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1、探究 培养液中酵母菌 种群数量的变化 探究 培养液中酵母菌种群数量的变化 目的要求 1 学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2 实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3 注意样方法的应用 4 体会影响种群数量变化的因素 1 酵母菌的繁殖方式主要是 2 酵母菌的呼吸方式是 兼性厌氧 可进行有氧呼吸和无氧呼吸 回顾思考 出芽生殖 3 酵母菌的培养条件要注意那些问题 比如要用适宜的温度培养 调节好PH值 溶氧量的控制等 酿酒和做面包都需要酵母菌 这些酵母 菌可以用液体培养基 培养液 来培养 培 养液中酵母菌种群的增长情况 与发酵食品 的制作有密切关系 培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是 J 型
2、增长 由于 营养物质的消耗 有害代谢产物的积累 PH值的改变 种 群数量呈 S 型增长 探究 培养液中酵母菌种群数量的变化 问题 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的 温度会影响酵母菌的生长吗 营养成分会影响酵母菌的生 长吗 作出假设 根据前面所学的知识 针对这一问题作出假设 讨论探究思路 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液 试 管 血球计数板 2mm 2mm方格 滴管 显微镜等 都由老 师提供 在制订计划前 你需要思考以下问题 并与同学讨论 实验设计 将9支试管分成ABC三组 每组3支 A组为实验 组 装培养液10 mL 酵母菌母液0 1mL 环境温度 28 B组装培养液1
3、0 mL 酵母菌母液0 1mL 环 境温度5 与A组形成温度条件对照 C组不装培 养液 只装无菌水10mL 酵母菌母液0 1mL 环境温 度28 与A组形成营养条件对照 实验操作 1 配制无菌马铃薯培养液和酵母菌母液 2 预先设计分装 先每次用10mL刻度吸管吸取10mL培养液 到A组和B组试管 用另一支10mL刻度吸管吸取10mL无菌水 到C组试管 待分装完毕 每支试管加塞后把试管扎成捆后 然后用记号笔注明培养基的名称 组别 日期 3 用高压蒸汽灭菌锅灭菌 4 接种菌种 用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0 1mL酵 母菌母液 往每支试管中加入 注意滴加量不要太多 避免 初始菌数过多 5 培
4、养 将 A C试管置于 28 的恒温箱中培养 将 B试管 置于5 的恒温箱中培养 5 的恒温箱可由某些型号冰箱保 温室设定5 时代替 6 计数和记录 每天取样时间大体一致 每次每组按序号取 一支试管 计数过程中一定要遵守无菌操作规范 取样的吸管 要干净且分开使用 每次取样前要试管振荡摇匀 显微镜下进 行细胞计数后 立即将数据填到记录表格中 分析结果 得出结论 将所得数值用曲线图表示出来 分析实验结果是否支持你 所做的假设 酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈 S 型增长 但之后会下降 温度 营养成分会影 响酵母菌种群数量的变化 探究的结论 一 怎样进行酵母菌的计数 提示 对一支试管中的培
5、养液 可定为10ml 中的酵母菌逐个计数是非常困难的 可以采用 抽样检测的方法 先将盖玻片放在计数室上 用吸管吸取培养液 滴于盖玻片边缘 让培养 液自行渗入 多余培养液用滤纸吸去 稍待片 刻 待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部 将 计数板放在载物台的中央 计数一个小方格内 的酵母菌数 量 再以此为根据 估算试管中 的酵母菌总数 介绍 血球计数板的构造 1 血球计数板 是显微镜上的外挂物件 可用来测量 细胞 细菌等一些微小物体的长度 还有就是测量数 量 如单位体积细胞的数量 血球计数板是由一块比 普通载玻片厚的特制玻片制成的 玻片中有四条下凹 的槽 构成三个平台 中间的平台较宽 其中间又被 一短横
