《阿特拉津对非州爪蟾发育影响的分子毒理学研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《阿特拉津对非州爪蟾发育影响的分子毒理学研究（78页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、分类号：R 1 1 4 密级：公开 单位代码：1 0 4 2 7 学号：2 0 0 9 0 1 0 4 1 1 浠句乒学 硕士学位论文 阿特拉津对非洲爪蟾发育影响的分子毒理学研究 研究生姓名 导师姓名 学科、专业 所在学院 申请学位级别 答辩时问 苗春云 刘毅研究员 劳动卫生与环境卫生学 - 济皇三苎医学与生命科学学院 山东省医学科学院 。 一 医学硕士 2 0 1 2 年5 月 M o l e c u l a r s t u d y o nt h ee f f e c t so fa t r a z i n eo n 。墩卿 d e v e l o p m e n t a lt o x i
2、c i t yo Ix e n o P U Sl a e v i s d r o 一一一 - 一 - B y M i a o C h u n y u n U n d e rt h eS u p e r v i s i o no f P r o f L i u y i AT h e s i sS u b m i t t e dt ot h eU n i v e r s i t yo fJ i n a n I nP ar t i a lF u l f i l l m e n to ft h eR e q u i r e m e n t s F o rt h eM a s t e r D e g r
3、 e e o fM e d i c i n e U n i v e r s i t yo f J i n a n J i n a n ，S h a n d o n g ，P R C h i n a M a y ，2 0 1 2 导师简介 刘毅，男，1 9 5 3 年2 月生，党员，1 9 7 8 年8 月毕业于武汉医学院预防 医学专业，1 9 9 8 年作为高级访问学者赴美国耶鲁大学工作学习一年。现任山东 省职业卫生与职业病防治研究院研究员，硕士研究生导师。主要从事卫生毒理研 究和职业卫生管理工作。为首承担完成省级以上科研课题4 项；为首获省科学技 术进步二等奖1 项；为首获得省科技进步三等奖
4、1 项。在国内外专业刊物上发表 学术论文1 6 篇，副主编著作1 部，参编著作1 部；培养硕士生7 名。2 0 0 1 年 起享受国务院政府特殊津贴。为山东省济南市市中区1 6 届人大代表。现兼任中 华预防医学会劳动卫生与职业病分会副主任委员；山东省预防医学会劳动卫生职 业病专业委员会主任委员、山东省卫生法学会职业卫生法学专业委员会副主任委 员；山东省医药卫生重点学科卫生毒理学科负责人、山东省人大立法咨询专家、 山东省政府应急管理专家；国家自然基金评审专家、中国工业医学杂志编委、 中国卫生监督杂志编委；2 0 0 3 年被中共中央组织部授予全国防治非典型肺 炎工作优秀共产党员荣誉称号。 原创性
5、声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：意易虹H 期：翌上d 业 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解济南大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借鉴；本人授权济南大学可以将学位论文 的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或其他复制手段保
6、存论文和汇编本学位论文。 口公开口保密(年，解密后应遵守此规定) 论文作者签名沲 导师签名： 目录 中文摘要I I 英文摘要 主要符号表 前言1月U吾1 第一部分阿特拉津对非洲爪蟾生长发育和性腺发育的影响4 材料与方法4 结果6 讨论8 J 、结9 第二部分阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺敏感基因和细胞信号通路的筛选1 0 材料与方法1 0 结果1 7 讨 仑2 4 小结3 2 第三部分阿特拉津对非洲爪蟾肝脏相关基因表达的影响一3 3 材料与方法3 3 结果3 8 讨 仑4 2 小结一4 5 结论4 6 参考文献4 7 综j 盔5 2 攻读学位期间已发表论文5 6 致谢一5 7 阿特拉津对非洲爪蟾发
