《Bcl┐2及Bag┐1基因产物在肾癌组织中的表达及意义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Bcl┐2及Bag┐1基因产物在肾癌组织中的表达及意义（9页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1Bcl2 及 Bag1 基因产物在肾癌组织中的表达及意义作者：于磊，袁建林，武国军，康福霞，王栋 【关键词】基因 关键词 :基因，Bcl-2;Bag-1;肾肿瘤;免疫组织化学;基因表达 摘要 :目的讨论基因 Bcl-2 和 Bag-1 在肾癌组织中的表达及相互关系，了解肿瘤增殖与凋亡的特点.方法采用免疫组化 SABC 法对 41例肾癌与 10 例正常肾组织的石蜡标本切片对照，进行产物表达的统计研究.结果 Bcl-2 在肾癌组织中阳性表达率为 75.6%，与正常肾组织 30.0%相比，有显著性差异（P0.05）.Bag-1 在肾癌组织中表达率为 61.0%，正常肾组织 10.0%表达.Bag-
2、1 与肿瘤分级、分期及预后密切相关（P0.05 ） ，随肾癌恶性程度增加，其表达强度也增加.Bcl-2 与 Bag-1 的表达正相关（r=0.438）.结论肾癌组织中 Bag-1 表达可作为预后指标;Bcl-2 可能参与肾组织由良性向恶性转化的过程，但与癌细胞恶性分化程度无关. Keywords:genes，Bcl-2;Bag-1;kidneyneoplasms;immuno-histochemistry;geneexpression 2Abstract:AIMToinvestigateBcl-2andBag-1expressionsinrenalcellcarcinomasandtoeval
3、uatetheirclinicalsignificance.METHODSBcl-2andBag-1expressionswerestud-iedwithimmunohistochemstryStreptavidin-Biotin-PeroxidaseComplex（SABC）methodsin41samplesofrenalcarcinomatissuesandin10normalrenaltissues，andtheirclinicalsig-nificancewereanalysed.RESULTSThepositiverateofBcl-2expressionintherenalcar
4、cinomatissueswas75.6%，whileitwas30.0%inthenormalrenaltissues（P0.05）.Ac-cordingly，thepositiverateofBag-1expressioninthecarci-nomatissueswas61.0%，itwas10.0%inthenormaltissues（P0.05）.However，Bcl-2wasnotrelatedtothetumorgrade，clinicalstageandpathologicalcelltypes.Ontheotherhand，Bag-1waspositivelyrelated
5、tothetumorgrade，tumorstageandtheprognosisofthepatient（P0.05）.SignificantcorrelationwasnotedbetweenBcl-2andBag-1（r=0.438）.CONCLUSIONBag-1mightserveasaprognosticmakerfortherenalcellcarcinoma.Bcl-2mightbeinvolvedinthetrans-formationofbenigntomalignantprocessbutisnotrelatedtothede3greeofdifferentiationo
6、fthetumorcells. 0 引言 Bcl-2 与 Bag-1 都是细胞抗凋亡基因，在肾癌的发病及肾癌细胞逃避凋亡的过程中可能具有不可忽视的重要作用.我们用免疫组化方法控制 Bcl-2 和 Bag-1 在肾癌不同病理阶段的表达水平，与正常肾组织作对照，以了解 Bcl-2 与 Bag-1 表达的意义及相互关系 . 1 材料和方法 1.1 材料 1989/1997 手术切除的肾癌石蜡包埋组织块 41 例，均来自我院病理科存档标本，平均年龄 58.4（4677 ）岁.其中透明细胞癌 26 例，颗粒细胞癌 15 例. 按 WHO 病理分级:G1 期 5 例，G2 期 13 例，G3 期 23 例
7、.按 UICCTNM 分期:期 18 例，期 12例，期 8 例，期 2 例.所有病理均获随访 8mo5a，平均 5a 生存率为 70.7%.正常肾组织石蜡标本 10 例作对照. 1.2 方法兔抗人 Bcl-2 抗体购自美国 SantaCruz 公司，兔抗人 Bag-1 抗体由加拿大 Dr.H.BlissMurphy 癌症中心赠送，SABC免疫试剂盒购自武汉博士德公司.石蜡组织连续切片 5m厚，常规脱蜡至水.采用 SABC 法测定 Bcl-2 与 Bag-1 的表达.抗 Bcl-2 及4Bag-1 的工作浓度 150，生物素化单抗和 SABC 试剂的工作浓度均为 1100.石蜡切片经抗原修复后
8、，滴加 150抗 Bcl-2 或抗Bag-1 抗体，4过夜，次日滴加生物素化山羊抗兔 IgG 及 SABC试剂，DAB 显色，苏木精复染，以 PBS 代替一抗作阴性对照，以已知阳性反应片作阳性对照.Bcl-2 染色胞质棕黄色为阳性，Bag-1 胞质胞核棕黄色染色为阳性.在 1040 倍光镜下随机观察 5 个视野，计算其平均数，每个视野计数 100 个细胞.Bcl-2 阳性标准:阳性细胞占肿瘤细胞数50%为高表达（） .Bag-1 染色阳性细胞30% 为高表达（） . 统计学方法: 阳性表达率比较用 2检验，平均表达率比较采用 t 检验，Bcl-2 与 Bag-1 关系采用相关系数（ r）分析.
