《MMP-2、TIMP-2在口腔鳞状细胞癌中表达的临床病理研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《MMP-2、TIMP-2在口腔鳞状细胞癌中表达的临床病理研究（11页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1MMP-2、TIMP-2 在口腔鳞状细胞癌中表达的临床病理研究【摘要 】 目的研究口腔鳞状细胞癌（ OSCC）组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2） ，基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）的表达。 方法采用免疫组化 SP 法检测 60 例OSCC、35 例非典型增生、20 例正常口腔黏膜中 MMP-2、TIMP-2 的表达情况。 结果 OSCC 中 MMP-2、TIMP-2 的表达均高于非典型增生组（P0.05 ） ，在非典型增生组中表达高于正常口腔黏膜组（P0.05） 。 MMP-2 的表达与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移密切相关（P0.05） 。TIMP-2 与肿瘤的淋巴结转移密
2、切相关（P0.05） 。淋巴结转移组中 MMP-2/ TIMP-2 比值显著高于无淋巴结转移组（P0.05 ） 。 结论 MMP-2、TIMP-2 是OSCC 转移的重要生物学标志，MMP-2/TIMP-2 比值对评估淋巴结转移的潜能有重要意义。 【关键词】 口腔鳞状细胞癌 免疫组织化学 基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶组织抑制因子-22Expression of Matrix Metalloprateinase-2(MMP-2) and Tissue Inhibitors of Metalloproteinase-2(TIMP-2) in Oral Squamous Cell Carcion
3、omaAbstract: Purpose To study the expression of matrix metalloprateinase-2 (MMP2) and tissue inhibitors of metalloproteinase-2(TIMP-2) in oral squamous cell carcinoma (OSCC). Methods The expression of MMP-2 and TIMP-2 were examined by immunohistochemistry SP method in 20 cases with normal oral mucos
4、a, 35 cases with atypical hyperlasia and 60 cases with oral squamous cell carcinoma.Results The expressions of MMP-2 and TIMP-2 in OSCC were significantly higher than those in atypical hyperlasia（P0.05）. The expressions of MMP-2 and TIMP-2 in atypical hyperlasia were significantly higher than those
5、in oral mucosa（P0.05）. MMP-2 expression in OSCC significantly associated with lymph node metastasis and cellular differentiation（P0.05）. TIMP-2 in OSCC significantly associated with lymph node metastasis（P0.05 ）. MMP-2/TIMP-2 in OSCC with lymph node metastasis was significantly higher than that in n
6、o lymph node metastasis（P45 岁 26 例，平均年龄48.01 岁；肿瘤最大直径 3cm 者 27 例，3cm 者 33 例；有淋巴结转移者 34 例，无淋巴结转移者 26 例；肿瘤分期根据 UICC 标准 TNM 分期，期 22 例，期 21 例，+期 17 例；按鳞癌病理分级法，其中高分化鳞癌 19 例，中分化鳞癌 24 例，低分化鳞癌17 例。口腔非典型增生病例 35 例，来自其他口腔疾病手术标本。正常口腔黏膜 20 例，取自口腔门诊活检标本，均未做过任何治疗。1.2 主要试剂鼠抗人 MMP-2、TIMP-2 单克隆抗体，免疫组化 SP 试剂盒及DAB 显色试剂
