《血尿液尿素氮BUN测定作业指导书》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血尿液尿素氮BUN测定作业指导书（13页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、血血尿尿液液尿尿素素氮氮 B BU UN N 测测定定作作业业指指导导书书 1 1 实实验验原原理理 Vitros BUN UREA 试剂是一种干燥 多涂层的 在 透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片 将一滴患者样品滴于干片上 分布层会使之均匀地分布 水和非蛋白质成份进入下面的试剂层 与尿素酶反应生 成氨 半透膜只允许氨进入呈色反应层 与指示剂发生 反应 经过一段固定的孵育时间后 通过测定呈色剂的 反射强度可间接求出尿素氮的含量 测定方式 比色法 波长 670nm 测试时间和温度 37 约 分钟 反应过程 尿素酶 非蛋白质成份 水 氨 二氧化 碳 氨 氨指示剂 呈色剂 2 2 标标本本
2、 2 1 病人准备 血清无特殊要求 要留取24 小时尿 样 2 2 样品类型 血清 肝素锂 钠和 EDTA 抗凝血浆 定时收集的 稀释后的尿样 2 3 标本采集与处理 2 3 1 血清和血浆样品 特别要注意的是 血清 肝素锂 钠和 EDTA 抗凝 血浆 不要用氟化钠作防腐剂 因为氟会抑制尿素酶 样品采集后 4 小时内要离心标本 吸出血清 处理样品 时要将其当成生物污染品 2 3 2 尿液样品 定时或随时采集的尿液 特别要注意 的是 不能使用以下防腐剂 冰醋酸 浓盐酸 硼酸 硼粉或甲酸钠硼酸 样品在测试前要冷藏 测试前将1 份样品加 20 份试剂级别的水进行稀释 将测试结果 乘以 21 就得到原
3、始样品中尿素氮的浓度 冷藏的样 品不能立即测试 处理样品时要将其当成生物污染品 3 3 标标本本的的存存放放 血清 血浆室温下最多1 天 4 8 冷藏最多 5 天 18 冷冻保存可长达 6 个月 尿液样品在测试前要冷藏 4 4 标标本本的的运运输输 样品要放在带盖的容器内以防污染和 蒸发 5 5 标标本本拒拒收收的的标标准准 污染 抗凝剂 防腐剂不符合要 求 标本放置时间过长 6 6 试试验验材材料料 6 1 测试 BUN 所需的物品包括 Vitros 化学定标物 Kit1 Vitros 特制质控液 Vitros 7 BSA 稀释液 强生厂家提供原装进口 试剂盒外包装上标明了测 试项目名称 试
4、剂标签代码 有效期限和储藏温度 6 1 1 试剂组成 干片成分 反应成份有尿素酶和氨 指示剂 其它成份有染色物质 粘合剂 缓冲剂 稳定 剂 表面活性剂 螯合剂及交叉连接剂 干片标记 试 剂盒外包装上标明了测试项目名称 试剂标签代码 有 效期限和储藏温度 6 1 2 试剂准备 从冰箱中取出干片盒 在将干片盒 打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到 室温状态 18 28 因此从冰箱中取出的试剂盒至少 要在室温下要放置60 分钟 而冷藏的试剂盒至少要在 室温下放置 30 分钟 去除内包装后立即将干片盒放入 仪器的储藏器中 在试剂盒达到室温后24 小时内必 须将其装入仪器中 6 1 3 试剂
5、稳定性与贮存 未开封的干片盒 存储在2 8 或低于该范围 在机内干片储藏器中的干片盒 在仪器上放置时间 不能超过 2 周 否则要更换新试剂 当仪器关闭时间不 超过 2 个小时时 可将干片盒留在储藏器中 出现以下 情形要做质控检测 仪器关闭时间超过2 小时 再次 装载从仪器储藏器中取出的干片盒 如果储藏正确 Vitros GLU 干片可保质到包装盒上标明的有效期限 参见 VITROS 250 干化学分析仪试剂稳定性及贮存 SOP 文件 6 1 4 变质指示 超过有效期的试剂干片不能使用 6 1 5 注意事项 为避免干片盒打开以前其内包装受损 不能摔打干片盒 不要让尖利物刺入内包装 6 2 校准品
6、 用 Vitros 化学定标物 Kit 1 血清 尿 液和脑脊液都用相同的定标液 不过各自的SAVs 值 不同 有关标准液的配制 使用及保存的配制 保存和 稳定的详情 可参阅VITROS250 干化学分析仪校准品 和质控品 SOP 文件 6 3 质控品 使用 Vitros 特制的质控物品 CSF 质 控检测用 Vitros 液体质控 若使用其它的一些质控物 品 当与别的 GLU 测试方法比较时就会出现差异 如 用人血清 血浆混合物分离制成的质控物品 含有高浓 度防腐剂 稳定剂和其它化学添加剂的质控物品 乙烯 乙二醇作稳定剂的质控物品不能使用 有关质控液的配制 保存和稳定的详情 可参阅 VITR
7、OS250 干化学分析仪校准品和质控品 SOP 文件 7 7 仪仪器器 美国强生厂家 VITROS250 全自动干式生化 分析仪 具体测试程序请参阅操作手册的介绍 8 8 操操作作步步骤骤 将试剂复温后直接放入仪器 样品编程 仪器 5 分后自动打印结果 具体测试程序请参阅 VITROS250 操作手册 SOP 具体定标程序 参阅操作手 册的相关章节内容 何时进行定标 在维护和保 养时更换了仪器的重要部件 质控结果持续超出 线性范围内时 详情参阅操作手册 管理条例上 指定的时间 在美国 CLIA 要求至少每 6 个月定标一 次 9 9 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0 质质
