《实验八 (植保)微生物生理生化特性检测(糖发酵、氨化作用、甲基红试验等)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验八 (植保)微生物生理生化特性检测(糖发酵、氨化作用、甲基红试验等)（31页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验八微生物生理生化特性检测 本次实验内容 4 5人1组 一糖发酵试验二好气菌的氨化作用试验三吲哚和甲基红试验 一糖发酵试验 1目的要求2基本原理3试验材料4操作步骤 1目的要求 了解糖发酵的原理 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法 巩固微生物接种技术 2基本原理 不同细菌对糖的分解利用能力存在较大差异 且产物不同 是常用的鉴别微生物的生化方法 有些细菌能分解某种糖产生有机酸和气体 有些细菌只产酸不产气 若产酸 可根据培养基特定的酸碱指示剂的特征性的颜色变化检测 若产气 可从培养基中的杜氏小管中是否有气泡观测 3试验材料 培养基 无菌葡萄糖发酵液体培养基无菌蔗糖发酵液体培养基菌种 大肠杆菌枯草
2、杆菌 4操作步骤 在试管外壁标明发酵培养基名称和接种细菌菌名 取葡萄糖发酵培养基试管3支 分别接种大肠杆菌 枯草杆菌 第三支不接做对照 取蔗糖发酵培养基试管3支 分别接种大肠杆菌 枯草杆菌 第三支不接做对照 将接种的和做对照的6支试管放置28 30 培养2 3天 观察各试管颜色变化及杜氏小管中是否有气泡 注 记录生长情况用符号表示 不生长 生长差 生长一般 生长良好 表1糖发酵试验结果 二好气氨化作用试验 1目的要求2基本原理3试验材料4操作步骤 1目的要求 了解好气氨化作用的原理 掌握通过氨化作用鉴别不同微生物的方法 巩固微生物的接种技术 2基本原理 不同微生物对含氮有机物分解能力及代谢途径
3、 最终产物不尽相同 这些特征性生化反应可作为菌种鉴定的重要依据 微生物可分解含氮有机物 最终产生氨气 以酸碱指示剂试纸检测 3试验材料 培养基 牛肉膏蛋白胨液体培养基菌种 土壤颗粒大肠杆菌枯草杆菌 4操作步骤 1 取牛肉膏蛋白胨液体培养基四支 贴好标签 分别接种土壤颗粒 大肠杆菌 枯草杆菌 余下一支不接种作为空白对照 在每支试管口悬挂一条经无菌水湿润的红色石蕊试纸 并加好试管塞 2 将已经接种的培养管置于28 30 培养5 7日 3 结果检测 观察各管红色石蕊试纸变色及培养液浑浊情况 表2好气菌的氨化作用试验结果 接种菌样 检测项目 三吲哚和甲基红试验 1目的要求2基本原理3试验材料4操作步骤
4、 1目的要求 学习掌握吲哚和甲基红试验原理 学习掌握吲哚和甲基红试验在肠道菌鉴定中的方法及意义 2基本原理 吲哚和甲基红试验主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌 多用于水细菌学检查 大肠杆菌虽非致病菌 但在饮用水中超过一定数量 则表示受粪便污染 产气肠杆菌也广泛存在于自然界中 因此检查水时要将两者分开 吲哚试验是用于检测吲哚的产生 某些细菌可产生色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸 对二甲基氨基苯甲醛遇吲哚形成玫瑰吲哚 红色 甲基红试验是用于检测分解葡萄糖产生有机酸如甲酸 乙酸 乳酸等 当细菌分解糖产酸时 培养基中的甲基红指示剂由橘黄 pH6 3 变为红色 pH4 2 即甲基红反应 3
5、试验材料 培养基 蛋白胨水培养基 吲哚试验 葡萄糖蛋白胨水培养基 甲基红试验 菌种 大肠杆菌产气肠杆菌 操作步骤 1 接种与培养 将大肠杆菌 产气肠杆菌各接种于1支蛋白胨水培养基 吲哚试验 将大肠杆菌 产气肠杆菌各接种于1支葡萄糖蛋白胨水培养基 甲基红试验 37 培养48小时 2 结果观察 吲哚试验在培养48h后的蛋白胨水培养基中加入3 4滴乙醚 摇动数次静置1 3min 待乙醚上升后 沿试管徐徐加入2滴吲哚试剂 在乙醚和培养物之间产生红色环状物为阳性反应 甲基红试验在培养48h后的葡萄糖蛋白胨水培养基内加入甲基红试剂2滴 培养基变红者为阳性 变黄者为阴性 注意 甲基红试剂加得过多 可出现假阳性现象 甲基红试验 大肠杆菌 产气肠杆菌 阳性 吲哚试验 大肠杆菌 产气肠杆菌 产气肠杆菌 大肠杆菌 伏 普试验 试验结果记录 表示阳性反应 表示阴性反应 表3吲哚和甲基红试验结果 实验报告 按实验内容分别书写 要求每个实验写出 1实验目的2实验原理3实验结果 实验结果用表格形式给出 并对实验结果进行分析 4分析讨论 注 记录生长情况用符号表示 不生长 生长差 生长一般 生长良好 一糖发酵试验 表1糖发酵试验结果 二好气菌的氨化作用 接种菌样 检测项目 表2好气菌的氨化作用试验结果 吲哚和甲基红试验 试验结果记录 表示阳性反应 表示阴性反应 表3吲哚和甲基红试验结果
