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糖酵解中间产物的鉴定 目的 1.通过本实验对糖酵解过程进一步加深理解。 2.通过一碘醋酸和硫酸肼的作用,了解使中间产物堆 积的方法在研究中间代谢的意义。 原理 步骤 1. 肝匀浆的制备 取兔肝3g剪碎,在研钵中先加Krebs-Ringer缓冲液 2ml,研匀后再加5ml缓冲液,混匀。 2. 取试管3支,编号后按下表操作: 1管2管3管 Krebs-Ringer缓冲液2ml2ml2ml 碘醋酸10d10d- 硫酸肼10d10d- 三氯醋酸25d- 肝匀浆15d15d15d 摇匀,37水浴50分钟 1管2管3管 碘醋酸-10d 硫酸肼-10d 三氯醋酸-25d25d 摇摇匀,静置5分钟钟,分别过滤别过滤 ,各收集滤滤液约约1ml 1管2管3管 滤液1ml1ml1ml 0.75N NaOH0.5ml0.5ml0.5ml 二硝基苯肼10d10d10d 摇摇匀,37 水浴5分钟钟 0.75N NaOH3.5ml3.5ml3.5ml 摇摇匀,观观察颜颜色