消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植模型乙酰肝素酶影响的研究

《消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植模型乙酰肝素酶影响的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植模型乙酰肝素酶影响的研究（55页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、第二军医大学 硕士学位论文 消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植模型乙酰肝素酶影响的研究 姓名：贾占民 申请学位级别：硕士 专业：中西医结合临床 指导教师：魏品康 20100501 第：军医大学硕上学位论文 于两要 背景：胃癌是当今世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，居我国消化 道恶性肿瘤之首。胃癌的治疗近3 0 年虽然取得了长足的进展，然而国内外胃癌术后的 5 年生存率仍徘徊2 0 3 0 。肿瘤的转移，严重影响了患者术后生存期。魏品康教授根 据多年从事的胃癌临床治疗工作经验，认为“痰”是恶性肿瘤发生发展的物质基础； 并运用消痰散结方治疗肿瘤，取得了满意的效果。乙酰肝素酶( H P A )

2、是近年来发现 在多数肿瘤细胞中表达的一种酶，具有裂解细胞外基质( E C M ) 和基底膜( B M ) ， 促进微血管牛成的作用，在肿瘤的转移过程中起重要的作用。本课题基于H P A 对肿瘤 转移的影响，建立裸鼠原位移植模型，探讨痰消散结方对肿瘤转移的影响，深入研究 消痰散结方抗肿瘤转移的4 J L * 0 。 目的：建立裸鼠人胃腺癌M K N 4 5 原位移植瘤模型，通过应用消痰散结方干预， 研究消痰散结方对模型鼠外周血C K 2 0 m R N A 及肿痛组织中M V D 和H P A 的影响，探讨 消痰散结方在抑制肿瘤转移方面可能的机制。 方法：1 利用原位移植的方法，将人胃癌M K

3、N 4 5 瘤株建立在B A L B C 裸小鼠 胃壁浆膜层下，观察移植瘤后小鼠生存状态。 2 采用完全随机的方法将3 0 只裸鼠模型分为3 组，即：生理盐水组、消痰散结 方组、5 F u 组，每组1 0 只。于模型建立后第二天后开始给药，生理盐水0 4 m l 次， 1 次d ，连续灌胃6 周；消痰散结方浓缩煎剂0 4 m l 次，1 次d ，连续灌胃6 周； 0 2 m l 次，按6 0 m g k g 腹腔注射，1 次周，连续用药3 周。 3 。于第6 周实验结束时，眼球取血，R T - P C R 法测定C K 2 0 m R N A 。处死动物， 打开腹腔，收集原位瘤组织，称取瘤重，

4、计算抑瘤率，计算肝脏转移灶数目。 4 取瘤组织进行免疫组化染色，计算肿瘤组织中M V D ，测定分析原位移植瘤组 织H P A 的表达强度。 结果：1 成功建立人胃痛M K N 4 5 裸鼠原位移植模型。造模后第二周起，部分 裸鼠可在上腹部触及硬肿块，后肿块逐渐增大，质地较硬，较大者中间可有坏死组织。 移植瘤原位成功率1 0 0 。测定瘤重，计算抑瘤率，消痰散结方、5 F u 组的抑瘤率分 别为5 6 3 、4 7 2 ，统计分析显示，消痰散结方组、5 F u 组与生理盐水组移植瘤质 量比较有明显降低，差异有统计学意义( P = 0 0 0 0 ，P 0 0 5 ) ；同时消痰散结方组较生 理

5、盐水组肝脏转移灶有明显减少，差异有统计学意义( P = - 0 0 0 7 。P 0 0 5 ) ；5 F u 组与 生理盐水组差异也有统计学意义( P = - 0 0 3 ，P 0 0 5 ) 。 2 消痰散结方组与生理盐水组相比，消痰散结方能显著降低外周血中 2 消痰散结方对对裸鼠胃癌原位移植模型乙酰肝素酶影响的研究 C K 2 0 一m R N A 的表达( P = 0 0 0 4 ，P 0 0 5 ) 。 3 结果显示消痰散结方组能显著减少肿瘤组织中M V D ( P = 0 0 0 ，P 0 0 5 ) 。消痰散结方组与 生理盐水组瘤组织中H P A 均有表达，消痰散结方组较生理盐水

6、组能显著降低肿瘤组织 H P A 的表达明显降低，差异有统计学意义( P = 0 0 1 ，P 0 0 5 ) 。 结论：1 利用人胃腺痛M K N 4 5 瘤株成功建立裸鼠原位移植模型，消痰散结方对 裸鼠原位移植瘤的生长具有明显的抑制作用，同时能有效减少肝脏转移灶的数目： 2 消痰散结方能有效减少外周血C K 2 0 m R N A 的表达，明显抑制肿瘤细胞进入外 周血，对肿瘤的转移具有重要的抑制作用： 3 消痰散结方能有效降低荷瘤鼠肿瘤组织中M V D ； 4 消痰散结方对裸鼠人胃癌原位移植瘤模型的瘤组织中H P A 具有明显的抑制用。 关键词：中医，消痰散结方，胃癌，细胞角蛋白，微血管密

