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1、罗布麻黄酮的提取及抗氧化活性的研究摘要：本课题以罗布麻为原料，采用乙醇浸提法提取罗布麻中的黄酮，考察了乙醇溶剂浓度、提取时间、提取温度、料液比、提取次数等因素对罗布麻黄酮提取率的影响，其中选择了乙醇溶剂浓度、提取温度、提取时间、料液比四个因素设计正交实验来优化黄酮的最佳提取工艺，并对羟基自由基的清除和对超氧阴离子清除等两个方面进行黄酮抗氧化性的研究。得到的实验数据表明，影响罗布麻总黄酮提取的主要因素为乙醇溶剂浓度、液料比，其次提取时间、提取温度。罗布麻中黄酮的最佳提取工艺为乙醇溶剂浓度为65%，提取时间4h，温度80，料液比1:15，测得罗布麻总黄酮的含量为2.89%。除此之外，罗布麻黄酮对羟
2、基自由基和超氧阴离子具有清除作用，且清除率与黄酮存在一定的量效关系。关键词：罗布麻，黄酮，乙醇浸提法，抗氧化活性Study Extraction and Antioxidant Activity of Flavonoids from Apocynum Venetum L.13293432 YE Yixuan（Department of Life Science, Qiu Zhen School of Huzhou University, Huzhou 313000, ）Abstract：The extraction of flavonoids in Apocynum venetum L. by
3、 ethanol extraction was studied in this paper. The effects of ethanol concentration, extraction time, extraction temperature, ratio of material to liquid and extraction times on the extraction rate of Apocynum venetum L. were investigated. The orthogonal design was used to optimize the extraction pr
4、ocess of flavonoids, and the removal of hydroxyl radical and the removal of superoxide anion were studied. The flavonoids Study on Oxidation Resistance. The experimental data showed that the main factors affecting the extraction of total flavonoids of Apocynum venetum were ethanol solvent concentrat
5、ion, liquid to material ratio, extraction time and extraction temperature. The optimum extraction conditions were: ethanol concentration 65%, extraction time 4h, temperature 80 , ratio of solid to liquid 1:15, total flavonoids content of Apocynum venetum was 2.89%. In addition, flavonoids of Apocynu
6、m venetum have a scavenging effect on hydroxyl radical and superoxide anion, and the clearance rate has a dose-effect relationship with flavonoids.Key words: Apocynum venetum L, total flavonoids, extraction, optimization, antioxidant activity目录1引言.11.1罗布麻的简介.11.2罗布麻的研究前景.11.3 罗布麻的价值11.4 罗布麻的化学成分11.5
7、 黄酮类化合物简介11.6 罗布麻中黄酮类化合物的结构类型21.7 罗布麻中黄酮的提取方法21.8 罗布麻中黄酮的分析方法21.9本文研究内容.22实验内容.22.1 实验材料、试剂及仪器.22.1.1 实验材料2.1.2 实验试剂2.1.3 实验仪器2.1.4 实验附属仪器2.2实验流程.32.2.1 基本实验流程2.2.2 紫外分光光度法实验流程2.2.3 实验流程图2.3 实验方法.42.3.1 标准芦丁溶液的配制2.3.2 标准曲线制备2.3.3 计算公式推算2.3.4 单因素考察 2.3.5 正交试验设计2.3.6样品的制备2.3.7抗氧化活性的研究2.3.8计算方法3结果与讨论.8
