侵袭性真菌感染血清学检测

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1、侵袭性真菌病血清学检测的 应用价值 临床微生物专业组 侵袭性真菌感染因素增加 广谱抗菌治疗 骨髓和实体器官 移植 真菌检测技术 提高 AIDS 插管等侵袭性 治疗 IFD 肿瘤和免疫抑制 治疗 IFD血清学检测方法 真菌抗原、抗体、酶、代谢产物标本类型 真菌（除外接合菌 和隐球菌） (1,3)-D-葡聚糖（G试验）血清、血浆 曲霉 半乳甘露聚糖（GM）及烟曲霉抗体 （IgG、IgM、IgE） 血清、BAL（CSF ） 新型隐球菌荚膜多糖抗原（GXM试验）血清、CSF 念珠菌 甘露聚糖（M试验）、甘露聚糖抗体 （IgG、IgM） 血清、CSF 早期检测检测 联联合检测检测 连续检测连续检测 IF

2、I血清学检测的应用价值 病死率高，预后差 治疗：与时间赛跑 1. Garey et al. CID 2006;43:25-31; 2. Morrell et al. AAC 2005;49:3640-5 1美国单中心，157念珠菌菌血症2美国4中心，230念珠菌菌血症 IFI临床诊治的巨大挑战 G试验检测侵袭性曲霉感染（IA） 40名确诊或拟诊IA患者 敏感性 87.5% ,特异性 89.6%, PPV 70%，NPV 96.3% 其中确诊IA 100%敏感，拟诊IA 60%敏感 Pazos C, et al. J Clin Microbiol, 2005, 43: 299. Odabasi

3、Z , et al. Clin Infect Dis, 2004, 39: 199-205 确诊或拟诊IFI，平均比出现临床症状和体征早10d；阳性患 者中70%比临床表现早3天 早期检测检测 联联合检测检测 连续检测连续检测 IFI血清学检测的应用价值 单一检测有局限性 G试验假阳性影响因素 血液透析患者（纤维素膜） 细菌血症、肝硬化、小肠结肠炎 患者使用凝血因子、白蛋白、免疫球蛋白 抗肿瘤治疗：蘑菇多糖、裂褶菌多糖 手术中使用棉纱垫、棉拭子等 标本溶血、脂血、黄疸 标本污染（床边消毒纱布，实验室环境粉尘） 实验耗材：所有枪头、试管、玻璃管均应无热原 IV抗生素（-内酰胺类：AMC/SAM）

4、 患者使用阿莫西林/棒酸，哌拉西林/他唑巴坦 (D-葡聚糖存在于生产工艺中的一些例如纤维过滤膜的成分中) Kullberg BJ, Arendrup MC. N Engl J Med 2015;373:1445-56. Sulahian A et al. J Clin Microbiol 2014;52:2328-33. 单一检测有局限性 GM试验假阳性影响因素 抗菌药物：哌拉西林-三唑巴坦 采样：用药前，或在血药浓度较低时 高剂量使用激素 透析：不能清除大分子GM 化疗的严重黏膜炎的患者 谷类食物和脂质甜点中的GM抗原通过肠道入血 儿童和新生儿：假阳性83% 母乳或配方食品中双歧杆菌与GM有

5、交叉反应 交叉反应真菌：青霉、拟青霉、隐球菌、头状地霉、组织胞浆 菌等 接受心肺旁路手术 自身免疫性肝炎等免疫性疾病 接受白蛋白、免疫球蛋白和其他营养液治疗 9 Suhail Ahmad, Ziauddin U. Khan. Diagnostic value of DNA, (1-3)-D-glucan, and galactomannan detection in serum and bronchoalveolar lavage of mice experimentally infected with Aspergillus terreusJ. Diagnostic Microbiology

6、 and Infectious Disease 59 (2007) 165 171 单独检测： 联合检测： G和GM试验联合检测提高检测敏感性 血清 血清 敏感性特异性 Munoz P, Guinea J, Bouza E. Update on invasive aspergillosis: clinical and diagnostic aspectsJ. Clinical Microbiology and Infection, 2006, 12(s7): 24-39. G和GM实验联合检测能提高检测的特异性（Specificity） 和阳性预测值（PPV） GM实验G实验联合检测 收集北京

7、友谊医院2013年5月-2014年1月住院患者及健康 人共107例，包括: 念珠菌血症13例 危险因素组（临床诊断侵袭性念珠菌病或接受化疗恶性 疾病、留置深静脉置管等侵袭性念珠菌高危病人）63例 对照组（健康体检人群）31例 使用丹娜ELISA试剂盒进行检测血清甘露聚糖抗原（Mn） 及甘露聚糖IgG抗体（Mn-IgG抗体）。 念珠菌抗原抗体联合检测的研究 陈玲，王红，张淑文等.中国真菌学杂志，2014,9(6):325-330 念珠菌抗原抗体联合检测的研究 陈玲，王红，张淑文等.中国真菌学杂志，2014,9(6):325-330 Mn抗原Mn-IgG抗体 敏感度41.7%91.7% 特异度98

8、.8%52.8% 阴性预测值92.4%100% 阳性预测值100%27.5% 3、结论 甘露聚糖抗原在诊断念珠菌 血症时的特异度较高。 甘露聚糖IgG抗体在诊断念 珠菌血症的敏感性较高。 两者的联合检测可以适当提 高检测的敏感度及特异度， 有助于念珠菌血症的诊断。 种属G试验GM试验 Mn试验GXM试验 念珠菌属+-+- 镰刀菌属+- 隐球菌属 -+ 曲霉菌属+- 青霉菌属+ -（可有假阳性 ） - 接合菌纲 - 多种试验的联合检测，能够在早期快速、有效的确定菌属，提高检出率和准确性 四种抗原联合检测 有助于真菌种属的鉴别 Iain D. Page,Malcolm Richardson and

9、 David W. Denning. Antibody testing in aspergillosisquo vadis? Medical Mycology, 2015, 53, 417439 曲霉菌抗原抗体联合检测在 不同类型肺曲霉病中的价值 基于6.3万IA，24万CPA和88.7万ABPA患者的统计结果。 IACPAABPA GM62%23%0% IgG65%100%65% IgE0%66%100% 不同的检测方法联合检测 有助于诊断不同类型的曲霉病 抗原检测抗体检测结果判定 +深部感染 +- 早期感染，未产生抗体或 免疫力低下，无抗体产生 -+ 感染一段时间，抗原可能 分解，或者抗原

10、被抗体中 和 -非本检测项感染 抗原与抗体联合检测的意义 针对患者不同的病程，抗原、抗体的定量检测结果提高了阳性检出率 抗原、抗体联合检测有助于防止漏检 抗原、抗体的浓度变化能提示临床确定停药时间提供参考依据 真菌感染 G实验 筛查 抗原检 测 抗体 检测 早期检测检测 联联合检测检测 连续检测连续检测 IFI血清学检测的应用价值 强调连续2次阳性 强调连续2次阳性 强调连续2次阳性 JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, Oct. 2003, p. 45514558 抗体含量 (AU/mL) 甘露聚糖含 量(ng/mL) 急性粒细胞白血 病（粒缺病人） 白细胞数目 (103/mL) 连续检测与治疗方案的调整 及时使用抗真菌治疗 使抗原会很快消失。 可将抗体含量的变化 作为调整用药方案和 停药时间的参考。 血清学检测IFI的诊治中应用价值高，强调早 期检测、多种方法的联合检测，连续检测。 小 结