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1、 乐百氏（广东）饮用水有限公司微生物大样检测作业指导书总部文件编写人：陈爱矿版本号：01文件编号：HOD 02生效日期：2006.2.1修改内容版本号修改日期主要修改内容分发：签名：编写审核批准姓名 :陈爱矿黄志敏签署 :日期 :1 目的：对一定数量可能含菌但含菌数较少、检出率较低的透明状液体样品进行定性检测，以判断其是否带菌。2. 适用范围：适用于HOD工厂的成品水、空桶和聪明盖中微生物状况的评估。本文件取代目前工厂现有关于大样检测的作业指导书。3. 具体内容：3.1培养基的制备：抗臭氧型细菌大样检测液体培养基、抗臭氧型真菌大样检测液体培养基（广东环凯），大样培养基必须制备为双倍料培养基（双
2、倍料是除蒸馏水外，其余成分加倍）。按标签说明和使用要求，制备培养基，分装50mL于150或250mL的三角瓶中，。在121高压条件下灭菌15分钟，待用。3.2 空桶大样检测操作：3.2.1 桶的取样3.2.1.1 在灌装间，取冲洗消毒后灌装前的桶，迅速用已消毒的聪明盖人工封盖后标明工位编号带回化验室待检。3.2.1.2 取样要求，a、取样前必须用75%酒精消毒手部，保证无菌操作。b、封口所用盖须保证无菌。3.2.2 桶的检测3.2.2.1每个桶中加入150ml无菌水，手持空桶尽量平放，边旋转边摇动，使无菌水充分涤洗空桶内壁。整个涮洗过程大于20秒，使无菌水充分涤洗空桶内壁。 3.2.2.2 把
3、空桶中水样，分别注入50ml已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。 3.2.2.3 用50mL的无菌水代替样品作为空白对照样品 3.3盖的大样检测操作3.3.1 盖的取样：将500ml取样瓶（非玻璃材质且带盖），瓶口用牛皮纸包扎，在121下蒸汽灭菌15分钟。在落盖槽出口，用无菌镊子取两个盖，置灭菌的取样瓶中，然后用盖封紧，带回化验无菌间检测。3.3.2 盖的检测：在取样器中加入250ml无菌水，使聪明盖内外与无菌水充分接触，振荡均匀1分钟，制成样品。分别注入50ml上述样品置于已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。 3.4成品水大样检测操作：取50ml成品水于已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。 3.5培养：检测细菌，置于3537下培养24小时后观察；检测霉菌，置2832下培养48小时后观察。检测细菌时，如与空白对照比较出现混浊，则表明样品中存在细菌，越混浊，表明细菌数量越多；检测霉菌时，如出现团状絮状物，则表明样品中存在霉菌，絮状物越多，表明霉菌数量越多。Page 3 of 3
