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1、血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 目的 1、掌握电泳基本原理及等电点的概念； 2、掌握醋酸纤维素薄膜电泳的基本操作技术，了解血 清蛋白质的组成。 原理 带电质点在电场中向其电性相反一极移动的现象称 为电泳。 蛋白质的等电点（PI）：蛋白质在某种溶液中所带 正负电荷量相等，这种溶液的pH值即此蛋白质的等电 点。 将蛋白质置于pH比其等电点更高的缓冲液中，它 们将形成带负电荷的质点，在电场中均向正极移动。 电泳速度的影响因素： 电场力FqE；阻力f6r 当质点在电场中作稳定运动时：FF即： qE6r 即：与q成正比，与r成反比。分子量小、带电 荷多的蛋白质移动速度较快；分子量大、带电荷 少的移动较慢。
2、 白蛋白 1球蛋白 2球蛋白 球蛋白 球蛋白 点样处 步骤 1、醋酸纤维素薄膜的准备。 取醋酸纤维素薄膜一张，在其毛面的一端（负极侧 ）1.5cm处，用铅笔轻划一横线作点样标记，编号， 并标明正、负极后将醋酸纤维素薄膜置于巴比妥-巴比 妥钠缓冲液中浸泡，充分浸透（5min）后取出，夹于 滤纸中间轻轻吸去多余的缓冲液。 2、点样 用盖玻片（或胶片）的截面均匀蘸取新鲜血清，在 醋酸纤维素薄膜毛面的点样标记处进行点样，注意点 样时血清不要蘸取过多，不可重复点样。 4、染色 电泳完毕后，用镊子将醋酸纤维素薄膜取出，直接 浸入盛有氨基黑10B染色液的培养皿中，浸泡5min后 ，取出，用自来水冲洗，再分别
3、放入漂洗液1、漂洗 液2中漂洗数分钟，至背景无色后取出。 3、电泳 将醋酸纤维素薄膜毛面向下平直贴于电泳槽的支 架上，稳压90V，电泳45min。 实验报告的书写 1、实验名称，指导教师 2、实验目的 3、实验原理 4、实验步骤 5、实验结果（真实） 6、实验讨论 7、实验结论 吸量管的操作 首先选取合适的吸量管，使用时操作者左手持橡皮 球，右手持吸量管上端，将吸量管浸入液体内，不要 过深或过浅。用橡皮球吸取液体至所需刻度上方时， 立即用右手食指按住管口。将吸量管下端提出液面， 慢慢放开食指使用液面下降至所需刻度处。以吸量管 尖端接触瓶壁，去除多余液体。然后将吸量管插入另 一容器中，再放开食指，使液体流出。 注意：观察刻度时，吸量管保持垂直状态，吸量管的 刻度面对操作者，弧形液面与刻度成切线。