8、3.1 单因素结果.83.2 正交结果.113.3 抗氧化活性研究结果.123.4 讨论.144.总结和展望.144.1 实验总结.144.2 展望.14参考文献.15致 谢.161.引言1.1 罗布麻的简介罗布麻不仅可以称之为红麻，还可以叫做叫泽漆麻、野茶和吉吉麻或茶叶花。罗布麻（Apocynum venetum L.）实质上即为夹竹桃植物对应的叶或全草1。罗布麻主要集中在河南、西北、华北以及东北等不同区域。甘、微苦，凉，入肝经，清热平肝，利水消肿2。罗布麻浑身是宝，秆可作为造纸原料，其对应的叶部位可以直接作为饲料与饮料的原料，而对应的根茎部位乳胶液则可以直接用于橡胶制作。就中医学的角度而言
9、，其主要以地上部分作为入药材料，而罗布麻本身具备的药性微寒，味苦甘，功能为清热解火，息风平肝，主治头眩目晕、失眠等症状；叶的部分含有罗布麻苷，具有强心作用，可制成茶、药片、烟等形式，为治疗高血压的良药3。1.2 罗布麻的研究前景罗布麻是集药用、纺织业、食用与植被恢复及旅游观赏于一身的优良植物，是世界上稀少的优良的野生植物资源，罗布麻应用的综合开发对人类有着非常积极的意义。对罗布麻的开发利用开展实施阶段，可对其产业结构更好、更快的加以优化，获得更理想经济收益，还使综合开发、利用罗布麻有了更为可靠的根基，使其具备医用、绿化、食用、橡胶、饲草等诸多用途。罗布麻全身都有利用价值，皆能够作为药材食用，因
10、为其各部分的生理活性存在差异，因此当前一般是通过现代中药提取分离技术来针对罗布麻药用价格展开研究，从而区分开各部分的各种有效成分，对症下药。未来将会对其有效成分更深入的展开分析。因此分离法、提取法、草渣使用、高新技术等在未来将会有非常大利用空间。1.3 罗布麻的价值罗布麻有着非常好的耐盐性能，因此在0.5%-1.0%含盐量的土壤中依旧能够生长，此外还能够在3米至4米的地下水位中生长，在盐层厚度为十厘米至二十厘米的地表荒地也能够生长。并且，其根系非常粗壮，且深，能够在强盐化的表土重盐层一米至两米之中，将地下含敖分少的水分吸取，能够成片地于敖土之中获得茁壮成长5。1.4 罗布麻的化学成分本实验采用
11、的是罗布麻的叶，罗布麻叶中主要含含羟基的黄酮衍生物，单宁，酸类，脂肪酸醇，醇类，糖类，烷类有机物，氨基酸类，无机盐与其它化学成分等。1.5 黄酮类化合物简介黄酮类化合物大部分属于结晶体固体，但黄酮苷类比较特殊，属于无定形粉末。黄酮类化合物分子内有没有交叉共轭体系、取代位置、数目、助色团类别等诸多因素都能够对它的颜色发挥决定性的作用。灰黄至黄色：黄酮、黄酮醇及其苷类；黄至橙黄色：查耳酮；不显色：二氢黄酮显微黄色：异黄酮（二氢黄酮、异黄酮类）。黄酮类化合物在经过羟基糖普化之后，能够更好地溶解于水中，但是相反而言，在有机溶剂内的溶解度却会越来越小。一般而言，在诸如甲醇、乙醇等的强极性溶液中，黄酮往往
12、更容易溶解，但是在诸如氯仿、笨等的有机溶剂之中，却难以溶解，甚至于完全不溶解。黄酮类化合物在水中的溶解度与其糖链呈正比，前者越大，意味着后者越长。1.6 罗布麻中黄酮类化合物的结构类型在罗布麻内最为根本的有效成分即为黄酮类化合物，而这里提出的该种化合物普遍是指有两个苯环，采用三碳链连接形成的系列化合物。根据三碳链对应的取代、成环以及氧化的特征，有可以将其中的黄酮类化合物分为黄酮、黄酮醇、双氢黄酮(醇)等各种不同种类。当前自然界中存在最多的产物主要是黄酮醇与黄酮。1.7 罗布麻中黄酮的提取方法目前，罗布麻总黄酮的提取方法包括：水提法、醇提取法、有机溶剂提取法、超声波提取法、溶剂回流提取法、微波提
13、取法以及浸泡提取。本实验采用乙醇浸提法。称取适量的罗布麻粉，控制实验条件：加入适量浓度的乙醇溶剂，根据规定的乙醇料液比，严格把控温度，同时注意回流提取的时间以及次数，最后采用抽滤以及冷却等多种方式，得到最终需要的罗布麻黄酮提取液。1.8 罗布麻中黄酮的分析方法黄酮类化合物分析的方法很多。如今运用频率较高的方法有液相色谱一串联质谱法、气相色谱法一质谱联用法、旋光定量法、高效液相色谱法、分光光度法、薄层色谱法等，不同方法适用于不同的情况，需要从提取物的性质、工艺设备、提取费用消耗等诸多因素着眼来明确最佳的方案。本课题研究最终选用的方法是分光光度法，分光光度法在实验室应用中较为实用，有效，得出的结果可信度也相对较高。其中有铜离子络合法，系数倍率法，比色法，导数光谱法，多波长吸收度比值差法，旋光定量法等6。在不同的测量中采用最佳的方法以取得更优的结果。此次实验采用的是在紫外光分光光度法。1.9 本文研究内容罗布麻具有延缓衰老、降血压、降血脂、软化血管、解酒护肝、排毒养颜、安神助眠、解烟毒等功效，特别是罗布麻黄酮能使血小板内的环磷酸腺苷水平升高，
