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1、单克隆抗体下游分离制备工艺手册 提供全球领先的过滤、分离、纯化技术、产品和平台 Filtration.Separation. Solution.SM 2 目录 一除菌及除支原体过滤技术. 二深层过滤技术. 三切向流超滤技术. 四层析纯化技术. 五除病毒过滤技术. 六一次性系统技术. 七颇尔中国生命科学研究中心. 八颇尔验证服务. 04-06 07-09 10-14 15-18 19-20 21-22 23 23 （一）除菌过滤及除支原体过滤技术 微生物的控制 4 除菌过滤在单克隆抗体的下游工艺的应用上可以分为气 体除菌和液体除菌两大部分。 单抗生产中气体除菌过滤器的选型 气体除菌主要应用于生物
2、反应器的进气及排气过滤，各 种储罐及配料罐的呼吸器。目前主要的过滤膜材质为 PTFE(聚四氟乙烯)。颇尔公司的PFR系列双层0.2um滤 膜过滤气体的精度最高可达到0.003um。该过滤器用于 从空气和蒸汽中甚至在湿润或者潮湿的气体中完全去除 细菌、病毒和其他颗粒。 颇尔公司的CPFR系列双层滤芯的支撑层由于采用了经 过耐老化处理的PP-聚丙烯材质，因此可长期在100度 高温下使用，非常适合在带电夹套的呼吸器上的使用。 颇尔公司还能提供全四氟材料（支撑层也为聚四氟）的 滤芯，用于氧气、臭氧的强氧化性气体的过滤。 05 1 2 3 PFR AB型滤芯订购信息 Pall产品型号： ABPFR PV
3、 4 仅AB 05型滤芯 5 仅AB 1,2,3型滤芯 H4硅胶 双形圈，卡口，平端 双形圈，卡口，带翅 片 127mm(5 in.) 254mm(10 in.) 508mm(20 in.) 762mm(30 in.) 1016mm(40 in.) 形圈 材质 标称 长度编码类型编码编码 24 75 CPFR订购信息 Pall产品型号：ABCPFRPV 05 1 2 3 H4硅胶 (也可使用 其它材质) 双形圈，卡口，平端 双形圈，卡口，带翅 片 125mm(5 in.) 254mm(10 in.) 508mm(20 in.) 762mm(30 in.) 形圈 材质 标称 长度编码类型编码编码
4、 7 2 Pall 产品型号 MCY1110PFRPH4(1) MCY2230PFRPH4(1) MCY3330PFRPH4(1) MCY4440PFRPH4(1) MCY4463PFRPH4(1) SBF1PFRPH4 SLK7001PFRP SLK7002PFRP PFR其它型号滤芯订购信息 5 单抗生产中液体过滤器的选型 MachV不对称结构，Ultipleat超级打褶，小核设计 0.2m不对称PES膜材 经验证对B.diminuta的去除6LRV 水通量20 L/min 100 mbar 广泛的pH兼容 可进行完整性测试 有验证文件 Ultipleat超级打褶 充分的除菌过滤验证 双层
5、PES膜材，上游0.65um PES高度不对称膜， 下游0.2um对称PES膜 宽广的pH 兼容性 水通量12L/min 100mbar 107/cm2 缺陷型假单胞杆菌挑战，100%截留 Supor EKV 缓冲液除菌过滤的首选 Supor UEAV 生物负载控制及常规缓冲液过滤 10 in.UEDT膜过滤面积0.95 m，Ultipleat超级打 褶, 小核设计 上层 0.2 mm不对称PES，MachV不对称结构 下层20.1 mm PVDF 对支原体的去除效率 10 LRV 水通量2.7 L/min/100 mbar 经过充分的验证 可干湿两态灭菌 Fluorodyne EX EDT
6、专用培养基支原体的过滤 过滤精度0.2um，双层PVDF膜材 107/cm2 缺陷型假单胞杆菌挑战，100%截留 安全性高 最低吸附 经过充分验证 Fluorodyne II DFL 终产品除菌过滤的传统选择 10 in. UEDF过滤面积1.1 m， Ultipleat超级打褶， 小核设计 上层0.2 mm不对称PES膜材， MachV不对称结构 下层 0.2 mm PVDF膜材 100%截留缺陷型假单胞杆菌 水通量11 L/min/100 mbar (7.6 lpm/psi) 可干湿两态灭菌 Fluorodyne EX EDF 中间产品的除菌过滤 颇尔过滤器设计三大特点及优势 MachV不
7、对称膜结构 Ultipleat超级打褶 小核设计 6 微生物控制过滤器的定位与选择 生物负载的控制 Supor UEAV 层析柱保护 首选 缓冲液过滤 首选 超高流速 超高容污 有效除菌声明 支原体控制 Fluorodyne II DJL 高流速 与UEAV 预过滤结合 有较好的通量 Fluorodyne EX EDT 1010支原体去除 Nylon66NT 绝对支原体去除 除菌级过滤 Supor EKV 高流速 优秀的生物相容性 处理常规溶液 Fluorodyne EX EDF 高流速 超高通量 干湿两态灭菌 Fluorodyne DFL 高通量 低收咐 终产品除菌的传统选择 KM2KM5K
