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1、 人类胚胎基因编辑技术发向的讨论人类胚胎基因编辑技术发展与思考武汉大学人民医院生殖医学中心湖北省辅助生殖与胚胎发育临床研究中心杨著-【二】二朐耒暴殿嗜隗3史儿省人民智肌目录|CONTENTS编辑囤发展与应田飞争议与思考皿改进与前3基因编辑墓因乡扁车冒-指基因组的位点特异性修饰。其基于位点特异性可编程核戛酶,诱(DSBs),触发DNA修复机制,包括非同源未端途接(NHEJ)和同源重组(HR),L的遗传修饰,例如基因破坏,插入和修正。定点随机交异aTE匕/定点非隔机交异,5TmmmryTTT定点描入=HTUELTITTTL丽炳断裂:人人少标$-m0定点片段晴振11EFigure1.基因缉辑原理示意
2、图Figure2.人类种系基因组编睿:(A)胚胎基因组编轼将校蜂酶星傍注射刹受精印(单纱胞期眨胎)中,通过植入前遗传学识晚(PGD)或滋养外胚层活忽来研究粑基因修作和脱靶突发。(8)卵母纸胞编辑(C)精原干纱胞编辑胚胎基因编辑AEmboyonicgenomeediingeeoesenaleoseienynR广758国1wnca1u一一一一B口【DoowOorgepomeReroneEarpesdnpeeEbn仪wrsca一t一50ooeedingCSpemstcooralsemgecucceenye一一1ceeE*一基因编辑技术:(1)特异性DNA译8基(GPS)(2)非特异性的校戛内认酷(副
3、刀)(3)细胞内天然存在的DNA双链断裂修复机制(针线)铷指核酸酸RNAS吏的CRISPRICas枫蚊略sn程,Figure3.基因编辐技术的分类Zinc-fngermotifconsensusCXa4CXaFLX2HXaMH5E喙h凸Spacer:5-7bpLeftZFP“GPS(DNAIRBI域):由东3Jcye2-his白(Znc.Fingers)毙联练戏(一航3-47DNAb吒昙砂域每个铬指畜自(大约30个氧基酸)识别年结合1个特异的井联创“削刀“是一积限制忠内办酬Fok,在一冥仰状志下其有酶扬泓Figure3a.锌指核糖核酸醇ZFN的组成及原理第二代基因编辑技术类转录激活回子效应物核
4、酸酶(TranscriptionActivator-likeEffectorNucleaseRVDLTPEQVVAIASHDGGKQALETVQRLLPVLCQAHG魇型的LEN:LeftTALE由一个包含核定余信号(CNLS)的N诚结怀域、一个包吾可识别牺定DNA序加的奉型串联TNLE重复序刑的中央结杰域,以及5一个具有Fokt栗酸内办酶:功能的C谋结构域组成目Spacer:12-21bp“Gps“是画一系列TALE畔白单联纯古的DNA识别垦,每个TALE础白(大约34个氢莲“刍刀*也春俭用同样的Fok;TALEN比ZFN主要的提异:(1)从史对3变妓了1对f,精确性描高;2)TALE蛎白可以坤容易的自由组司,Figure3b.TALEN的组成及原理