《2017-2018学年高中生物 第2章 酶技术 第8课时 固定化酶的制备和应用同步备课课件 北师大版选修1》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2017-2018学年高中生物 第2章 酶技术 第8课时 固定化酶的制备和应用同步备课课件 北师大版选修1（32页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 第2章酶技术第8课时固定化酶的制备和应用余学习导航1.阅读教材Pao内容,了解固定化酶的常用方法。2结合教材Pao4l内容,学习固定化乳糖酶的制备。3.结合教材Paoa内容,检测牛奶中乳糖的分解。重雅点击1.尝试制备固定化乳糖酶。2-利用固定化酶检测乳糖的分解产物。一、固定化酶及其制备二、固定化酶的应用当堂检测由于酶的分离与提纯有许多技术性隼题,造成酶制剂来源有限、成本高、不利于大规模使用。利用固定化酶技术可以解决这些难题。1固定化酶(U)概念:固定化酶又叫固相化酶,是指固定在载佛上并在二定的空间、茎图内进行催化反应的酶。酶的固定化过程是通过化学或物理的手段,将酶束缚在一定的区间内,固定酶分
2、子在此区间内进行健化作用。(2)酶的固定方法:根据酶的性质和载体特性需要采用不同的方法,有时还需要将几种方法联合使用:Ql0QGGG-6GG-LGG仪是炜附法:是将酶炜附到载体表面。是载体偶联法:是将酶通过共价键结合到载体的表面。是亥联法:通过把酶交互连接、相互结合从而将酶固定。阜是包埋法:是将酶或者细胞包埋在细微的网格里。:(3)固定化酶技术的优缺点A2-固定化乳糖酶的制备(实验原理D乳根酷学名为-D-半酶榴慧水侠中应用相当广泛的一种酶,较多地应用于乳制品加工中。恨多人小肠黏膜内的乳塘酶活性严重降低导致用倩脱酮处理部分乳糖,分解为_丞莲状。回定乳糖酶用的是凝胶包埋法:凝胶是由_丙烯酯胺(Ar
3、c)和M,N-甲叉双丙烯酰胺(Bis)形成的三维网状结构的高粥化合物,将酶和凝胶湾酶即包埋在凝胶内部的_微孔中,从而将酶固定。(2)方法步骤乳糖酶的溶解:准确称取乳糖酸100mg,然后将其溶解在pH7.3的磷酸缓冲液中,其中单体Are淫度为质量分数20%4,交联剂_Bis淫度为质量分数594。聚合:将含有0.6mLN,N,N,N一四甲基乙二胺和200mg过硫、_酸铧的4mL磺酸缓冲液迅速倒入乳糖酶的溶解液中,缓慢搅拌混匀,_4C条件下进行粕司反应30min。G)漂洗:聚合反应完成后形成_濮胶,用小刀切成小块,用_缓冲液4一6次,0-4C保存备用。1固定化酶依据的原理与其优点分别是什么?答案“将酶固定在不溶于水的载体上,使酶既能与反应物接触,又能与产物分离;同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。2固定化乳糖酶的制备(制备固定化乳糖酶时为什么要用缓冲液配制凝胶单体?答案“酶活性易受温度和酸碱度的影响,用缓冲液配制凝胶单体能保持溶液中pH的相对稳定,从而保证实验过程中酶的活性。(2)漂洗凝胶的目的是什么?茎鲈幽皇答案将凝胶表面没有固定的乳糖酶冲洗干净。
