晚期氧化蛋白产物单克隆抗体制备的实验及应用研究

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1、实验及应用研究 田梅 指导教师吴雄飞教授 第三军医大学西南医院肾科,4 0 0 0 3 8 申请学位级别博士科学学位专业名称移植医学 论文提交日期2 0 0 9 年5 月论文答辩日期2 0 0 9 年5 月 学位授予单位和日期第三军医大学2 0 0 9 年 月 答辩委员会主席 评阅人 二oo 九年五月 第三军医大学研究生学位论文独创性声明 秉承学校严谨的校风和科研作风,本人申明所呈交的论文是我本人在 导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别 加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究 成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料

2、, 与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明 并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。 论文作者签名:望壁日期: 第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解第三军医大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在 攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第三军医大学。本人保证毕业离 校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为第三军医大学。学校有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查 阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ,可 以采用影印、缩印或其他手段保存论文 论文正文 文献综述一 参

3、考文献 文献综述二 第二军医大学博士学位论文 英文缩写英文名称 A A G E A L E A M I A O P P s A S B S A D M E C A D a b s o r b a n c e 英文缩写一览表 a d v a n c e dg l y c a t i o ne n d p r o d u c t s a d v a n c e dl i p o x i d a t i o ne n dp r o d u c t s a c u t em y o c a r d i a li n f a r c t i o n a d v a n c e do x i d a t

4、i o np r o t e i np r o d u c t s a t h e r o s c l e r o s i s b o v i n es e r u ma l b u m i n p m e r c a p t o e t h a n o l c o r o n a r ya r t e r yd i s e a s e C C A I M Tc o m m o nc a r o t i da r t e r yi n t i m a - - m e d i a t h i c k n e s s C M C M D C R F C R P D M S O E D T A E

5、L I S A H A T H G P I U 中文对照 吸光度 晚期糖基化终产物 晚期脂氧化终产物 急性心肌梗死 晚期氧化蛋白产物 动脉粥样硬化 牛血清白蛋白 p 一巯基乙醇 冠状动脉疾病 颈总动脉内膜中层厚度 c o m p l e t em e d i u m 完全培养基 c a r b o x y m e t h y ld e x t r a n 羧甲基葡聚糖 c h r o n i cr e n a lf a i l u r e c - r e a c t i v ep r o t e i n d i m e t h y ls u l f o x i d e e t h y l e

6、n ed i a m i n e t e t r a a c e t i ca c i d 慢性肾功能衰竭 C 反应蛋白 二甲基亚砜 乙二胺四乙酸 e n z y m e l i n k e di m m u n o s o r b e n t a s s a y酶联免疫吸附试验 h y p o x a n t h i n e a r n i n o p t e r i n t h y m i d i n e次黄嘌呤一氨基喋吟一胸腺嘧啶 h y p o x a n t h i n eg u a n i n ep h o s p h o r i b o s y lt r a n s f e r

7、a s e次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 H D h e m o d i a l y s i s H M W - A O P P s h i g hm o l e c u l a rw e i g h t - A O P P s H R P H S A I g L D L h o r s e r a d i s hp e r o x i d a s e h u m a ns e r u ma l b u m i n i m m u n o g l o b u l i n l o w d e n s i t yl i p o p r o t e i n L M W - A O P P sl o w

8、m o l e c u l a rw e i g h t A O P P s 血液透析 高分子量A O P P s 辣根过氧化物酶 人血清白蛋白 免疫球蛋白 低密度脂蛋白 低分子量A O P P s 第三军医大学博+ 学位论文 L P S M c A b M D A M P O P A G E P B M C P B S R A G E R O S S D S O P D T B A T B A R S T E M E D T K T N F a T r i s T w e e n 一2 0 l i p o p o l y s a c c h a r i d e内毒素 m o n o c l

9、o n a la n t i b o d y m a l o n d i a l d e h y d e m y e l o p e r o x i d a s e 单克隆抗体 丙二醛 髓过氧化物酶 p o l y a c r y l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s聚丙烯酰胺凝胶电泳 p e r i p h e r a lb l o o dm o n o n u c l e a rc e l l外周血单个核细胞 p h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n e r e c e p t o rf o r

10、a d v a n c e dg l y c a t i o ne n d p r o d u c t s r e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s s o d i u md o d e c y ls u l p h a t e 0 一p h e n y l e n e d i a m i n e t h i o b a r b i t u r i ca c i d t h i o b a r b i t u r i ca c i d r e a c t i v es u b s t a n c e s t e t r a m e t h y l e t

11、h y l e n ed i a m i n e t h y m i d i n ek i n a s e t u m o rn e c r o s i sf a c t o r - a t h r i h y d r o x y a m i n o m e t h a n e t w e e n 2 0 t y r o s i n e 2 磷酸盐缓冲溶液 晚期糖基化终产物受体 活性氧簇 十二烷基硫酸钠 邻苯二胺 三巴比妥酸 三巴比妥酸反应底物 四甲基乙二胺 胸腺嘧啶激酶 肿瘤坏死因子一a 三羟甲基氨基甲烷 吐温2 0 酪氨酸 第三军医人学博十学位论文 P r e p a r a t i o

12、na n de x o 鼍 n e n t a lm d c l i n i c a ls t u d y e n m e n t a la nC l l n1s t u o yo f0 I m o n o c l o n a la n t ib o d ya g a i n s ta d v a n c e d 一一- 一 -ll o x i d a t i o np r o t e i np r o d u c t s np r o t e i np r o a u c t s A b s t r a c t A d v a n c e do x i d a t i o np r o t

13、e i np r o d u c t s ( A O P P s ) a r ed i t y r o s i n e c o n t a i n i n gp r o t e i n c r o s s i n gp r o d u c t si s o l a t e df r o mt h ep l a s m ao fh e m o d i a l y s i s ( H D ) p a t i e n t s ,w h i c h w a sf i r s t l y r e p o r t e db yW i t k o - S a r s a ti n 19 9 6 A O P

14、P sr e p r e s e n tag e n e r i cn a m ef o rf i n a lp r o d u c t so f o x i d a t i v em o d i f i c a t i o no fp r o t e i n sc a u s e db yo x i d a t i v es t r e s si nH Dp a t i e n t s A O P P sr i s ea s n o v e lu r e m i ct o x i n sw i t ht h ep r o g r e s s i o no fc h r o n i cr e

15、n a lf a i l u r e ( C R F ) a n do x i d a t i v es t r e s s a n da c c u m u l a t ei nH Dp a t i e n t s p l a s m aa n dt i s s u e s I th a sb e e nc l a r i f i e dt h a tA O P P sa r ea n o v e lc l a s so fp r o i n f l a m m a t o r ym e d i a t o r sw i t hm o n o c y t e sb e i n gt h e

16、i re l e c t i v ec e l l u l a r t a r g e t A O P P sa r e a b l et ot r i g g e rt h eo x i d a t i v eb u r s to fm o n o c y t e sa n dt h er e l e a s eo f i n f l a m m a t o r yc y t o k i n e s ,a n dt a k ep a r ti nt h ep r o c e s so fs y s t e m i cm i c r o i n f l a m m a t i o no f C R F p a t i e n t s ,w h i c hi sa c r u c i a lp a t h o g e n i cl i n kt ol o n g - t e r mu r e m i cc o m p l i c a t i o n s ,s u c ha s d y s r e g

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