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1、 实验一组DNA的抽提试剂:20xssc、蛋自酶K(20mgmL)、10968D8、0.5MEDTA(2Na)ddEo0、沧N、饱和酚、氢仿、异成醇、正丁醇、无水乙醇、3MNaAc、TE仪器及耗材:秉泉录、Tip头、羚葛盒、液N罐、研钺、冰箱、榻手套、15mL离心管(半透明)、1.5mL离心管、高逢冷泊离心机、恒温水浅锅、药匙、长颈玻瑾服管、移深管、江精灯、pH计、废液缸、灭茵锟材料:家蚕后部丝腺和家蛎个体验流程1材料h磨至粉末3.5mL酶解缓冲液巫4h以上一20mgmL蛋自酶K0.1mL10%SDS0.5ImL10mL醒解缓冲浇0.5MEDTA1.0mLddH,O8.4mL实验流程2230n
2、4C12000rfmxX10min3.5mL酶解缓冲深加入3.5mL饱和酚湾匀一一刀去沉派厂一|加入3.5mL饱和酣和敲仿(1:1)湾匀4等体积正丁酸湾匀5min为012000rmx10min取上清4C6230n重复A-B4000mX5min去上清终体积1mL以下一一|0.1mLNaAc、2.5mL乙醇门一|溶于TE钧出DNA实验二组DNA的RNase处理i式齐:RNase(10mglmL)、ddHuO、饱和酚、氯仿、异戊醇、正一醇、无水乙醇、3MNaAc、TE1义器及耒熹木才:移液嚣、Tip头、冷薛盒、冰箱、1.5mL商心管、高途冷泊离心机、恒温水浅锅、长颈理瑾炜管、移液管、酒精灯、庚液缸、
3、灭菌铬材料:新持提的家蛎基国组DNA实验流程12000rmxX10min31Cs0.5mL基回组DNA加入1hLRNase厂门等体积酞湾匀30min4C一一12000mx10min去下尿等体积酚混匀3C20min12000rmx10min灯下尿加入等体积酚和氢仿(1:1)4C20min一一刀渊勿厂一*|12000rmx10min取上清体积正丁酝5320min一一才混匀|一一|4000rmx5min终体积0.1mL以下一一10hLNaAc、0.25mtL乙醇叶焘斤出DNA一0%乙醇洗盐2溶于TE实验三_DNA的浓度测定i式齐:ddHb0、TE仪器及耗材:袋外分光光度计、Tip头、冷藏盒、冰箱、1.5mL离心管、废液缸、喋水纸材料:RNase处理过的家蚕基因组DNAH吊步马皿化呈2.0hL基图组DNA198hLTE湾匀测ODxn、ODzsn一一一|“计算DNA浓度、分析DNA纯度(OD:co/ODzao)计算公式:DNA样品的浓度(ug/h)二OD260义稀释借数(100X50/1000(OD260二1时,dsDNA浓度约为50hg/mL)
