动物生理学实验2

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1、动物生理学实验 动物医学系 伍 莉 实验一 动物生理学实验常用仪器 实验基本操作技术 PCLAB UE生物机能实验系统简介及使用 1 动物生理学实验的地位 本共27学时 属专业基础课程 成绩计算 报告及修改 红笔 60 笔试考试30 考勤10 2 动物生理学实验的目的 掌握基本实验方法 掌握主要仪器的操作方法 掌握生理实验基本技能 分析实验结果 写出规范的实验报告 3 动物生理学实验的要求 实验前 做好实验准备工作 实验中 学生领取器材 教师简要讲解实验 原理 关键步骤 实验要求等 实验后 归还实验用品 动物尸体按指定位 置放置 轮流打扫清洁卫生 转 录 整理实验结果 及时上交实验 报告 4

2、常用生理仪器的使用 4 1 刺激系统 刺激器 刺激电极 普通电极 保护电极 锌铜弓 4 2 引导 换能系统 血压换能器 主要用于血压和其他通过液体传导信 号的换能 张力换能器 主要用于肌肉收缩和其他位移信号的 换能 4 3 放大系统 信号调节 放大器 可将生物电信号放大1000倍以上 4 4 显示 记录系统 生理记录仪 常用有二道 四道及八道生理记 录仪等 一个通道可记录一个信号 计算机生物信号采集处理系统 PCLAB UE计算 机生物信号采集处理系统 5 动物生理实验基本操作技术 5 1 手术器械 刀 姿势有指压式 执笔式及反挑式等 剪 外科剪 眼科剪 毛剪 骨剪 普通剪 镊 用于剥离 剪断

3、和缝合 眼科镊 外科镊 钳 止血钳 持针钳 其他 探针 玻璃分针 蛙板 锌铜弓 蛙心夹 动脉导管 气管插管 蛙肌槽 刺激电极 5 2 实验动物选择 选择健康动物 5 3 动物的麻醉 麻醉前准备 P34 1 药物选择 熟悉药品特点 根据实验内容合 理选用麻醉药 33 乙醇生理溶液 5 7 mL kg 耳缘静脉注射 2 麻醉前核对药名 检查药品有无变质 3 狗 猫等呕吐中枢发达的动物在手术前应禁食12 h 以减轻呕吐反应 4 需在全麻下进行手术的动物 可适当给予麻醉辅 助药 如皮下注射吗啡镇静止痛 注射阿托品减 少呼吸道分泌物产生等 麻醉效果观察 呼吸 呼吸加快且不规则 麻醉过浅 呼吸规则且平 稳

4、 已达麻醉深度 呼吸变慢 且以腹式呼吸 为主 麻醉过深 动物有生命危险 反射 角膜反射灵敏 麻醉过浅 角膜反射迟钝 麻 醉程度适宜 角膜反射消失 伴瞳孔散大 则 麻醉过深 肌张力 肌张力亢进 麻醉过浅 全身肌肉松弛 麻 醉合适 皮肤夹捏反应 用止血钳夹捏动物皮肤 观察皮肤的 反应 麻醉注意事项 1 正确选用药品 用药剂量及给药途径 2 静脉麻醉时 先将总量的1 3快速注入 使动物迅速渡过 兴奋期 余下2 3 缓慢注射 并观察动物状态及反应 以准确判断麻醉深度 3 需补充麻醉药时 一次补量不超过总量的1 5 4 麻醉中应随时保持呼吸道通畅 注意保温 5 在手术操作复杂 创伤大 实验时间较长或麻醉

5、深度不 理想等情况下 可配合局部浸润麻醉或基础麻醉 6 实验中注意体液平衡 防止酸中毒及肺水肿的发生 6 器械打结 7 1 活结 用于家兔保定 7 2 死结 用于血管 神经结扎 要领 钳压线 线压钳 实验二 计算机生物信号采集处理系统 1 系统组成与工作原理 PCLAB UE由硬件和软件两部分构成 硬件主要 完成对各种生物电信号 如心电 肌电 脑电 与 非电生物信号 如血压 张力 呼吸 进行调理 放大 并对信号进行模 数 A D 转换 使之进入 计算机 软件主要对已经数字化了的生物信号进行 显示 记录 存储 处理及打印输出 同时对系统 各部分进行控制 与操作者进行人机对话 2 主界面 从上到下

