《（精品教育）拓展视野 核移植技术发展简史》由会员分享，可在线阅读，更多相关《（精品教育）拓展视野 核移植技术发展简史（34页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 传奇的克隆神话逐步成为现实 克隆动物 动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 思考： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养、 植物体细胞杂交 强调： 动物细胞培养技术是其他动物细 胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内 取出相关的组织，将它分散成单 个细胞，然后，放在适宜的培养 基中，让这些细胞生长和增殖。 1、概念： 2、过程 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 (分散的单个细胞） 剪碎 胰蛋白酶 细胞贴壁过程 接触抑制 胚胎
2、或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 剪碎 胰蛋白酶 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 原代细胞 稀释、分离 传代培养 胰蛋白酶 传代细胞 原代培养 将动物组织取出来后，先 用胰蛋白酶等处理分散成单 个细胞，然后配制成细胞悬 液，再放入培养瓶中初次培 养的过程。 传代培养 将原代培养的细胞定期 用胰蛋白酶处理，配制成细 胞悬液，然后分瓶继续培养 的过程。 传代10代后，细胞增殖逐渐减慢，大部分 细胞衰老死亡。少数细胞存活到50代左右 。1050代间，部分细胞核型可能发生变化 ，甚至突变为癌细胞 所以目前使用的细胞，通常为10代以内， 以保持细胞正常二倍体核型。暂时不用可 低温保存（液氮） 细胞 悬浮 液
3、 10代 细胞 分割培养物， 再次培养 原代培养 传代培养 如何界定原代培养和传代培养； 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 探究： 多细胞动物和人体的细胞都生活 在内环境中，根据你所学的知识 ，认为体外培养细胞应该模拟内 环境的哪些内容呢？ 1、无菌、无毒 2、全部的营养物质 3、适宜的温度和PH值 4、必要的气体条件 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 3、条件： 维持培养液的PH 为什么对动物细胞进行培养时通常要 添加血清？ 有些氨基酸（必需氨基酸
4、）动物细胞本身 不能合成必须由培养液提供。 血清中还含有多种未知的活性物质，能促 进细胞的生长、增殖和贴附。 4、应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗 、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物 质，判断某种物质的毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究 ，为治疗和预防疾病提供理论依据 细胞的全能性 细胞株、细胞系植株 培养结果 细胞或细胞 产物获得 快速繁殖、培育 无病毒植株等 培养目的 动物血清植物激素 培养基特有成分 液体培养基固体培养基培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养植物组织培养比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 探究 1、植物组织培
5、养过程要将组织分散成单个细胞吗？ 、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞吗？ 、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ 、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ 、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质 是什么成份？ 没有 是 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 、细胞膜的主要成份是什么？ 、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散 成单个细胞要注意什么问题呢？ 、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼 龄动物的组织或
6、器官，请解释原因？ 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.27.4，此环境下胃蛋白 酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛 探究 11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂 就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培 养，让细胞继续增殖。 这样的过程叫做传代培养
7、 探究 14、如何理解原代培养和传代培养？ 15、传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ 16、有些为何能一直传下去吗？ 17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？ 18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养 ，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不都能 发生突变，朝着癌细胞方向发展 不是 保存10代以内的细胞，因为1050代部分细胞的细胞核 型可能发生变化，有少部分遗传物质发生改变，发生突 变向癌细胞方向发展。 探究 应用: 烧伤病人的治疗通常是取 烧伤病人的健康皮肤进行 自体移植，但对于大面积 烧伤病人来讲，健康皮肤 很有限，请同学们想一想 如何
8、来治疗该病人？ 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得 足量的细胞后再移植 动物细胞培养 二、动物细胞核移植技术和克隆动物 完整动物个体 全能性受限，分 化潜能变弱 核移植 克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组 并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚 胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 1 动物细胞核移植概念： 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 易 难 细胞分化程度低，恢复全能 性容易 细胞分化程度高，恢复全能 性容难 高产奶牛（供体） 采集卵母细胞体外培养到 减数第二次分裂 M期卵母细胞（去核） 去核的卵母细胞 取体细胞 供体细胞培养 将供体细胞注入去核
9、卵母细胞 用物理或化学方法激活受体细胞，使其 完成细胞分裂和发育进程 将胚胎移入受体母牛内 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 二 体细胞核移植过程 探究 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵 母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵 母细胞的核？ 为使核移植的胚胎或动物的 遗传物质全部来自有重要利用价 值的动物提供的体细胞。 培养的动物细胞一般当传代至10 50代左右时，部分细胞核型可能会 发生变化，其细胞遗传物质可能会发 生突变，而10代以内的细胞一般能保 持正常的二倍体核型。 2.用于核移植的供体细胞一般都选 用传代10代以内的细胞，想一想，这是 为什么？ 3.你认为用上述体细胞核移植方法生产 的克
10、隆动物，是对体细胞供体动物进行 了100%的复制吗？为什么？ 绝大部分DNA来自于供体细胞核，但 其核外还有少量的DNA，即线粒体中的 DNA是来自于受体卵母细胞。 核供体动物生活的环境与克隆动物所生 活的环境不会完全相同 3体细胞核移植技术的应用前景： 1.在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的 进程 2.保护濒危物种 3.医药卫生领域生产医用蛋白质及组织 器官的移植 4.了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究 疾病的发展过程和治疗疾病 细胞 悬浮 液 10代 细胞 50代 细胞 无限传 代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 如何界定原代培养和传代培养；细 胞株和细胞系？ 遗传物质改变 遗传物质未改变 动物细胞培养不能 最终培养成生物体