7、育影响的分子毒理学研究 研究生：苗春云 导师：刘毅研究员 专业：劳动卫生与环境卫生学 摘要 【研究目的】 本文将非洲爪蟾染毒不同浓度的阿特拉津，在2 个不同时间点进行取样， 分析和探讨阿特拉津对两栖类生存和发育的毒性。运用全基因组表达谱芯片技术 筛选性腺组织的敏感基因和对性腺产生发育毒性可能存在的细胞信号通路；运用 R e a lt i m eR T - P C R 技术分析阿特拉津对肝脏相关基因表达的影响，研究阿特拉津 对非洲爪蟾肝脏的毒性作用。运用以上两种方法初步探索阿特拉津对非洲爪蟾发 育毒性作用的机制。 【研究方法】 本次实验设对照组和4 个阿特拉津染毒组，分别是0 1 、l 、1 0
8、 和1 0 0 “L 组，每组随机挑选3 0 只非洲爪蟾蝌蚪。实验结束时，取非洲爪蟾的性腺和肝脏 组织，进行称重和基本形态观察，并迅速置于液氮中保存。运用非洲爪蟾全基因 组表达谱芯片和R e a lt i m eR T - P C R 技术，对性腺组织进行敏感基因和细胞信号通 路的筛选，对肝脏组织进行相关基因表达的研究。 【研究结果】 1 阿特拉津对非洲爪蟾一般生长发育情况的影响 阿特拉津对非洲爪蟾的体长、体重、性腺重没有显著影响( p ) 0 0 5 ) ， 0 1 、 1 、1 0 9 9 L 组的肝脏重量显著降低( p ( 0 0 5 ) ；1 0 、1 0 0 9 9 L 染毒组肝脏系
9、数有所 升高( p 0 0 5 ) ；0 1 和1 0 0 9 9 L 阿特拉津组的蝌蚪完成变态的时间较长于其他组， 但差异无显著性( p 0 0 5 ) ；变态完成后，性别比没有发生显著变化( p 0 0 5 ) ；0 1 、 1 、1 0 和1 0 0 9 9 L 剂量组均有雄性性腺出现不连续发育，存在不同程度的断裂。 I I 2 阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺敏感基因和细胞信号通路的筛选 通过G 0 分析，在分子功能、生物过程和细胞组成三个部分获得了差异基因聚 集的多条功能条目。通过P a t h w a y 分析，我们得到了6 条差异显著的细胞信号通路， 分别是精氨酸和脯氨酸能量代谢通路、
10、细胞周期通路、剪接体通路、碱基切除修 复通路、核黄素代谢通路和孕酮介导的卵母细胞成熟通路。 3 阿特拉津对非洲爪蟾肝脏相关基因表达的影响 阿特拉津使1 0 0 “g L 组雄性非洲爪蟾的A R 水平显著增高( p O 0 5 ) ；A t r a z i n ed i d n o tc h a n g et h es e xr a t i o ( p 0 0 5 ) ； A t r a z i n eg r o u pi n d u c e dt h em a l eg o n a d a lt oa p p e a ra b n o r m a ls e g m e n t s 2 T h
11、ee f f e c to fa t r a z i n eo nt h eX e n o p u sG e n ee x p r e s s i o np r o f i l i n gw i t h i nt h em a l e I V g o n a d T h e r ea r es i x s i g n i f i c a n tp a t h w a y s ：A r g i n i n e a n dp r o l i n em e t a b o l i s m 、C e l l c y c l e 、R i b o f l a v i n m e t a b o l i
12、s m ，S p l i c e o s o m e 、B a s e e x c i s i o n r e p a i r a n d P r o g e s t e r o n e m e d i a t e do o c y t e m a t u r a t i o n A n dm a n yG O t e r m s 3 T h ee f f e c to fa t r a z i n eo nt h eg e n ee x p r e s s i o nw i t h i nt h el i v e r T h e r ew e r en o s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s i nt h eg e n ee x p r e s s i o no fV T G 、E R 、 H S P 7 0 、G R ：b u ts i g n i f i c a n t l yi n c r e a s eH S P 9 0a n dA R