9、 2 结果 2.1Bcl2与 Bag1在肾癌组织中的表达 2.1.1Bcl-2 的表达 10 例正常组织中，阳性 3 例，阴性 7 例，阳性率 30.0%，阳性细胞多分布在肾小管上皮及肾小球壁层细胞 .41例肾癌组织中，阳性 31 例，阴性 10 例，阳性率 75.6%，Bcl-2 蛋白主要表达在癌细胞的胞质，呈棕黄色颗粒.肾癌组织中 Bcl-2 表达5明显高于正常组织，2 检验，二者有显著差异（P0.05） ，说明 Bcl-2的表达与肾癌细胞类型无明显相关（Fig1）.2.1.2Bag-1 的表达Bag-1 蛋白表达在癌细胞的胞质及核膜，呈棕黄色颗粒.Bag-1 在10 例正常组织中只有 1
10、 例阳性表达，阳性率为 10.0%，肾癌组织中的阳性表达有 25 例，占 61.0%，2 检验，二者有显著差异（P0.05） ，说明 Bag-1的表达与肾癌细胞类型无明显相关（Fig2）. 2.2Bcl2与 Bag1表达的意义 2.2.1WHO 病理分级 G1 期 5 例，G2 期 13 例，G3 期 23 例.Bcl-2 的阳性平均表达率进行每级之间的两两比较，用 t 检验，结果G1 与 G2:P0.05，G2 与 G3:P0.05，G1 与G3:P0.05.Bag-1 表达结果 G1 与 G2:P0.05，G2 与G3:P0.05，G1 与 G3:P0.05.Bag-1 表达结果各期之间P
11、0.05） ，Bag-1 与肾癌的预后密切相关（ P0.05） ，而且术后生存时间越长，Bag-1 的表达越低（Tab1）.2.3Bcl2 与Bag1表达的相互关系对 41 例肾癌标本中 Bcl-2 和 Bag-1 蛋白的平均阳性表达率进行相关系数分析，r=0.438，二者正相关（Fig3）. 说明肾癌的发病机制是由多因素调控的，其中 Bcl-2 与Bag-1 在肾癌的发生及发展过程中有相互促进作用. 7图 3 略 3 讨论 Bcl-2 是一种抗凋亡基因.主要通过抑制细胞凋亡而参与肿瘤的发病，与肿瘤的分级、分期及预后有关1，2 .但在肾癌的研究中其表达意义尚不能肯定.Hofmockel 等 3
12、测定 31 例肾癌组织Bcl-2 的表达情况，认为其表达与肿瘤的分期分级及预后无关.国内部分研究与其相符4 ，但也统计资料认为其表达对评价肾癌的恶性程度及分期等有意义.这可能是因为应用了不同的 mAb 和不同的免疫组织化学方法所致.我们发现，在各个病理分级及临床分期的肾癌组织中均有 Bcl-2 蛋白高表达，但 Bcl-2 的高表达与肿瘤的病理细胞类型、临床分期、病理分级及预后无明显相关性.说明 Bcl-2 可能参与了肾组织由良性向恶性转化的过程，但与恶性分化可能无关. Bag-1 在正常组织中几乎不表达，而在乳癌、肺癌、前列腺癌、肾癌、膀胱癌等中都有阳性表达5， 6. 本实验表明，Bag-1
13、在正常组织和肾癌组织中表达差异有显著性，但 Bag-1 阳性癌细胞在肿瘤组织中所占百分比较低，且正常组织几乎不表达.Bag-1 与肿瘤分级、分期及预后具有显著相关性，但与肾癌的病理细胞类型无明显相关性，在高级别、高期别及生存8期较短的病例中，其表达强度较高.说明 Bag-1 与肾癌的发生发展相关，且参与了肿瘤的恶性分化过程.Bag-1 的启动子区与 Bcl-2 具有高度同源性，Bag-1 蛋白的抗凋亡机制及途径与 Bcl-2 相近，可与Bcl-2 蛋白密切结合形成复合物，相互增强抗凋亡作用.我们对 41 例肾癌病理组织切片中 Bcl-2 与 Bag-1 的平均阳性表达率进行相关系数分析，r=0
14、.438 ，表明二者呈正相关. 该结果说明肿瘤的发生发展是由多基因调节的，其中抗凋亡基因 Bcl-2 与 Bag-1 之间又相互增强作用. 参考文献: 1QiaoW，HuJL ，WangJB.TheeffectofTGF1abouttheex-pressionofgastricadenocarcinomacellSGC-7901J.Di-siYunyiDaxueXuebao（JFourthMilMedUniv） ，1998;19（5）:539-540. 2FanYD，LiKZ ，ZhaoYT.Themorphologicaltransformofapoptosisinhumancholangiocarcinomacellsinducedbybcl-2mRNA-cl
