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1、2 3 2 6 1 $ h a n d o n gU n i v e r s i t yM a s t e r st h e s i s 论文题目：L e v a n 及硫酸化Ie v a n 的制备和抗肿瘤 活性的研究 S t u d yo nT h eP r e p a r a t i o no fL e v a na n d P o l y s u l f a t e dL e v a na n dT h e i r A n t i t u m o rE f f e c t 作 专 导 合作导师 2 0 1 0 年5 月2 5 日 l l I I I II1I I I Ir lr l l
2、r l lIIl Y 17 9 0 7 9 5 原创性声明 郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明 任由本人承担。 论文作者签名：一三塑 日 期：垄! ! ：竺：垄 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或
3、其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：姜；函导师签名： 3 糖类及其衍生物与肿瘤1 l 3 1 糖类及其衍生物与肿瘤免疫调节1 2 3 2 糖类及其衍生物与肿瘤血管生成1 3 4L e v a n 和多硫酸化L e v a n 抗肿瘤活性的分子基础1 4 4 1L e v 锄的分子结构1 4 4 2I , e v a n 与肿瘤1 4 5 本课题拟解决的问题1 6 第二章1 七w a l l 发酵条件的优化及分离鉴定1 8 1 材料18 1 1 式剂18 1 2 仪器18 2 方法18 2 1 种子的复苏与培养一1 8 2 2 发酵培养基的
4、优化及发酵1 9 2 3L e v a n 粗品除蛋白和核酸2 0 2 4 总糖含量的测定2 l 2 5L e v 锄单糖组成的分析2 2 山东大学硕士学位论文 3 结果2 4 3 1 种子的复苏2 4 3 2 培养基的优化2 5 3 3 胞外多糖的分离纯化和组成鉴定2 8 3 4 总糖含量的测定3l z I 讨论3 ：1 5 小结3 5 第三章L e V a l l 的水解和硫酸化衍生物的制备3 6 1 材料3 6 1 1 试剂3 6 1 2 仪器3 6 2 方法3 6 2 1 粗品l e v a n 的纯化。3 7 2 2P S L 的制备3 8 2 3L 的水解及分离一4 0 2 4 样
5、品的理化性质的测定4 1 3 结果4 3 3 1Q F F 分离l e 、v a n 4 3 3 2P S L 的制备4 4 3 3L 的水解及分离4 5 3 4 样品的理化性质的测定4 9 4 讨论5 0 5 小结5 2 第四章L e v a n 免疫调节活性和抗肿瘤活性组分的筛选5 3 l 材料5 3 1 1 试剂5 3 1 2 仪器5 3 1 3 试剂配制5 3 2 方法5 5 l I 山东大学硕士学位论文 2 1 细胞培养5 5 2 2 小鼠腹腔巨噬细胞增殖实验5 7 2 3 小鼠脾淋巴细胞增殖实验5 9 2 4 肿瘤细胞抑制实验5 9 2 5 人S K O V 3 卵巢癌细胞分泌V
6、E G F 的影响6 0 2 6 数据处理6 1 3 结果6 1 3 1 巨噬细胞的吞噬功能测定6 l 3 2 巨噬细胞活力的测定6 3 3 3 不同药物处理的巨噬细胞上清液对S K O V 3 增殖的抑制作用6 5 3 4 脾淋巴细胞增殖率的测定6 8 3 5S K O V 3 细胞抑制率的测定7 l 3 6S K O V 3 细胞V E G F 分泌的测定7 3 4 讨论7 6 5 小结7 8 第五章L e v a l l 和P S L 对免疫调节和血管生成相关因子的影响7 9 1 材料7 9 1 1 试剂7 9 1 2 仪器7 9 2 方法8 0 2 1L 广1 和P S L - 6 对
7、巨噬细胞分泌I L - 1 2 的影响8 0 2 2L 广l 和P S L 6 对巨噬细胞分泌T N F a 的影响8 2 2 3L 1 和P S L 6 对人S K O V 3 卵巢癌细胞分泌V E G F 的影响8 2 2 4 【广l 和P S L 6 对人S K O V 3 卵巢癌细胞M M P 2 表达的影响8 2 2 5 数据处理8 6 3 结果8 6 3 1L l 和P S L 6 对巨噬细胞分泌I L - 1 2 p 7 0 的影响8 6 3 2L 1 和P S L - 6 对巨噬细胞分泌T N F a 的影响8 8 3 3 【广1 和P S L 6 对人S K O V 3 卵巢
8、癌细胞分泌V E G F 的影响9 1 I 山东大学硕士学位论文 3 4L 广1 和P S L - 6 对人S K O V 3 卵巢癌细胞表达的抑制9 6 4 讨论9 8 4 1L 1 和P S L - 6 对巨噬细胞分泌细胞因子的影响9 8 4 2L l 和P S L - 6 对S K O V 3 分泌V E G F 和M M P 2 表达的影响。9 9 5d 、结1 0 1 第六章L e v a r l 和P S L 抗肿瘤活性的体内实验研究1 0 2 1 材料10 2 1 1 试剂10 2 1 2 仪器10 2 1 3 动物1 0 2 2 方法10 2 2 1L l 和P S L 6 对H 2 2 荷瘤小鼠生长的影响1 0 2 2 2 瘤块的病理切片1 0 3 2 3 小鼠外周血中I L - 1 2 的测定1 0 3 2 4 小鼠外周血T N F a 的测定1 0 4 2 5 肿瘤组织V E G F 表达水平的测定1 0 4 2 6 肿瘤组织M M P 2 表达水平的测定1 0 5 2 7 数据处理
