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1、全球信赖的迈瑞 A world together 生化试剂的基本知识 全球信赖的迈瑞 A world together 主要内容介绍 生化试剂的分类 反应速度特性 显色原理 性能评价方法 全球信赖的迈瑞 A world together 生化试剂的分类 按照化学性质分 酶类 包括ALT AST ALP ACP r GT HBDH LDH CK CK MB AMY MSO ADA ChE等 底物 代谢产物类 包括TG TC HDL C LDL C UA UREA Cr Glu TP Alb T Bil D Bil TBA NH4 CO2等 无机离子类 包括Ca P Mg Cl等 特种蛋白类 包括
2、apoA1 apoB Lp a C3 C4 PFB B因子 IgG IgA IgM等 全球信赖的迈瑞 A world together 生化试剂的分类 按照临床应用分 无机离子 包括Ca P Mg Cl等 肝功能 包括ALT AST r GT ALP MSO T Bil D Bil TBA TP Alb等 肾功能 UA UREA Cr等 心肌酶谱 CK CK MB LDH HBDH AST MSO 糖尿病 GLU等 前列腺疾病 ACP p ACP等 胰腺炎 AMY 全球信赖的迈瑞 A world together 生化试剂的分类 按照临床应用分 胰腺炎 AMY 血脂 TC TG HDL C L
3、DL C apoA1 apoB Lp a 痛风 UA 有机磷中毒 ChE 免疫性疾病 C3 C4 PFB B因子 IgG IgA IgM Kappa链 Lambda链 全球信赖的迈瑞 A world together 反应速度特性 按照反应速度 可以将生化试剂分为二大类 终点法试剂 动力学法试剂 又可再分为零级动力学法和一 级动力学法 全球信赖的迈瑞 A world together 反应速度特性之终点法 终点法 指经过一段时间 一般为几分钟 的 反应 反应进行到完全 使全部底物 被 测物 转变成产物 称终点法 更确切地 说应称平衡法 这是最理想的分析类型 整个反应达到平衡 由于正向反应的 平
4、衡常数很大 可认为所有的被测定物 已转变为产物 反应液的吸光度不再增 加 或降低 吸光度的增加 或降低 程 度与被测定物的浓度成正比 终点法对反应条件 如酶量 pH 温 度 小的改变不敏感 只要这种改变不影 响在一定时间内反应达到平衡即可 是 最理想的反应模型 全球信赖的迈瑞 A world together 反应速度特性之终点法 属于终点法的试剂主要有 TG TC HDL C LDL C UA Glu TP Alb T Bil D Bil Cr 氧化酶法 NH4 CO2 Ca P Mg Cl apoA1 apoB Lp a C3 C4 PFB B因 子 IgG IgA IgM等 全球信赖的迈
5、瑞 A world together 反应速度特性之动力学法 零级动力学法 指反应过程中反应速度维持不变 达到 最大 与底物浓度无关 因此 在整个反应 过程中 反应物可以匀速地生成某个产物 导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地 减小或增加 减小或增加的速度 A min 与被测物的活性或浓度成正比 主要用于酶 活性的测定 实际上 由于底物浓度不可能足够大 随着反应的进行 底物消耗到一定程度后 反应速度不再维持不变 同样从启动反应到 达到最大速度需要一定时间 因此 零级动 力学法是针对于特定时间段而言的 各试剂 商对这段时间有严格规定 全球信赖的迈瑞 A world together 反应速度特
6、性之动力学法 属于零级动力学法的试剂主要有 ALT AST ALP ACP r GT HBDH LDH CK CK MB AMY MSO ADA ChE TBA等 全球信赖的迈瑞 A world together 反应速度特性之动力学法 一级动力学法 固定时间法 在一定的反应时间内 反应速度与底物 浓度的一次方成正比 由于底物在不断的消耗 因此整个反应速度在不断的减小 表现为 吸光度的增加 或降低 速度越来越小 这类反 应达到平衡的时间很长 理论上可以在任意 时间段进行监测 但由于血清成份复杂 反 应刚启动时反应较复杂 杂反应较多 经过 一段延迟时间才能进入稳定反应期 必需在 特定时间段内进行
