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1、DNA和蛋白质技术 植物有效成分的提取（时间：45分钟 满分：100分）一、选择题(12小题，每小题4分，共48分)1下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是()A用兔的成熟红细胞可提取DNAB在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成紫色C用酒精进行提纯，原因是DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精DDNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强解析：选D兔属于哺乳动物，其成熟的红细胞中无细胞核，不适合作为提取DNA的材料；DNA溶液与二苯胺试剂经沸水浴会变蓝；DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，所以可用冷却的酒精来对DNA进行提纯；大多数蛋白质不能忍受6080 的高温，而DNA在80 以上才会变性
2、。矚慫润厲钐瘗睞枥庑赖賃軔朧碍鳝绢懣硯涛镕頃赎巯驂雞虯从躜鞯烧。2下列关于体外扩增DNA的叙述，正确的是()ADNA聚合酶只能从5端延伸DNA链BDNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸C扩增DNA利用了热变性的原理D扩增的对象是氨基酸序列解析：选CDNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从子链的3端延伸DNA链，因此DNA的复制需要引物，当引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合时，DNA聚合酶就能从引物的3端开始延伸DNA链，因此DNA的合成方向总是从子链的5端向3端延伸。PCR利用了DNA热变性原理，扩增的对象是脱氧核苷酸序列。聞創沟燴鐺險爱氇谴净祸測樅锯鳗鲮詣鋃陉蛮苎覺藍驳驂签拋敘睑
3、绑。3在植物有效成分的提取过程中，常用萃取法、蒸馏法和压榨法，下列关于这三种方法的叙述错误的是()A蒸馏法和萃取法都需要水浴加热B压榨法适用于易焦糊原料的提取，如柑橘、柠檬等C萃取法适用范围较广，一般原料颗粒小、萃取温度适宜、时间长，萃取效果好D三种方法中都有过滤操作过程解析：选A蒸馏法适用于提取挥发性强的芳香油，其操作过程中直接加热，不需要水浴加热，萃取法需要水浴加热。压榨法适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。萃取法适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中。三种方法中都有过滤操作过程。残骛楼諍锩瀨濟溆塹籟婭骒東戇鳖納们怿碩洒強缦骟飴顢歡窃緞駔蚂。4下列实验流程中，错误的
4、是()A鲜玫瑰花清水水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水玫瑰油B石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油C胡萝卜粉碎干燥萃取浓缩过滤胡萝卜素D挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵(果酒)醋酸发酵(果醋)解析：选C胡萝卜素的提取中，在浓缩前应先过滤，以除去萃取液中的不溶物。5以下关于猪血红蛋白提纯的描述，错误的是()A洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析：选D分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋
5、白质移动速度较快；血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况，并据此判断分离效果。酽锕极額閉镇桧猪訣锥顧荭钯詢鳕驄粪讳鱸况閫硯浈颡閿审詔頃緯贾。6多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95 下使模板DNA变性、解链55 下复性(引物与DNA模板链结合)72 下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，错误的是()彈贸摄尔霁毙攬砖卤庑诒尔肤亿鳔简闷鼋缔鋃耧泞蹤頓鍥義锥柽鳗铟。A变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，在细胞内也可利用解旋酶实现B复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成C延伸过程
6、中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高解析：选C变性中，利用95 的高温破坏氢键，DNA解聚，此过程在细胞内也可在解旋酶作用下完成；复性中，55 时引物与DNA模板链依据碱基互补配对原则结合；延伸中，需要四种脱氧核苷酸，不需要ATP；PCR技术扩增DNA片段时需耐高温的酶。謀荞抟箧飆鐸怼类蒋薔點鉍杂篓鳐驱數硯侖葒屜懣勻雏鉚預齒贡缢颔。7(四川高考)下列有关实验操作或方法所导致结果的描述，错误的是()A用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗可能会导致色素带出现重叠B用葡萄制作果醋时，若先通入空气再密封发酵可以增加醋酸含量提高品质C提取胡萝
7、卜素时，若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低D调查人群中色盲发病率时，若只在患者家系中调查将会导致所得结果偏高解析：选B用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗，经层析液扩散后得到的色素带会过宽，甚至可能会导致色素带出现重叠；醋酸菌为好氧菌，用葡萄制作果醋时，若先通入空气再密封发酵，会降低醋酸含量和品质；胡萝卜素不溶于水，微溶于乙醇(酒精)，易溶于石油醚等有机溶剂，因此若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低；调查人群中色盲发病率时，应该在人群中随机调查，若只在患者家系中调查，将会导致所得结果偏高。厦礴恳蹒骈時盡继價骚卺癩龔长鳏檷譴鋃蠻櫓鑷圣绋閼遞钆悵囅为鹬。8下列关于血红
8、蛋白的提取和分离操作的叙述，错误的是()A色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装B凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液C为加快凝胶膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾，通常只需12 hD在血红蛋白提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理，是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能解析：选B由于装填凝胶柱时用到的是商品凝胶，为干燥的颗粒，使用前需要用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，再用洗脱液进行充分洗涤平衡，使凝胶装填紧密，也可在沸水浴中加热膨胀，既可节约时间，也可除去凝胶中的微生物，排出胶粒内的空气。茕桢广鳓鯡选块网羈泪镀齐鈞摟鳎饗则怿唤倀缀倉長闱踐識着
