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1、第10章肠杆菌科 Enterobacteriaceae p 116 概述 一大群居住在人和动物肠道中 生物学性状近似的革兰阴性杆菌 属于肠杆菌科 Enterobacteriaceae 多数是肠道的正常菌群 至少有44个菌属 170多个菌种 少数为致病菌 是胃肠传染病的最重要病原菌 肠杆菌科细菌分类及致病性 主要的肠道感染细菌致病性肠道杆菌 沙门菌属 志贺菌属 部分埃希菌属 条件致病性肠道杆菌 部分埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯杆菌属 乳糖发酵试验 共同特性 1 相似的形态染色 2 简单的培养条件 3 活泼的生化反应 重要试验 初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 肠道致病菌 肠道非致病菌 多数不发酵
2、乳糖 多数发酵乳糖 4 抗原构造复杂 鞭毛抗原 H 菌体抗原 O K或Vi抗原 还有 多种菌毛抗原共同抗原 5 抵抗力 不强 6 易变异 溶源性转换 生化反应性变异 通过 引起 耐药性变异 毒力性变异 转导 接合 第一节埃希菌属 Escherichia 包括6种菌 以大肠杆菌最常见 大肠埃希菌 E coli 正常菌群 条件致病菌 致病菌 环卫和食品卫生的检测指标 一 生物学特性 1 形态与染色 2 培养特性 3 生化反应 活泼 能酵解多种糖 乳糖 类产酸产气 IMViC实验为 S S平板 形成红色菌落 S S平板培养结果 4 抗原构造 复杂大肠杆菌主要有O H K三种抗原血清学的排列方式按 O
3、 K H5 抵抗力 较弱 胆盐 亚硝酸盐 煌绿对其有抑制作用 二 致病性 一 致病物质粘附素 外毒素 二 所致疾病1 肠道外感染败血症 新生儿脑膜炎 泌尿道感染 2 胃肠炎 肠道内感染 1 肠产毒型大肠埃希菌 ETEC A 大肠杆菌肠毒素 enterotoxin a 不耐热肠毒素 labileenterotoxin LT 对热不稳定 65 C30min失活 与霍乱肠毒素有共同抗原 75 分LT 和LT LT 组成 B亚单位 受体GM1A2 与B亚单位结合A1 毒素的活性部分作用机制 B识别受体 A进入细胞 A1激活腺苷酸环化酶 ATP转化cAMP 导致小肠液分泌过度 超过重吸收能力 引起剧烈腹
4、泻 A亚单位 b 耐热肠毒素 stableenterotoxin ST ST分STa和STb两型 STa与人类疾病有关 ST是通过激活鸟苷酸环化酶 使GTP转化为cGMP 导致小肠液吸收减少而腹泻 B 定居因子 colonizationfactor 粘附素 一种特殊的菌毛 2 肠侵袭型大肠埃希菌 EIEC 侵犯较大儿童和成人 症状类似菌痢 侵袭力与含编码侵袭性pINV基因的一种大质粒 120 140MD 有关 3 肠致病型大肠埃希菌 EPEC 婴幼儿腹泻的主要病原菌 病菌在小肠粘膜表面大量繁殖 致细胞结构破坏 导致严重腹泻 步骤 1 Bfp介导菌与细胞的疏松粘附2 信号传递 eaeA基因活化3
5、 紧密粘附素介导菌与细胞的紧密结合 4 肠出血型大肠埃希菌 EHEC 致病因子 Vero毒素紧密粘附素所致疾病 症状轻重不一 严重者并发溶血性尿毒综合征 HUS 死亡率10 5 肠集聚型大肠埃希菌 EAEC 婴幼儿持续性腹泻毒素为肠集聚耐热毒素 EAST 三 微生物学检查 一 细菌的分离鉴定1 标本 肠道外感染 中段尿 血液 脓液 脑积液等肠道感染 粪便2 分离培养与鉴定 致病性大肠杆菌引起的腹泻 EAEC小肠婴儿持续型腹泻侵袭和毒素 四 防治原则菌毛疫苗在家畜已成功高卫生标准防止水 ETEC 肉类和牛奶 EHEC 的污染耐药普遍 根据药敏结果选用药物 在环境和食品卫生学上 常被用作粪便污染的
