中华芦荟多糖对小鼠急性肝损伤保护作用

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1、1中华芦荟多糖对小鼠急性肝损伤保护作用【摘要】 目的 研究中华芦荟多糖(AP)对急性肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 选用昆明种小鼠,179,358,717mg/(kgbw)3种剂量中华芦荟多糖分别灌胃给药,用四氯化碳(CCl4)造成急性肝损伤,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA) 含量。结果 3 种剂量的中华芦荟多糖均能显著地降低小鼠血清 ALT 和AST 活性,提高小鼠肝脏 SOD 活性,降低肝脏 MDA 含量。结论 中华芦荟多糖能够对由四氯化碳(CCl4)所造成的急性肝脏损伤起保护作用,其机制与提高

2、小鼠的抗氧化能力有关。 【关键词】 中华芦荟多糖中华芦荟多糖(AP)是中华芦荟中重要的生物活性成分,具有免疫调节功能、促进血细胞生成、抗癌、抗真菌、抗病毒和抗辐射损伤等作用。但目前总体上对芦荟多糖的研究无论在化学结构还是药理活性方面均较少1 。四氯化碳(CCl4)作为一种趋肝毒物,经代谢产生 CCl4 自由基,作用于肝细胞并和膜上的不饱和脂质共价结合,使脂质过氧化,引起肝细胞坏死,导致肝脏的急性损伤。本文利用 CCl4 小鼠急性肝损伤模型,研究中华芦荟多糖对急性肝损伤的保护作用及其机制。21 材料与方法11 材料 提取中华芦荟多糖2( 批号:20040711 ,经测定含量达 9932);四氯化

3、碳(CCl4)( 进口分装,湖北大学化工厂);昆明种小鼠(广州九佛实验动物厂);丙氨酸氨基转移酶(ALT) 试剂盒(上海申能生物技术有限公司,批号为 050408)。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒(上海申能生物技术有限公司,批号为 050814)。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测试剂盒( 南京建成生物工程研究所)。12 方法 取昆明种小鼠 72 只,雌雄各半,称重,随机分为正常对照组、模型(CCl4)对照组、联苯双酯阳性对照组;另按179,358 ,717mg/(kgbw) 的给药剂量设 AP 高、中、低剂量组,每组小鼠 12 只。第 15d ,联苯双酯阳性对照组、中华芦荟

4、多糖高、中、低剂量组每日灌胃给药 1 次,正常对照组与模型对照组灌胃给予等体积的饮用水。第 5d 给药后 1h,除正常对照组皮下注射等体积生理盐水外,其他各组皮下注射 05 CCl4 花生油,10ml/(kgbw)皮下注射 CCl4 后禁食 24h,再给药或饮用水 1 次;1h 后断头取血,离心,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT) 和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力。采血后,立即取出肝脏,用滤纸吸干,称重,然后制备 10的匀浆液,5000r/min 离心 25min(04),3取上清液,在 14的冰箱保存,以测 SOD 活性及 MDA 含量。13 统计分析 采用 SPSS100 软件进行显

5、著性 t 检验。2 结果21 对血清转氨酶的影响 中华芦荟多糖对 CCl4 诱导的急性肝损伤小鼠血清中 ALT、AST 的影响,见表 1。表 1 AP 对 CCl4 诱导的小鼠急性肝损伤血清中 ALT 和 AST的影响(略)注:与模型对照组比较,* P005,* P001;n=12小鼠皮下注射 CCl4 诱导后 24h,模型对照组小鼠血清中ALT 和 AST 水平明显高于正常对照组。中华芦荟多糖各剂量组与联苯双酯阳性对照组血清中 ALT 和 AST 活力明显低于模型对照组,中华芦荟多糖可明显对抗 CCl4 诱导 ALT 和 AST 的升高,并呈现较好的量效关系。22 对肝脏 SOD 和 MDA

6、 的影响 中华芦荟多糖对 CCl4 诱导的急性肝损伤小鼠肝脏中 SOD 和 MDA 的影响。小鼠皮下注射4CCl4 诱导后 24h,模型对照组小鼠肝脏中 SOD 活性明显低于正常对照组,MDA 含量明显高于正常对照组水平。中华芦荟多糖各剂量组与联苯双酯阳性对照组可明显升高 SOD 活性,并使肝脏中MDA 水平明显低于模型对照组,见表 2。表 2 AP 对 CCl4 诱导的小鼠急性肝损伤肝脏 SOD 和 MDA的影响(略)注:与模型对照组比较,* P005,* P001;gww 表示每克肝组织湿重;n=123 讨论芦荟含有多种有效成分,芦荟水溶液在体外能够清除超氧阴离子,阻断自由基链式反应,具有

7、与 SOD 相同的效果3 。芦荟多糖作为芦荟的主要有效成分之一,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等作用。库拉索芦荟多糖的体外研究表明,芦荟多糖具有较高的清除超氧阴离子自由基和 H2O2 的能力4 ,并且能够降低大鼠内毒素所诱导的高脂质过氧化水平,且作用效果相当于公认的氧自由基清除剂维生素 E5 。本实验结果表明,中华芦荟多糖对 CCl4 所致的小鼠血清 ALT、AST 活性升高有明显的降低作用,并能使肝脏的 SOD活性显著升高,脂质过氧化产物 MDA 含量显著降低,量效关系明5显。提示中华芦荟多糖能够通过提高抗氧化酶活性,清除自由基,进而抑制细胞脂质过氧化、稳定肝细胞膜的结构,达到对 CCl4 所诱发的

8、急性肝损伤的保护作用。【参考文献】1 孔祥荣,王宗伟 .芦荟多糖化学结构与生物活性J.国外医药:植物药分册,2003,18(1):7-12.2 杨安平,王宗伟,江国森. 中华芦荟多糖提取和测定方法研究J.九江医学,2002,17(4):190-191.3 任岱,王一凡,姚银秀,等.芦荟对超氧阴离子自由基链式反应的影响J.中国现代医学杂志,1999,(9)6:22-24.4 吴广枫,汤坚. 芦荟多糖的纯化与体外抗氧化活性的研究J. 郑州工程学院学报,2002,2(32):75-78.5 王莉,包旭,岑小波,等. 巴巴多斯芦荟多糖对内毒素化大鼠和正常高龄大鼠血清及肝组织过氧化脂质的影响J.华西药学杂志,2002,17(1):21-22.6

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