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1、血血清清二二氧氧化化碳碳酶酶试试剂剂法法 测测定定法法 作业指导书作业指导书 1 1 实实验验原原理理 使用磷酸烯醇丙酮酸羧化酶 PEPC 和稳定的 NADH 类似物的酶检测终点法 磷酸烯醇丙酮酸 HCO3 草酰乙酸 H2PO4 草酰乙酸 NADH 类似物 H 苹果酸 NAD 类似物 上述反应会破坏下列平衡 CO2 H2O H2CO3 H HCO3 促使 CO2向 HCO3 的转换 由此可以检测出血清或 血浆中总 CO2的浓度 PEPC Mg2 MDH 在 405nm 或 415nm 波长处检测吸光度的下降 反映 还原型的辅因子 NADH 类似物的减少 和样品中的总二 氧化碳浓度呈比例 2 2
2、 标标本本 2 1 病人准备 无特殊 2 2 类型 血清 肝素血浆 3 3 标标本本存存放放 应尽快分离血清或血浆 并保存于 2 8 不可将标本暴露于空气 分离的样品需密闭保 存 防止二氧化碳的损失 并在收集后的最短时间内完 成检测 4 4 标标本本运运输输 常温条件下保存运输 5 5 标标本本拒拒收收标标准准 超时送检的 细菌污染的标本 6 6 实实验验材材料料 6 1 试剂 申能 CO2测定试剂盒 货号 1 0950 99 10 试剂 6 100ml 6 1 1 试剂组成 试剂 R 缓冲液 pH 7 5 磷酸烯醇丙酮酸 PEP 12 5mmol L 磷酸烯醇丙酮酸羧化酶 PEPC 400U
3、 L 苹果酸脱氢酶 MDH 4100U L NADH 类似物 0 6mmol L 活化剂 稳定剂 表面活性剂 防腐剂 适量 6 1 2 试剂准备 试剂为即用式 6 1 3 试剂稳定性与贮存 试剂避光保存于2 8 若无污染 可稳定至失效期 试剂不可冰冻 开盖后放 于仪器的冰箱中可以稳定30 天 6 1 4 变质指示 当试剂有看得见的微生物生长 有浊 度 或者未开盖的液体有沉淀时 表明试剂已变质 不 能继续使用 6 1 5 注意事项 应采取必要的预防措施使用试剂 6 2 校准品 建议使用DiaSys 公司提供的 TruCal Bicarbonate 标准品对自动分析仪进行校准 校准稳定 期 10
4、天 具体参见生化检验校准品和质控品 SOP 文件 6 3 质控品 每批样品检测时 建议使用DiaSys 公 司提供的 TruLab Bicarbonate 控制品进行内部质量控 制 具体参见生化检验校准品和质控品 SOP 文件 7 7 仪仪器器 奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8 操操作作步步骤骤 8 1 项目基本参数 参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪项目测定参数 SOP 文件 8 2 仪器操作步骤 参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪操作规程 SOP 文件 9 9 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0 质质量量控控制制 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控 DR00611998 p 318 329 2 Norris KA Atkinson AR Smith WG Colorimetric enzymatic determination of serum total carbon dioxide analyser Clin Chem 1975 21 1093 1101 3 US patent 5 801 006 2 20 0 其其他他 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按 检验科废物处置管理规定 执行