7、盒均购自北京中山生物技术有限公司。51.3 实验方法所有组织均经 10%甲醛固定，常规石蜡包埋， 包埋组织标本作4m 连续切片，分别做 HE 染色和免疫组化染色。免疫组化 SP 法染色参照试剂说明书进行，MMP-2、TIMP-2 均采用高温直接煮沸法修复抗原。用已知的阳性切片作阳性对照，PBS 代替一抗作阴性对照。1.4 结果判定MMP-2、TIMP-2 均以实质细胞胞膜或胞质出现明显的黄色或棕黄色颗粒判断为阳性着色。定量及图像分析采用同济医大千屏影像公司 HPLAS-1000 病理图像分析系统,将切片上的阳性染色信号转为灰度进行分析。1.5 统计学处理运用 SPSS 10.0 统计软件包进行
8、统计分析，计量资料统计中多组之间使用方差分析以及 q 检验，两组之间使用 t 检验。2 结 果62.1 MMP-2、TIMP-2 在正常口腔黏膜组织、非典型增生、口腔鳞状细胞癌中的表达和分布MMP-2 的阳性表达主要位于肿瘤细胞，增生上皮细胞、肿瘤间质中的纤维母细胞和微血管内皮细胞的胞膜、胞浆中，偶尔可见细胞核着色，阳性细胞呈片状、灶状或散在分布（图 1、2 ） 。MMP-2在正常口腔黏膜中亦有表达。表 1 显示从正常口腔黏膜、非典型增生到口腔鳞状细胞癌，MMP-2 的净灰度值逐渐增高，OSCC 组中MMP-2 的净灰度值为 76.2129.65，显著高于非典型增生（42.6919.26，P0
9、.05） ，在非典型增生的净灰度值显著高于正常口腔黏膜的 17.568.02（P0.05 ） 。TIMP-2 的阳性表达主要位于肿瘤细胞和增生上皮细胞的胞膜和胞浆中，呈异质性分布，阳性表达亦可见于少数间质细胞（图 3） 。TIMP-2 在正常口腔黏膜组中表达微弱，从正常口腔黏膜、非典型增生到 OSCC，TIMP-2 的净灰度值逐渐增高，OSCC 组中 TIMP-2的净灰度值为 51.0422.81，显著高于非典型增生（37.4113.85，P0.05） ，在非典型增生的净灰度值显著高于正常口腔黏膜的 15.978.51（P0.05 ） 。OSCC 中 MMP-2/TIMP-2 比值显著高于非典
10、型增生与正常口腔黏膜（P0.05） 。72.2 MMP-2、TIMP-2 表达与 OSCC 临床病理参数间关系MMP-2 的表达与肿瘤淋巴结转移显著相关，在淋巴结转移组中MMP-2 的净灰度值（87.5635.91）显著高于非淋巴结转移组（62.0929.87，P0.05） 。随着肿瘤分化程度的降低，MMP-2的表达增高，中、低分化组 MMP-2 的净灰度值显著高于高分化组（P0.05） 。TIMP-2 在淋巴结转移组中的净灰度值（57.6429.51）显著高于无淋巴结转移组（40.2619.94，P0.05） 。在 OSCC 淋巴结转移组中，MMP-2/TIMP-2 比值显著高于无淋巴结转移
11、组（P0.05） 。3 讨 论8细胞外基质与基底膜的降解是肿瘤向邻近组织浸润进而向远处转移的必要步骤。MMPs 是诱导 ECM 降解最重要的酶类，目前已明确的人类 MMPs 有 20 余种，根据其作用底物的不同分为四类：间质胶原酶、明胶酶、间质溶解素、膜型金属蛋白酶（membrane-type metalloprateinase，MT-MMP ） 。其中明胶酶包括 MMP-2、MMP-9，分子量分别为 72kD、92kD，主要底物有明胶、型底膜胶原。TIMPs 是 MMPs 的专一抑制剂可以通过结合MMPs 的活性部位，影响 MMPs 分子对基底物的结合而实现其抑制作用，这种结合是以非共价键方
12、式，而且不可逆转1，2 。目前已发现 4 种 TIMP，分别命名为 TIMP14，其中 TIMP-2 是分子量为 21kD 的糖蛋白，它可与 MMP-1、MMP-2 和 MMP-3 呈 1:1 结合，其中对 MMP-2 的抑制作用较 TIMP-1 强 710 倍以上，而对MMP-1 的抑制作用较 TIMP-1 弱， TIMP-2 除能与活性 MMP-2结合抑制其活性外，还能以非共价键与明胶酶原结合，从而抑制明胶酶原的活化，与明胶酶原结合的 TIMP-2 仍能抑制 MMP-2 的活性3。我们用免疫组化 SP 法检测了 60 例 OSCC，35 例非典型增生，20 例正常口腔黏膜中 MMP-2 蛋白的表达，从正常口腔黏膜、非典型增生到 OSCC，MMP-2 的表达逐渐增高，MMP-2
