2017年重庆大学生物工程学院627分子生物学考研仿真模拟题.doc

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1、2017年重庆大学生物工程学院627分子生物学考研仿真模拟题一、名词解释1 分子伴侣(molecular chaperone)【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。 2 双向电泳【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后,在它的直角方向再进行一次电泳,为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法,目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦,平衡后,第二向为SDS 电泳。 3 移码突变(frameshi Kmutation)【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位

2、点开始整个可读框的改变,从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。 4 Telomerase【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶,其中RNA 作为模板序列,指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。 5 DNA 解链温度(melting temperature, T m )【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。 6 DNA 复性(DNA renaturation)【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。7 Nonsence mutat

3、ion【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。 8 Attenuator【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时,RNA 合成终止,起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的,其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度,典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。 二、简答题9 什么是SD 序列?其功能是什么?SD 序列是mRNA 中用于结合原核生物核糖体的序列,【答案】(1

4、)是存在于原核生物mRNA起始密码子AUG 上游7?12个核苷酸处的一段富含嘌呤的碱基序列。(2) SD 序列的功能SD 序列与16S rRNA3端反向互补,将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。SD 序列与16S rRNA 序列互补的程度以及从起始密码子AUG 到嘌岭片段的距离也都强烈地影响翻译起 始的效率。由于不同基因的mRNA 有不同的SD 序列,它们与16S rRNA的结合能力也不同,所以它们可以控制单位时间内翻译过程中起始复合物形成的数目,最终控制着翻译的速度。 10如果你是一家生物技术公司的CEO 或者负责技术的高层人员,有人向你推荐一种治疗癌症的特

5、效药,寻 求与你们公司合作。你将在哪些方面对这种药物进行评价?【答案】(1)安全性:需考察药物所用原材料、表达系统以及药品本身的安全性,必须做毒性实验和临床检验来 进一步确定其安全性;(2)有效性:检测该药物靶向性是否够好,能否顺利的到达病灶,对癌细胞具有高效的特异性而对正常细 胞无毒害作用,疗效是否确切;(3)稳定性:考察药物加工过程的稳定性、贮藏稳定性以及治疗效果稳定性;(4)适用性:是否适用于不同生理状态和体质的人群。 11人类基因组中具有编码功能的基因仅仅有35万左右,但是蛋白质种类超过10万种,请你说明其中的原因。【答案】基因数目与蛋白质数目不对等,主要原因是:(1)基因转录后修饰过

6、程中的选择性剪切,使得一个基因形成了不同的转录本,翻译成多种蛋白质;(2)蛋白质修饰作用,同一种蛋白质经过修饰以后,可以有不同的形式存在细胞中。 12简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。【答案】(1)原理:双脱氧的核苷酸是人造的分子,这种分子糖环的基基团,而在天然分子中糖环的互补配对原则是天然三磷酸核苷酸,用它的但是,若进入的核苷酸是双脱氧的,则由于复制终止。(2)方法:将待测序的单链DNA 的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA 聚合酶分成四管,和碳上都没有了轻g 基连接。碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中,新掺入的碱基按碱基磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的没有羟基而影响下一个磷

7、酸二酯键的形成,导致DNA在四管反应系 统中分别按比例引入四种双脱氧碱基,只要双脱氧碱基掺入链端,该链就停止延长,链端掺入单脱氧碱基的片段可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为脱氧碱基为,根据片段不一的核酸片段(长度相邻者仅差一个碱基)片段的碱基排列顺序。端,以双端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后,分四个泳道进行电泳,以分离长短端的双脱氧碱基,便可依次阅读合成三、论述题13说说用poly AT tract分离mRNA 的主要过程。【答案】(1) polyAT tract mRNA 分离系统将生物素标记的寡(dT )引物与细胞总RNA 温育;(2)向其中加入与微磁球相连的抗生物素

8、蛋白以结合polyA mRNA ;(3)通过磁场吸附作用将poly (A ) mRNA 从总RNA 中分离,从而完成mRNA 的分离。 14蛋白质组学是后基因时代生命科学研究的核心内容之一,请谈谈你对目前蛋白质组学研究的策略、方法和技术的认识和理解,以及对蛋白质组学研究成果的应用前景的展望。【答案】蛋白质组学研究策略多种多样,但是主要有两种:第一种是传统的二维凝胶电泳分离、胶内酶解与质谱 技术鉴定相结合的方法,这也是目前最常用的一种方法;第二种方法则是先将混合蛋白酶解,经过适当的色谱分离手段之后,对肽段进行质谱分析,并据此实现蛋白质的鉴定。如果需要进行定量比较,可以对蛋白质或肽段进 行稳定同位

9、素标记或亲和标记。(1)第一种方法:蛋白质通过二维凝胶电泳进行分离,染色后用蛋白凝胶成像系统将凝胶成像并进行分析, 初步发现表达量有差异的蛋白质点,然后可以将感兴趣的蛋白质切下、酶解后用质谱技术鉴定。采用该路线进行 的研究结果表明,不论研究体系如何. 许多鉴定的蛋白质都是相同的,这说明该方法的动态范围有限。对酵母蛋 白质组的系统研究也发现该方法通常只能看到高丰度的蛋白质。这可能是该路线所面临的最大问题,因此二维凝 胶电泳技术也在不断发展和完善中,包括二维凝胶电泳分离前样品的预处理、开发更灵敏的染色方法以及更高分 辨率的分离胶等。(2) 第二种方法:是最近几年发展起来的,其起源可追溯到1992年,Hunt 及其同事首先用的方法对蛋白复合物进行了研究. 当时他们所用方法用于蛋白质组学的定性和定量研还是,都不是理想的定量检测器;第三,对于实验产生的究还有很多困难:首先,对于 复杂的蛋白质体系,酶解之后的肽段数目极多,一维色谱的峰容量不足;第二,无论是大量数据,需要有相应的处理和分析手段。近年来多维色谱分 析技术如二维和三维色谱分离体系的出现使该技术平台不断得到发展。理论上该方法路线可以检测到丰度较低的蛋白质。蛋白质组学的研究成果具有极为广阔的应用前景,将会从根本上改变疾病诊断、治疗和预防的传统健康产业模式,带来巨大的社会和经济效益。 一、名词解释考研试题

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