6、检测指标 3个大肠菌群 1L饮水 100个细菌总数 1ml饮水 卫生学指标 大肠菌群指数 每1000ml水中大肠菌群数 我国饮用水卫生标准 细菌总数 每1ml或1g样品中细菌总数 在分子生物学和基因工程实验中 大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象 重要的实验材料和研究对象 志贺菌属 Shigella 通称痢疾杆菌 包括4群 近50种血清型 年病例 2亿 死亡达65万例 发病前5 死亡前十一 生物学特性1 形态与染色 G 中等大小杆菌 无芽胞 无荚膜 无鞭毛 有菌毛2 培养特性 S S平板上无色 透明菌落3 生化反应 不发酵乳糖宋内志贺菌能迟缓发酵乳糖 4 抗原构造与分类 该菌有O和K两种Ag
7、据O抗原可将该菌分为4群 50个血清型 A群 痢疾志贺菌 有10个血清型B群 福氏志贺菌 有13个血清型C群 鲍氏志贺菌 有18个血清型D群 宋内志贺菌 只有1个血清型我国以福氏多见 其次是宋内 双糖铁培养基和动力实验结果A 大肠埃希菌B 志贺菌C 阴性对照 二 致病性 一 致病物质 1 侵袭力 菌毛能粘附于回肠末端和结肠的上皮细胞 穿入固有层生长繁殖 引起炎症 入血罕见2 内毒素 endotoxin 作用于肠壁 使其通透性增高 促进内毒素的吸收 破坏肠粘膜 形成炎症 溃疡 呈现典型的脓血粘液便 作用于肠壁植物神经 使肠蠕动共济失调 肠功能紊乱 3 外毒素 志贺毒素 shigatoxin St
8、x 一个A亚单位与5个B亚单位构成 A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA 致使蛋白质合成中断 肠上皮细胞损伤 1 侵袭力 菌毛 有利于菌粘附至肠粘膜 2 毒素 加重局部和全身症状 内毒素 作用于肠壁 通透性增加 粘膜炎症 溃疡 局部 全身 内毒素血症 外毒素 A群1型 与内毒素协同作用 里急后重 二 所致疾病痢疾志贺菌感染病情一般较重 宋内志贺菌多引起轻型感染 福氏志贺菌感染易转为慢性 1 急性菌痢 acutebacterialdysetery 常有发热 腹痛 里急后重 粘液脓血便等典型症状 中毒性菌痢 toxicbacterialdysetery 以小儿为多见 无明显消化道症状
9、全身中毒症状明显 死亡率高 2 慢性菌痢 chronicbacterialdysetery 10 20 急性菌痢患者可转为慢性 症状常不典型 易误诊 临床表现 急性细菌性痢疾 急性典型 发热 腹痛 脓血粘液便 急性非典型 小儿 中毒型成人 易误漏诊 慢性细菌性痢疾 病程迁移二月以上 三 免疫性以消化道粘膜表面的SIgA为主 病后免疫期短 四 微生物学检查1 细菌的分离鉴定 取脓血粘液便及时送检或保存于甘油缓冲盐水中 脓血粘液便S S平板鉴定生化反应血清学鉴定2 快速诊断法 荧光菌球法 协同凝集试验 及时送 暂用3 甘油缓冲水保存 S S平板 无色透明小菌落 血清学反应 玻片凝集 明确诊断 分离
10、培养 新鲜脓血便 肛拭 双糖培养基 生化反应 快速诊断 荧光菌球试验 协同凝集试验 五 防治原则注意4F 尤其饮食从业人员Sd活疫苗 FS双价菌苗等多种药物可选择 但注意多重耐药菌株的出现 沙门菌属 Salmonella 肠道沙门菌 6个亚种 2500多血清型2种邦戈沙门菌 19型对人类致病的主要有引起肠热症的伤寒 甲乙型副伤寒沙门菌 引起食物中毒或败血症的鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌 猪霍乱沙门菌等 8000万病例 年一 生物学性状1 形态 染色 G 中等大小杆 有周鞭毛 有菌毛 2 培养特性 S S平板上 中等大小 半透明 S型3 生化反应 对鉴定本菌属有重要参考价值 4 抗原构造 是分类的主
11、要依据 主要有O和H两种抗原 少数有Vi抗原 OAg 可将菌分为42组 产生IgM类Ab 常见沙门菌的主要生化特性 HAg 可将组内细菌分为不同的种或型 产生IgG类Ab 分为 1 第I相HAg 特异性高 以a b 2 第II相HAg 特异性低 以1 2 ViAg 有助于带菌者的检测 伤寒杆菌的表面抗原 Vi抗原 抗原性弱 刺激机体产生短暂低效价抗体伴随活菌一起存在 测定Vi抗体有助于检出带菌者 因为 所以 本质 5 抵抗力 较差 二 致病性 一 致病物质1 侵袭力 菌毛粘附M细胞 输入沙门菌侵袭蛋白 耐酸应答基因 形成 不完全吞噬 2 内毒素 体温升高 白细胞下降 中毒休克等 3 肠毒素 个