7、度，乙酰肝素酶 3 第二军医人学硕士学位论文 A b s t r a c t B a c k g r o u n d ：G a s t r i cc a n c e ri sam a l i g n a n tt u m o rw h i c hh a s t h eh i g h e s tm o r b i d i t ya n d m o r t a l i t yi ng a s t r o i n t e s t i n a lc a n c e ri nC h i n a T h o u g ht h et r e a t m e n t so fg a s t r i cc a

8、n c e rh a v e b e e ni m p r o v e d ，t h e5 - y e a rs u r v i v a lr a t eo fg a s t r i cc a n c e ri ss t i l lh o v e r i n g2 0 t o3 0 a l l o v e rt h ew o r l df o rn e a r l y3 0y e a r s T u m o rm e t a s t a s i sh a sag r e a ti m p a c to np o s t o p e r a t i v e s u r v i v a l T h

9、 r o u g hal o n gt i m eo fc l i n i c a lp r a c t i c ea n de x p e r i m e n t a lr e s e a r c h ，P r o f e s s o r W e i p i n k a n gt h i n k st h a tp h l e g mi s a ni m p o r t a n tm a t e r i a lf o u n d a t i o no fc a n c e r H eh a s e s t a b l i s h e dt h ep h l e g mS y n d r o

10、m et h e o r y , t h e nd e v i s e dt h eX i a o t a nS a n j er e c i p e ，w h i c hh a s a c h i e v e ds a t i s f a c t o r yr e s u l t s H e p a r a n a s ei san e w l yf o u n de n z y m ew h i c hc a nd e f o r me x t r a c e l l u l a rm a t r i xa n db a s e m e n tm e m b r a n ea n dr e

11、 d u c em i c r o v e s s e ld e n s i t y , w h i c hp l a y sa n i m p o r t a n tr o l ei nt u m o rm e t a s t a s i s D u et oe f f e c to fh e p a r a n a s ew ee s t a b l i s h e dt h en u d e m i c em o d e lo fo r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o na n dd e e p l ys t u d yt h ep

12、 o s s i b l e i n h i b i t i o n m e c h a n i s mo ft h em e t a s t a s i so fX i a o t a nS a n ji eR e c i p e o b j e e t i v e ：T h ep u r p o s eo ft h i ss t u d yi st od i s c o v e rt h em e c h a n i s mo fX i a o t a nS a n ji e R e c i p er e s t r a i n i n gt h em e t a s t a s i so

13、 ft h eh u m a ng a s t r i cc a r c i n o m ai m p l a n t e di nn u d em i c e m o d e lw h i c hi ss i m i l a rt Ot h es t y l eo fh u m a nc a n c e ri n v a s i o na n dm e t a s t a s i s ，b ye x a m i n i n g t h ec h a n g eo fC K 2 0 m R N Aa n dM V Da n dh e p a r a n a s e M e t h o d s

14、：I T h es c r e e n e dM K N - 4 5c a n c e rc e l ll i n ew a si m p l a n t e di nB A L B Cn u d e m i c es t o m a c hn e a rt h eg r e a t e rc u r v a t u r es i d e ，n u d em i c et r a n s p l a n t a t i o nt u m o rm o d e lo f h u m a ng a s t r i cc a n c e rW a ss e tu p ，t h eg r o w t

15、ho ft u m o ra n dt h el i f es t a t u so fm i c ew e r e o b s e r v e dr e g u l a r l y T h ea n i m a l sw e r es a c r i f i c e da n do b s e r v e dt h el o c a lg r o w t ho f t r a n s p l a n t e dt u m o rW a so b s e r v e d 2 3 0B A L B Cn u d em i c ew e r ed i v i d e di n t o3 g r o

16、 u p sc o m p l e t e l ya n dr a n d o m l y ：c o n t r o l g r o u p ，X i a o t a nS a n j i eR e c i p eg r o u p ，5 一F ug r o u p T h em i c ei nc o n t r o lg r o u pw e r eg i v e n i s o t o n i cs a l i n e0 4 m li go n c ead a y ；i nh e r bg r o u p sg i v e nX i a o t a nS a n j i eR e c i p e0 4 m lo n c e ad a y ；i n5 - F ug r o u pg i v e n5 一F ud i l u t i o n ( 6 0 m g k g - 1 w - 1 ) 0