8、量量控控制制 操作建议 将质控物质当成生物污染 品来处理 将质控液与患者样品同时进行测试 每天至 少做一次质控以检测仪器运行状况 选择质控浓度来检 查与临床的相关性 其它详情参阅操作手册质控章节的 有关内容 有关质控操作的常规性条例可参照国际质控 检测 IQCT 的内容 在每一批标本中都应把质控血清 做为未知标本进行分析 以2S 为质控警告限 3S 为 失控限 绘制质控图 判断是否在控 质控规则参见生 化室室内质控操作规程 SOP 文件 1 11 1 计计算算方方法法 以用 Vitros 化学定标物校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告可靠的检测结 果 以 mmol L 报告 1 1
9、2 2 参参考考值值范范围围 国际单位 mmol L 血清 血浆 男性 3 2 7 1 女性 2 5 6 1 尿液 24h 尿样 428 714mmol day 此参考范围是测试3160 位健康成人 然后取靶值 附近 95 的结果计算所得 参考值因性别 年龄 饮食 和地域的不同而有所差别 根据好的实验室经验 每个 实验室应建立自己的参考值 1 13 3 临临床床意意义义 人体内氮排泄的主要途经是经肝脏合 成尿素氮 进入血液后最终由肾脏排出体外 因此当发 生肾小球肾炎 休克 尿道阻塞 肾盂肾炎和其它原因 引起的急慢性肾病时会导致血清尿素氮浓度升高 严重 充血性心脏病 营养过度 糖尿病型酮酸中毒
10、脱水和 胃肠道出血也会使尿素氮升高 而怀孕时蛋白质摄入减 少以及急性肝炎进行静脉滴注会导致尿素氮下降 1 14 4 操操作作性性能能 14 1 线性范围 血清 0 71 42 83mmol L 尿液 14 91 899 43 乘以稀释倍数 21 倍的结果 14 2 精密度 在 Vitros 250 生化仪上用质控液来测 精密度 结果反映了该方法的精密度 当仪器维护 周 围环境 干片处理和保存 质控液的复溶以及样品处理 等方面发生变化都会影响结果的重复性 日间精 密度 血血清清 x mmol L s mmol L CV 室间精密 度 n 20 天 x mmol L s mmol L CV 样品
11、1 n 79 5 60 08 样品 1 5 60 101 8 样品 2 n 78 16 40 19 样品 2 16 40 251 5 日间精 密度 尿尿液液 x mmol L s mmol L CV 室间精密 度 n 22 天 x mmol L s mmol L CV 样品 1 n 88 146 91 94 样品 1 146 93 322 3 样品 2 n 88 230 03 42 样品 2 230 07 253 2 日间精密度是将 2 至 3 份相同的样品在一天中运 行两次 然后对测试结果进行统计计算 室间精密度是用同一个批号的干片每周定标一次 然后对测试结果进行统计计算 14 3 方法学比
12、较 用 Vitros700 仪器和尿素酶 GLDH 参考方法分别 测试相同血清样品 对比结果显示Vitros 方法的准 确度良好 用 Vitros250 仪器与 Vitros700 仪器测试 相同的血清 尿液样品 对比结果显示Vitros250 方 法的准确度良好 血清 Y 1 00X 0 18 r 0 999 N 85 检测范围 0 8 41 7mmol L 尿液 Y 0 99X 7 14 r 0 999 N 88 检测范围 47 9 440 3mmol L 14 4 灵敏度 试剂检测下限为血清0 71mmol L 尿 液为 14 91mmol L 14 5 特异性 经测试 以下物质对Vit
13、ros BUN UREA 干片法均无干扰 偏差 36mmol L 时 在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医 生汇报 1 17 7 方方法法局局限限性性 17 1 本法线性上限血清0 71mmol L 尿液为 14 91mmol L 如果样品中 BUN 浓度超出系统的测试线 性范围 请按下列步骤进行稀释 血清或血浆用 Vitros 7 BSA 稀释 尿液用生理盐水 重新测试 将 测试结果乘以稀释倍数 就得到原始样品中GLU 的浓 度 17 2 干扰物质 铵离子会使样品中尿素氮的测定结果升 高 我们对 Vitros BUN UREA 方法的干扰物质进行了 筛查 以下物质在表中所示浓度会引起一定的偏差 当 血红蛋白为 500mg L BUN 浓度为 10mmol L 时可产生 0 4mmol L 的干扰 有些药物和患者的自身状况也会 影响 BUN 的测试值 1 18 8 补补救救措措施施 仪器出了故障可联系仪器厂家 进行 紧急修理 如一时不能修好 用OLYMPUS AU1000 生 化分析仪测定病人标本 1 19 9 参参考考文文献献 强生厂家提供的方法学手册 2 20 0 其其他他 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按检验科废物处理 SOP 文件处理