8、A02KA1KA2KA3KA4AB1-4NP6-8 Supor UEAV 备注：具体产品选型和订购信息请直接联系颇尔公司当地销售。 Supor EKV Fluorodyne II DFL Fluorodyne EX EDF Fluorodyne EX EDT KM2: 实验室用针筒式滤器，最小处理样品100ml； KM5: 小型囊式滤器，处理样品体积50ml至2L KA02: 小型中式囊式滤器，处理样品体积2L至50L KA1-4：囊式滤器， 处理体积30L至1000L AB1-4:常规滤芯，10in.至40in. NP6-8:一次性囊式滤器， 内置AB滤芯 订购信息 7 （二）深层过滤技术细
9、胞培养液的澄清 细胞培养液的澄清是单抗分离纯化的首要步骤，用简单 的操作快速去除细胞和细胞碎片。吸附DNA和宿主细 胞蛋白质是这个阶段过滤分离的主要目的。通常CHO 培养的细胞培养液的细胞密度在27106/ml，细胞存 活率在2598%，浊度在5001000NTU。如果培养 体积在1000L以内可以直接选择深层过滤技术来处理， 如果培养体积较大可以选择离心和深层过滤结合的方式 来处理料液。 颇尔公司的Seize深层过滤的滤板由硅藻土、珍珠岩加 助滤剂混合而成，其中又分为P系列，HP系列和Bio系 列。 根据滤饼的形式又分为 Supra disc I, Supra disc II 和 Stax
10、Capsules 三种，可分别与不锈钢的滤壳或Stax不 锈钢的底架整合一起使用。 先进的制药级 深层滤板 P系列HP系列Bio系列 生物制药 产品过滤 高性能 细胞培养液 澄清 100%有机 滤器基质- 低产品吸附 (10种精度)(多层w/20+种精度)(2种精度) Supracap 60 1-3 升 3-100+ 升 50-2000+ 升 50-20,000+ 升 50-20,000+ 升 50-20,000+ 升 Supracap 100 Supracap 200 SupradiscSupradisc Stax 8 上层滤板：精度粗 上层滤板：精度粗 底层滤板：精度细 底层滤板：精度细
11、导流盘 P 系列深层滤板 深层滤板P级及HP级的精度选择 制药级 严格的原料和工艺控制 绝不使用回收材质做原料 严格的批间差异控制 覆盖各种滤板的验证指南 双层P级滤板组合 适合处理低存活率、高固液含量的细胞培养液 减少澄清处理工艺步骤 针对HP系列独立进行验证和发行验证指南 HP 系列深层滤板 Bio 20 Bio 10 PDK5 PDH4 PDE2 PDD1 K900P K700P K250P K200P K100P S80P KS50P SEK1P EKMP EKSP 0.10.51510 Micron(m) 典型渗透率（L/m 2/min at 1 bar） 渗透率-P系列 25501
12、00 9 抗体细胞澄清最佳选择Pall STAX深层过滤系统 膜堆选型推荐 抗体细胞培养液澄清膜堆可选择两级P系列单层膜或HP系列复合膜,典型选择如下： *过滤后浊度为经验值，因样品不同可能有差异，仅供参考。 型号膜堆 P系列单层膜K700P+KS50P两级 K900P+K100P两级 PDH4 PDK5 第一级15m,第二级0.5m 第一级20m,第二级1m 上层15m,下层0.5m 上层20m,下层1m 100-200L/M2 100-200L/M2 200-400L/M2 200-400L/M2 10NTU 10NTU 10NTU 10NTU HP系列复合膜 精度典型处理能力过滤后浊度*
13、 高处理量 (30-20,000L) 占地面积小1 m2 (10 ft2) 操作简易 线性放大 使用成本低 膜堆尺寸 Stax囊式膜堆(5020,000+L) 小型囊式膜堆 中型囊式膜堆 大型囊式膜堆 * EFA=有效过滤面积 (1)SL=单层Seitz深层滤板，如P- 系列和BIO-系列 (2)DL=双层Seitz深层滤板，如HP-系列 0.5m2(5.38 ft2)SL EFA 0.25m2(2.70 ft2)DL EFA 1.0m2(10.8 ft2)SL EFA 0.5m2(5.38 ft2)DL EFA 2.0m2(21.5 ft2)SL EFA 1.0m2(10.8 ft2)DL EFA 10 订购信息 Stax囊式膜堆单层滤板 编码 Pall产品型号SXS 产品编号示例: SXSPEKS404SP 编码 S M L 公称高度 58 mm (2.3in.) 81 mm (3.2in.) 129 mm (5.1in.) PEKS PEKM PEK1 P