12、别可产肠毒素 类似大肠杆菌肠毒素 二 所致疾病1 肠热症 entericfever 伤寒和副伤寒 由伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌引起 1 致病物质 侵袭力 O抗原 Vi抗原M细胞 毒素 内毒素 2 所致疾病 伤寒副伤寒 食物中毒 败血症 外毒素 肠毒素 菌经消化道 胃酸 机体抵抗力 在肠壁固有层被巨噬细胞吞噬后继续生长繁殖 经胸导管入血第一次菌血症 发热 不适 全身痛等症状 经血入肝 脾 肾 胆囊等器官并生长再次入血 引起第二次菌血症 持续高热 相对脉缓 肝脾肿大 玫瑰疹 白细胞下降 全身明显中毒等典型症状 胆囊中的菌通过胆汁入肠道 再次侵入肠壁 致 型超随粪便排出敏反应 局部坏死和溃疡 重者肠出
13、血或肠穿孔 胆囊 肠道 粪排菌皮肤 血拴出血 玫瑰疹肾 尿肝脾 肿大骨髓 受抑制 伤寒和副伤寒的致病过程 伤寒和付伤寒杆菌 小肠上皮粘膜 肠系膜淋巴结 固有层淋巴结 进入血液 再次进入血液 第一次菌血症 第二次菌血症 2 胃肠炎 entrocolitis 食物中毒 常由鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌引起 多为集体中毒 一般恢复快 最常见的沙门菌感染3 败血症 septicemia 多见于儿童及免疫力低下的人 常由猪霍乱沙门菌 丙型副伤寒沙门菌等引起 症状严重 4 无症状携带者 asymptomcarrier 1 5 的患者 症状消失后1年内仍可检出菌 三 免疫性病后有较牢固免疫力 主要
14、为细胞免疫 胃肠炎的恢复与局部的SIgA有关 四 微生物学检查 一 细菌的分离鉴定 1 取标本 据病程不同可分别采血 骨髓 尿或粪便作标本 伤寒和付伤寒食物中毒败血症第1周取静脉血可疑食物血第1 3周取骨髓液呕吐物第2周起取粪 尿粪 微生物学检查 查病原体 标本 SS平板 生化反应 血清学鉴定 双糖发酵等 玻片凝集试验 2 分离鉴定 标本接种于S S平板 37oC24hr后 挑无色半透明的菌落 转种到双糖铁培养基 半固体培养基 并作五管糖发酵及血清学鉴定 也可做染色镜检 二 血清学诊断 肥达反应 Widaltest 查抗体1 原理 用已知伤寒沙门菌的O H抗原和甲型副伤寒沙门菌 肖氏和希氏沙门
15、菌的H抗原与不同稀释度的待检血清作定量凝集试验 据抗体含量和动态变化以辅助诊断伤寒病原菌 2 结果判断参考 1 抗体含量 O效价 1 80H效价 1 160 2 动态观察 病程中效价依次升高或恢复期效价增加 4倍者始有诊断意义 3 H O抗体在诊断上的意义 O抗体 IgM 出现早 维持时间短 半年左右 消失后不易受非特异性Ag刺激而短暂地重新出现 H抗体 IgG 出现较晚 维持时间长达数年 消失后易受非特异性Ag刺激而短暂地重新出现 判断 O抗体H抗体 可能感染伤寒或副伤寒 患伤寒的可能性不大 感染早期 或其他沙门菌感染 预防接种或非特异性回忆反应 4 少数病例始终为阴性 三 带菌者的检查 最
16、可靠的方法是分离出病原菌 ViAb 1 10为阳性 90 五 防治原则1 目前减毒活菌苗方面以Ty21a株较好 有效期至少3年 保护率69 2 治疗 氯霉素氨苄青霉素环丙沙星类 第11章弧菌属 Vibrio p 133 概述包括56种菌 其中12种可致病 最重要的是霍乱弧菌 副溶血弧菌 霍乱弧菌 Vibriocholerae 1817 1923年 共大流行6次 均起源于孟加拉1883年分离出霍乱弧菌 古典生物型1961年 第7次大流行 起源于印度尼西亚1905年分离到 即ElTor生物型1992年 印度和孟加拉出现O139 第8次 一 生物学性状1 形态染色 G 弧形或逗点状 单毛菌 无芽胞 有普通菌毛和性菌毛 2 培养特性 需氧 营养要求不高 耐碱不耐酸 最适pH8 8 9 0 碱性蛋白胨水或碱性平板上生长好 菌落透明或半透明 无色扁平 3 生化反应 分解多种糖 霍乱红反应 吲哚 5 抗原构造及分型 H抗原 特异性低O抗原 特异性高 可耐受100 C2h据O抗原可分为200多群 O 1群又分为3血清型注意 古典和ElTor2个生物型 以及O1396 抵抗力 耐碱不耐酸二 致病性 一
