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1、血血清清 谷谷氨氨酰酰转转移移酶酶 G GG GT T 速速率率法法 测测定定作作业业指指导导书书 1 1 实实验验原原理理 GGT 催化谷氨酰基转移给受体的反应 本法以 谷氨酰 3 羧基 对硝基苯胺为底物 将底物上的谷氨酰 基转移至受体双甘肽 生成对硝基苯胺和 谷氨酰双 甘肽 在 405nm 进行吸光度检测 吸光度升高的速率与 标本中 GGT 活力成正比 谷氨酰 3 羧基 对硝基苯胺 双甘肽 GGT 对 硝基苯胺 谷氨酰双甘肽 2 2 标标本本 2 1 病人准备 无特殊 2 2 类型 血清或 EDTA 血浆 3 3 标标本本存存放放 室温可保存 8 小时 2 8 可保存 3 天 20 保存至
2、少可稳定 1 周 4 4 标标本本运运输输 常温条件下保存运输 5 5 标标本本拒拒收收标标准准 细菌污染的标本 6 6 实实验验材材料料 6 1 试剂 利德曼 GGT 测定试剂盒 试剂1 6 64ml 试剂 2 6 16ml 6 1 1 试剂组成 试剂 1 R1 Tris 缓冲液 pH8 25 100mmol L 甘氨酰甘氨酸 150mmol L 试剂 2 R2 谷氨酰 3 羧基 对硝基苯胺 2 9mmol L 6 1 2 试剂准备 试剂为即用式 6 1 3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于2 8 若 无污染 可稳定至失效期 6 1 4 变质指示 当试剂有看得见的微生物生长 有浊 度 或者未开盖
3、的液体有沉淀时 表明试剂已变质 不 能继续使用 6 1 5 注意事项 试剂中含叠氮钠 0 95g L 为防 腐剂 不可入口 避免接触皮肤及粘膜 应采取必要的 预防措施使用试剂 6 2 校准品 使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准 具体参见生化检验校准品和 质控品 SOP 文件 6 3 质控品 具体参见生化检验校准品和质控品 SOP 文件 7 7 仪仪器器 奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8 操操作作步步骤骤 8 1 项目基本参数 参见AU1000 生化分析仪项目测定 参数 SOP 文件 8 2 仪器操作步骤 参见AU1000 生化分析仪操作规程
4、 SOP 文件 9 9 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0 质质量量控控制制 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析 以2S 为质控 警告限 3S 为失控限 绘制质控图 判断是否在控 质控规则参见室内质控操作规程 SOP 文件 1 11 1 计计算算方方法法 以 TruCal U 复合校准品 GGT 校准值 校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告 可靠的检测结果 不使用校准品进行GGT 活力检测 可以直接使用 A min 均值乘以计算因子得到结果 但是这样所得结 果的可靠性不如使用校准品 计算GGT 活力的计算因 子见下表 A
5、 A m mi in n 因因子子 G GG GT T 活活力力 U U L L 底物起始的反应 37 样品起始的反 应 37 405nm 1421 1158 1 12 2 参参考考值值范范围围 3 4 女性 7 32U L 男性 11 49U L 参考值因性别 年龄 饮食和地域的不同而有所差 别 根据好的实验室经验 每个实验室应建立自己的参 考值 1 13 3 临临床床意意义义 1 1 谷氨酰转移酶 GGT 又称 谷 氨酰转肽酶 存在于肝脏和胆汁中 是肝胆疾病最敏感 的指示物 因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值 因 此 谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病 结合丙氨酸氨基转移酶 门冬氨
6、酸氨基转移酶 胆碱酯 酶等其它酶 谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断 非常有价值 1 14 4 操操作作性性能能 14 1 线性范围 2 500U L 14 2 精密度 精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标 准方法 AU1000 批内精密度小于 3 总精密度小于 3 用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS 的规则 批内精密 xsCV 批间精密 xsCV 度 n 20 U L U L 度 n 20 U L U L 样品 1 39 90 992 48 样品 1 41 50 621 49 样品 2 73 60 851 16 样品 2 72 30 610 85 样品 3 2061 320
7、 64 样品 3 2040 740 36 14 3 方法学比较 本公司的试剂盒 y 与某商品化试 剂盒 x 同时对 78 个样品进行 GGT 活力检测 将检 测结果作方法学比较 其统计结果如下 y 1 00 x 1 00U L r 0 999 14 4 灵敏度 本试剂的检测限为2U L 14 5 病人结果可报告范围 2 500U L 1 15 5 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法对 GGT 活力检测的最大 500U L 当样品测定值超过上限时 应将样品用 9g L 氯化钠溶液作 1 5 稀释 重新测定 结果乘以 6 1 16 6 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7 方方法法局
8、局限限性性 17 1 本法对 GGT 活力检测的最大 500U L 当样品测 定值超过上限时 应将样品用9g L 氯化钠溶液作 1 5 稀释 重新测定 结果乘6 17 2 干扰物质 当样品中抗坏血酸浓度 1704 mol L 胆红素浓度 684 mol L 血红蛋白 浓度 4 00g L 甘油三酯浓度 22 6mmol L 时没有观 察到干扰 1 18 8 补补救救措措施施 当仪器发生故障时 迅速联系仪器厂 家进行维修 1 19 9 参参考考文文献献 1 Thomas L Clinical Laboratory Diagnostics 1st ed Frankfurt TH Books Ver
9、lagsgesellschaft 1998 p 80 6 2 Persijn JP van der Silk W A new method for the determination of gamma glutamyltransferase in serum J Clin Chem Clin Biochem 1976 14 421 7 3 Szasz G Gamma Glutamyltranspeptidase In Bergmeyer HU Methoden der enzymatischen Analyse Weinheim Verlag Chemie 1974 p 757 4 Fischbach F Zawta B Age dependent reference limits of several enzymes in plasma at different measuring temperatures Klin Lab 1992 38 555 61 2 20 0 其其他他 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按 检验科废物处置管理规定 执行