7、监测 各试剂商对这段时 间有严格规定 在一固定时间间隔中 底物浓度的变化 量正比于底物的初浓度 这是一级反应的通 性 该段时间内吸光度的增加 或 降低与被测 定物的浓度成正比 全球信赖的迈瑞 A world together 反应速度特性之动力学法 属于一级动力学法的试剂主要有 Cr 苦味酸法 UREA 紫外监测法 全球信赖的迈瑞 A world together 显色原理 NAD NADH和NADP NADPH系统 p NP和p NA系统 H2O2偶联的指示系统 抗原抗体反应指示系统 其它显色反应 全球信赖的迈瑞 A world together 显色原理 NAD NADH和NADP NAD
8、PH系统 NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰 而 NAD和NADP在340nm无特征性吸收峰 利用其偶联 的脱氢酶 工具酶 反应 根据340nm吸光度的变化 可以测定物质的浓度或活性 作为该指示系统常用的工具酶有LDH MDH GLDH和G6PDH 目前利用此指示系统进行测定的临床项目有 ALT AST CK LDH CK MB HBDH Glu UREA NH4 CO2等 全球信赖的迈瑞 A world together 显色原理 p NP和p NA指示系统 p NP和p NA在405nm有特征性吸收 峰 根据405nm吸光度的变化 可以测 定物质的浓度或活性 目前利用此指示系统
9、进行测定的临 床项目有ALP ACP r GT AMY等 全球信赖的迈瑞 A world together 显色原理 H2O2偶联的指示系统 H2O2在过氧化物酶的作用下 可使单一个或成 对的无色的色素原氧化成有色的色素 导致某一波长 吸光度的增加 因此可用来测定物质的浓度或活性 用于此指示系统的单一色素原有TMB ABTS等 成对色素原有酚和4AA MBTH和DMA等 目前利用此指示系统进行测定的临床项目有TC TG HDL C LDL C Glu Cr UA等 全球信赖的迈瑞 A world together 显色原理 抗原抗体反应指示系统 特异性抗体与抗原 待测物质 在相应的缓 冲环境下
10、反应生成抗原抗体复合物 形成一定 的浊度 导致特定波长透光率的改变 在抗体 过剩的前提下 改变程度与抗原浓度成正比 目前利用此指示系统进行测定的临床项目 有apoAI apoB Lp a IgG IgA IgM C3 C4 CRP等 全球信赖的迈瑞 A world together 显色原理 其它显色反应 蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产 生紫红色络合物 在一定浓度范围内颜色反应强度与 蛋白质的浓度成正比 用于TP的测定 溴甲酚绿 BCG 在非离子去污剂Brij 35的存在 下 可与白蛋白形成紧密结合的绿色复合物 用于 Alb的测定 重氮苯磺酸盐与胆红素生成红紫色偶氮胆红素 用于总胆
11、红素和直接胆红素的测定 甲基麝香草酚兰 MTB 在碱性条件下可与Ca Mg形成有色络合物 用于Ca Mg的测定 全球信赖的迈瑞 A world together 性能评价方法 主要性能指标 稳定性 指在规定条件下经过一段时间的保存 仍能达到相应的性能指标 如试剂空白吸光 度 线性范围 灵敏度等 反应灵敏度 指单位浓度 或活性 的测定物反应所产生的 反应度 反应度越高 灵敏度越大 精密度 结果间相互符合的一致程度 准确度 与参考测定程序结果的一致性 线性范围 在规定的重复性和线性偏差下 测得的浓度或活性值 与设定的浓度或活性值之间的比例关系的范围 基质效应 抗干扰性 其它 试剂 样本比例 反应时
12、间 价格等 全球信赖的迈瑞 A world together 性能评价方法 稳定性 连续观测 每日试验 热加速试验 反应灵敏度 直接计算单位浓度反应物的吸光 度变化或变化率 精密度 按照NCCLS EP5 A进行 准确度 按照NCCLS EP9 A2 进行 线性范围 按照NCCLS EP6 A 进行 基质效应 通过回收试验确定 抗干扰性 按照NCCLS EP7 A进行 谢谢大家 已推出的试剂种类 共35个项目38种试剂 按照化学性质分 酶类 包括ALT AST ALP r GT HBDH LDH CK CK MB AMY等 底物 代谢产物类 包括TG TC HDL C LDL C UA UREA Cr Glu TP Alb T Bil D Bil TBA等 无机离子类 包括Ca P Mg等 特种蛋白类 包括ApoA1 ApoB Lp a C3 C4 IgG IgA IgM CRP PA等 已推出和计划推出的试剂包装 已推出 BS 200包装 试用装试剂 销售试剂 BS 300包装 装机试剂 销售试剂 日立7170包装 销售试剂 计划推出 BS 400包装 通用包装 日立7020包装
