实体瘤穿透力强 是用作 生物 导弹 理想的材料
8、 用它研制双功能抗体 催化抗体 免疫毒素 抗体融合蛋白具有广 泛的应用前景 18 3 3 2 小分子抗体 ScFv抗体 PCR 酶切 克隆 ScFv的构建 变性 复性 VH引物 VL引物 接头DNA VL VH VH VL 表达载体 ScFv抗体基因的构建一般采用从杂交瘤细 胞提取mRNA 反转录成cDNA 通过PCR 扩增其VL及VH基因 再用人工合成的寡核 苷酸序列即接头把VL的C端与VH的N端或 VH的C端与VL的N端连接 即成单链抗体 基因 19 3 3 2 小分子抗体 Fv片段 Fv片段 由 VH和VL组 成 是 抗 体 的 抗 原 结 合部位 分子量只有 完整分子1 6 特点 与S
9、cFv相同 20 3 3 2 基因工程抗体抗体 双特异性抗体 双特异性抗体 是含有 2 种特异性抗原结合位点的人工抗体 特点 一个位点可与靶细胞表面抗原结 合 另一个位点则可与载荷物如毒素 酶 细胞因子 放射毒素等耦合 能在 靶细胞和功能分子 细胞 之间架起桥 梁 激发具有导向性的免疫反应 21 3 3 2 基因工程抗体抗体 双特异性抗体 双特异性抗体代表类型及结构 22 3 3 2 基因工程抗体抗体 双特异性抗体 双特异性抗体代表类型及结构 23 3 3 2 基因工程抗体抗体 双特异性抗体 双特异性抗体的应用 免疫诊断 肿瘤放射显影 肿瘤药物杀伤 肿瘤的免疫杀伤 24 3 3 3 基因工程抗体抗体 抗体偶联物 抗体偶联物 为提高药物作用的特异性 将抗体与 弹头 药物偶联在一起 25 3 3 3 基因工程抗体抗体 抗体偶联物 26 3 3 4 基因工程抗体抗体 抗体融合蛋白 抗体融合蛋白 将抗体与其他效应蛋白基因融合 构建融合表达 载体 然后再合适的表达系统生产的融合蛋白 种类 重组免疫毒素 抗体 酶 抗体 细胞因子 抗体 超抗原 免疫粘连素 抗体分子 效应蛋白 27 谢谢 此课件下载可自行编辑修改 供参考 感谢您的支持 我们努力做得更好