6、依次分为 标题栏 菜单栏 工具栏 状态提示栏及采样窗 控制面板和数据窗等其他多 个相应的子窗口组成 3 使用方法 3 1 设置 标准配置 恢复出厂时的配置 3 2 新建 选择实验项目 填写实验信息 进入实验窗口 开始实验 3 3 采样 记录实验数据 3 4 控制面板参数调节 通道功能调节 刺激参数调节 3 5 存储 文件保存位置 F 文件名 07动医3 呼吸 左2 3 6 编辑 打开原文件 选择 复制 打开 工具 下的 画图 处理文件 复制图片 存盘到F 家兔Hb RBC脆性测定及影响血凝的因素观察 1 实验相关信息及目的 2 材料 2 1 动物 2 2 主要药品 2 3 主要仪器 3 实验方

7、法 简述或按 动物生理学实验 方法进行 1 4 结果 4 1 家兔Hb RBC脆性测定 见表1 4 2 家兔血凝时间的测定 见表2 表1 家兔Hb含量及RBC脆性测定 表2 不同因素对家兔血凝时间的影响 5 讨论 5 1 家兔Hb测定结果与对照比较 其值偏高 原因 5 2 家兔RBC脆性测定结果与对照比较 其值 原因 5 3 家兔血凝时间测定结果表明 时间长短 原因 参考文献 1 陈杰 家畜生理学 M 第四版 北京 中国家业出版社 23 34 分组组 实验实验 组组 对对照组组 Hb g 1000mL RBC脆性 NaCL 最小抵抗最大抵抗 8 150 6 0 550 4 0 35 血凝时间时

8、间 S 实验实验 管号 处处理因素 柠柠 Ca 肝素 Ca 对对照 棉花 肝素 冰水 石蜡 柠柠 肺组织组织 实验三 影响血液凝固的因素 红细胞脆性的测定 血红蛋白的测定 影响血液凝固的因素 1 实验目的 以凝血时间为指标 了解影响凝血的因素 加深 对生理止血过程的理解 2 实验原理 血液凝固是一个酶解激活过程 有多种凝血因子 参与 根据凝血过程起动时凝血因子来源不同 可将 凝血分为内源性激活途径和外源性激活途径 3 实验对象 家兔 4 方法与步骤 4 1 家兔的麻醉 保定与手术 33 乙醇溶液 6mL kg 耳缘静脉注射 4 2 颈动脉采血 4 3 试管准备 4 4 记录凝血时间 5 实验结

9、果 表1 血液凝固及其影响因素 试试管号实验处实验处 理凝血时间时间 秒 1空白 2液体石蜡4滴 3棉花少许许 4冰水环环境 5肝素4滴 6草酸钾钾4滴 7肺组织组织 浸液4滴 5号管加CaCl24滴 6号管加CaCl24滴 6 注意事项 6 1 采血过程要尽量快 以减少计时误差 对 比实验的采血时间要紧接着进行 6 2 每支试管口径大小及采血量要相对一致 不可相差太大 6 3 判断凝血的标准要一致 一般以倾斜试管 达45 时试管内血液不见流动为准 红细胞脆性的测定 1 实验目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法 理解细胞外液 渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性 2 实验原理 正常红细胞悬浮

10、于等渗的血浆中 著置于高渗溶 液内 则红细胞会因失水而皱缩 反之 置于低渗溶 液内 则水进入红细胞 使红细胞膨胀 如环境渗透 压继续下降 红细胞会因继续膨胀而破裂 释放血红 蛋白 称之为溶血 红细胞膜对低渗溶液有一定的抵 抗力 这一特征称为红细胞的渗透脆性 3 实验对象 动物种类不限 4 方法与步骤 4 1 溶液配置 表2 不同浓度NaCl溶液配制 管 号12345678910 1 NaCl mL 9 06 56 05 55 04 54 03 53 02 5 蒸馏馏水 mL 1 03 54 04 55 05 56 06 57 07 5 NaCl浓浓度 0 900 650 600 550 500

11、 450 400 350 300 25 4 2 制备抗凝血 柠檬酸钠作抗凝剂 4 3 加抗凝血 每只试管加1滴 4 4 观察结果 未溶血试管 液体下层有大量红细胞下沉 上层为 无色透明 表明无红细胞破裂 不完全溶血试管 液体下层有红细胞下沉 上层出 现透明淡红色 表明部分红细胞已经破裂 称为不 完全溶血 完全溶血试管 液体完全变成透明红色 管底无红 细胞下沉 5 实验结果 表2 家兔Hb含量及RBC脆性测定 分组组 Hb测测定 g L RBC脆性测测定 NaCl 最小抵抗力最大抵抗力 实验组实验组 对对照组组1230 60 0 550 40 0 35 6 注意事项 6 1 试管要干净 6 2