9、純榮詠。9下列关于提取胡萝卜素实验流程的叙述，错误的是()A萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶B为了提高萃取的效率，可采用酒精灯直接加热的方法适当地提高萃取温度C萃取过程中在加热瓶口安装回流冷凝装置，是为了防止加热时有机溶剂的挥发D浓缩的过程是为了把萃取剂与胡萝卜素分开解析：选B胡萝卜素的提取过程中，不宜提高温度，更不能用酒精灯直接加热，宜采用水浴加热。10PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错误的是()鹅娅尽損鹌惨歷茏鴛賴縈诘聾諦鳍皑绲讳谧铖處騮戔鏡謾维覦門剛慘。A甲过程高温使DNA变性解旋，该过
10、程不需要解旋酶的作用B丙过程用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加C如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94 55 72 ”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%籟丛妈羥为贍偾蛏练淨槠挞曉养鳌顿顾鼋徹脸鋪闳讧锷詔濾铩择觎測。DPCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变解析：选B丙过程用到的酶是Taq DNA聚合酶，其特点是耐高温。11下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的是()A提取DNA或血红蛋白均可用猪的红细胞或鸡的红细胞B提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞C蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去
11、除溶液中的DNAD蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化解析：选D猪的红细胞中无细胞核，不能用于提取DNA；提取DNA需用蒸馏水涨破细胞，提取蛋白质可以直接用豆浆或研磨的大豆；透析法可除去相对分子质量小的杂质，不能除去DNA；用电泳的方法可将蛋白质、DNA进行分离纯化。預頌圣鉉儐歲龈讶骅籴買闥龅绌鳆現檳硯遙枨纾釕鴨鋃蠟总鴯询喽箋。12如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。对这些操作的目的，叙述正确的是()A是洗涤血细胞，去除血细胞表面的杂质B是溶解DNA，去除不溶于酒精的杂质C是溶解DNA，去除不溶于2 mol/L的NaCl溶液的杂质D是稀释NaCl溶液，去除不溶于低浓度NaCl
12、溶液的杂质解析：选C是释放核物质，是提纯DNA，去除溶于酒精的杂质，是稀释NaCl溶液，析出DNA。二、非选择题(共52分)13(13分)真核生物细胞内，大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起，难以分离。某生物兴趣小组为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究。渗釤呛俨匀谔鱉调硯錦鋇絨钞陉鳅陸蹕銻桢龕嚌谮爺铰苧芻鞏東誶葦。(1)分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法，如图是从各种物质之间_的差异角度开展研究：铙誅卧泻噦圣骋贶頂廡缝勵罴楓鳄烛员怿镀鈍缽蘚邹鈹繽駭玺礙層談。 a取鸡血细胞悬液10 mL，加蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒_(填“轻轻搅拌”或“
13、快速搅拌”)。过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中。擁締凤袜备訊顎轮烂蔷報赢无貽鳃闳职讳犢繒笃绨噜钯組铷蟻鋨赞釓。b沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻璃棒沿一个方向_(填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”)，同时不断收集析出的物质。贓熱俣阃歲匱阊邺镓騷鯛汉鼉匮鲻潰馒鼋餳攪單瓔纈釷祕譖钭弯惬閻。图中曲线是根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的，请据图分析：c如果只收集纤维蛋白，可采取的措施是_。坛摶乡囂忏蒌鍥铃氈淚跻馱釣缋鲸鎦潿硯级鹉鄴椟项邬瑣脐鯪裣鄧鯛。d先用饱和度40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白， 再在饱和度约为_的硫酸铵溶液中析出DNA(既保证DNA提取量较大又避免
14、其他杂质过多)，与此同时析出的物质还有_。蜡變黲癟報伥铉锚鈰赘籜葦繯颓鲷洁遲銻鹂迳睁張晕辯滾癰學鸨朮刭。(2)如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的两种办法是：将DNA与球蛋白的混合物加入到_中，收集再次析出物；用_处理溶有DNA与蛋白质的溶液。買鲷鴯譖昙膚遙闫撷凄届嬌擻歿鲶锖够怿輿绸養吕諄载殘撄炜豬铥嵝。解析：(1)分析曲线图可知，不同物质在不同饱和度的硫酸铵中析出的相对量有所差别，即分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质之间溶解度的差异角度开展研究：a.取鸡血细胞悬液10 mL，加蒸馏水20 mL，此时可以用玻璃棒快速搅拌，加速血细胞破裂。b.沿大烧杯内壁持续
15、、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，为了防止将DNA的絮状物搅碎，此时应用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，同时不断收集析出的物质。c.由图看出，纤维蛋白的溶解度最低，硫酸铵饱和度在20%之前已经开始析出；在硫酸铵饱和度为30%时析出最快，说明此时的溶解度最低，且超过30%后，球蛋白也将逐渐析出，因此如果只收集纤维蛋白，可以在硫酸铵饱和度达到30%之前收集析出物。d.由图看出，DNA在饱和度约为50%的硫酸铵溶液中溶解度最小，与此同时析出的物质还有球蛋白，只是球蛋白析出量较少。(2)如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可将DNA与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中，由于DNA不溶于酒精，而其他杂质可溶于酒精，因此收集再次析出物；酶具有专一性，可以用嫩肉粉(木瓜蛋白酶)处理溶有DNA与蛋白质的溶液，此时