6、槽隔为两半 每半边上面 刻有一个方格网 化 放大后的方格网计数室 I H G F E D C B A 25 16 16 25 2 方格网的构成 方格网上刻有9个大方格 其中只有中间的一个大方格 为计数室 计数室通常有两种规格 一种是大方格内分 为16中格 每一中格又分为25小格 另一种是大方格 内分为25中格 每一中格又分为16小格 但是不管计 数室是哪一种构造 它们都有一个共同的特点 即每一 大方格都是由16 25 25 16 400个小方格组成 3 使用方法 将血球计数板用擦镜纸擦净 在中央的计数室上加 盖专用的盖玻片 将稀释后的酵母菌悬液 用吸管吸 取一滴置于盖玻片的边缘 使菌液缓缓渗入
7、 多余的 菌液用吸水纸吸取 稍待片刻 使酵母菌全部沉降到 血球计数室内 加盖盖玻片 5 单位换算 以1mm 1mm 为例 大方格的长和宽各为 1mm 深度为0 1mm 其体 积为0 1mm3 换算为1mL 1000 0 1 104即1mL是104 个0 1mm3 4 计数室的规格 计数室长 宽有 1mm 1mm 2mm 2mm 3mm 3mm等 深度均为0 1mm 如果使用规格为16格 25格的计数室 要 按对角方位 取左上 右上 左下 右下4个中 格 即100个小格 的酵母菌数 如果使用规格为25格 16格的计数室 除 了取其4个对角方位外 还需再数中央的一个中 格 即80个小方格 的酵母菌
8、数 五点取样法 出芽的酵母菌 芽体达到母细胞大小一半时 即 可作为两个菌体计算 6 如何计数呢 规格为25格 16格的计数室 五点取样法 7 盖玻片下的培养液厚度为0 1mm 请推算出将 一个小方格范围内的酵母菌数 换算成10ml培养液 中酵母菌总数的公式 每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式 以1mm 1mm为例 1 16格 25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数 ml 100小格内酵母细胞个数 100 400 104 稀释倍数 即 一小方格内酵母菌个数 4 106 稀释倍数 2 25格x16格的血球计数板计算公式 酵母细胞数 ml 80小格内酵母细胞个数 80 400 104 稀释倍数
9、即 一小方格内酵母菌个数 4 106 稀释倍数 课本中大方格的长和宽各为2mm 深度为0 1mm 其体积为0 4mm3 换算为1mL 1000 0 4 2 5 103 即1mL是 2 5 103个 0 4mm3 则 每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式 2mm 2mm 1 16格 25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数 ml 100小格内酵母细胞个数 100 400 2 5 103 稀释倍数 即 一小方格内酵母菌个数 106 稀释倍数 2 25格x16格的血球计数板计算公式 酵母细胞数 ml 80小格内酵母细胞个数 80 400 2 5 103 稀释倍数 即 一小方格内酵母菌个数 106 稀
10、释倍数 使酵母菌混合均匀 不需要 因不同时间取样已形成对照 需要 尽量减少误差 对每个样品计 数三次 取其平均值 二 从试管中吸出培养液进行计数之前 建 议你将试管轻轻振荡几次 这是为什么 三 本探究需要设置对照吗 如果需要 请讨论对照组应怎样设计和操作 如果 不需要 请说明理由 四 需要做重复实验吗 五 怎样记录结果 记录表怎样设计 只计数相邻两边及其顶角的 酵母细胞数 稀释培养液 稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数 以每 小方格内含有4 5个酵母细胞为宜 一般稀释10倍即可 八 血球计数板的清洁 血球计数板使用后 用自来水冲洗 切勿用硬物洗刷 洗 后自行晾干或用吹风机吹干 或用95 的乙醇
11、无水乙醇 丙酮 等有机溶剂脱水使其干燥 通过镜检观察每小格内是否残留菌体 或其他沉淀物 若不干净 则必须重复清洗直到干净为止 六 如果一个小方格内酵母菌过多 难以数清 应当 采取怎样的措施 七 对于压在小方格界线上 的酵母菌 应当怎样计数 表达和交流 1 向全班汇报本小组7天的数据 算 出每一天全班各组数据的平均值 根据平 均值重新画酵母菌种群数量的增长曲线 将这个增长曲线与本小组的曲线进行比较 分析其相似程度 并做出合理的解释 2 根据各组平均数据画出的增长曲线 有没有什么总趋势 如果有 作出说明 如果设计了无菌水的对照 也画出增长曲 线 3 影响酵母菌的种群数量增长的因素可 能是什么 除了本实验中温度 营养以外还包括 酵母菌菌种本身性质 接种时间 p 值 接种量 溶氧量等影响因素 此课件下载可自行编辑修改 供参考 感谢您的支持 我们努力做得更好