12、配液要准确 6 3 加血量要一致 6 4 轻轻混匀 减少溶血机会 6 5 静置时间不少于30min 血红蛋白的测定 1 实验目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法 2 实验原理 血红蛋白的颜色与氧结合量有关 当用一定的氧 化剂将其氧化时 可使其转变为稳定 棕色的高铁血 红蛋白 而且颜色与血红蛋白的浓度成正比 因此 可与标准色板进行对比 求出血红蛋白的浓度 即每 升血液中含血红蛋白的克数 g L 1 3 实验对象 动物种类不限 4 方法与步骤 使用沙里氏血红蛋白计测定 比色法是用HCl使血红蛋白酸化形成粽色的高铁 血红蛋白 然后和标准比色板进行比色 1 血红蛋白计由标准比色箱和测定管组成 测

13、定管 两侧有刻度 一侧为血红蛋白量的绝对值 以每100 mL血液中所含血红蛋白的克数表示 另一侧为相对 值 以 即相当于正常平均值的百分数 来表示 2 测定方法 血红蛋白吸管清洁 自来水 蒸馏水 无水乙醇 将0 1N盐酸加入测定管中至刻度 2 处 用血红蛋白吸管吸取20 L血液 将血液吹入盐酸中 并利用上层盐酸将吸管反复洗涤多次 避免起泡 酸化10min后 逐滴加入蒸馏水 边加边混匀并与标 准比色板比较 至二者颜色相同为止 读数即为每100mL血液中血红蛋白的克数 注意事项 1 血红蛋白吸管和比色管要清洁 2 吸取血液要准确 避免起泡 3 滴加蒸馏水要准确 4 酸化时间不能少于10min 5

14、在自然光下比色 实验报告的撰写 1 实验原理 2 材料与方法 2 1 主要器材 2 2 主要药品 2 3 实验动物 2 4 实验方法 2 4 1 Hb测定 按动物生理学实验85页方法进行 1 2 4 2 RBC脆性测定 按动物生理学实验90页方法进 行 1 2 4 3 影响血液凝固因素 按动物生理学实验97页方 法进行 1 3 实验结果 3 1 家兔Hb含量及RBC脆性测定 见表1 表1 家兔Hb含量及RBC脆性测定 分组组 Hb测测定 含量 g L RBC脆性测测定 NaCl 最小抵抗最大抵抗 实验组实验组 对对照组组1230 60 0 550 40 0 35 3 2 不同因素对血液凝固时间

15、的影响 表2 血液凝固及其影响因素 试试管号实验处实验处 理凝血时间时间 秒 1空白 2液体石蜡4滴 3棉花少许许 4冰水环环境 5肝素4滴 6草酸钾钾4滴 7脑组织脑组织 浸液4滴 5号管加CaCl24滴 6号管加CaCl24滴 4 分析与探讨 4 1 本次实验家兔Hb测定结果比对照高 或低 或基本一 致 从操作过程方面说明原因 4 2 本次实验家兔RBC脆性测定结果 最小抵抗比对照组高 或 低 或基本一致 最大抵抗 从操作过程方面说明 原因 4 3 家兔凝血时间测定结果表明 处理能加快 抑制或不 凝 血液凝固 为什么 管加CaCl2后凝固 为什么 从凝血机制分析 5 参考文献 1 杨秀平

16、动物生理学实验 M 北京 高等教育出版社 2019 85 99 2 邹永新 郭予强 我国鸭病毒性疾病的发生和流行概况 J 中国兽医杂 志 2019 6 38 40 实验四 心肌收缩的特点 实验目的 学习蟾蜍心脏活动描记的方法 观察心肌收缩的 特点 实验原理 心肌的有效不应期特别长 几乎占据了整个收缩 期和舒张早期 在此期内任何刺激均不能引起心肌收 缩 因此心肌不会产生强直收缩 心脏总是有节律的 舒缩 在心脏舒张早期之后 给心肌一次有效刺激 会引起心脏一次期前收缩 紧接着出现一次较长的间 歇 代偿间隙 实验对象 蛙或蟾蜍 实验药品 任氏液 实验方法与步骤 1 实验准备 1 在体蛙心制备 取蛙一只 破坏脑 脊髓 仰卧 固定于蛙板上 左手持镊子提起胸骨后端的皮肤剪 一小口 然后向左 右两侧锁骨外侧剪开皮肤 肌 肉 剪断左右锁骨 使创口呈一倒三角形 充分暴 露心脏部位 并用眼科剪剪开心包膜 彻底暴露心 脏 2 观察心脏的结构 识别蛙心脏 自心脏腹面可观察到心室 心房 动脉球和主动脉 用玻璃分针向前翻转 蛙心 暴露心脏背面可观察到静脉窦和心房 3 连接实验装置 将蛙心夹上的细线与张力换能器相连